代谢酶基因多态性与环境暴露交互作用的分析方法及其应用

目的 以肿瘤易感基因谷胱苷肽-S转硫酶（GST）M1缺失基因型为例,说明基因与环境暴露交互作用的分析方法以及应用。方法 采用社区为基础的病例对照研究方法,代谢酶基因多态性的检测用PCR技术,资料分析用多因素logistic回归模型。研究对象为1997年1月至1998年12月经扬中市人民医院确诊,肠型胃癌病例112例,以同期该地无上消化道肿瘤“健康”人群为对照,共675例。结果 调整混杂因素后,GST M1缺失基因型与既往吸烟史的交互作用系数为3.38,OReg值达8.40,有极显著意义,为4型交互作用中的超相乘模型;GST M1缺失基因型与吸烟量的交互作用呈高暴露-基因效应,交互作用系数分别为0.995、2.085和2.157,即随着暴露剂量增加,交互作用强度也逐渐增加;与饮酒量呈低暴露-基因效应,交互作用系数分别为1.01和0.97,交互作用强度随暴露剂量增加而逐渐降低。结论 基于logistic模型的分析方法,可用于评价基因-环境之间的交互作用,以及剂量反应关系的暴露基因效应。     

葡萄糖和胰岛素对Colon 26肿瘤细胞TGF-β1 mRNA表达的影响

目的本试验模拟糖尿病病程不同阶段患者体内葡萄糖和胰岛素浓度的变化,研究不同浓度的葡萄糖和胰岛素对Colon 26肿瘤细胞TGF-β1 mRNA表达的影响。方法体外常规培养Colon 26肿瘤细胞。根据所用培养液外加葡萄糖和胰岛素浓度的不同,将实验所用细胞共分12组：A组（对照组）RPMI 1640培养液;B组加5 mmol/L葡萄糖;C组加10 mmol/L葡萄糖;D组加25 mmol/L葡萄糖;E组加5μIU/ml胰岛素;F组加25μIU/ml胰岛素;G组加125μIU/ml胰岛素;H组加5 mmol/L葡萄糖＋5μIU/ml胰岛素;K组加5 mmol/L葡萄糖＋125μIU/ml胰岛素;L组加25 mmol/L葡萄糖＋125μIU/ml胰岛素;M组加25 mmol/L葡萄糖＋5μIU/ml胰岛素;N组加25 mmol/L葡萄糖＋1.25μIU/ml胰岛素。每组设3个复孔,置37℃5%CO2饱和湿度的培养箱培养48 h,收集细胞后抽提总RNA,RT-PCR同时扩增目的片段TGF-β1和内参照β-actin,琼脂糖凝胶电泳,扩增产物在凝胶成像系统上扫描分析,计算TGF-β1 mRNA相对表达量。整个实验过程均重复3次。结果D组TGF-β1 mRNA的表达（0.768±0.017）高于A组（0.540±0.012）,差异有显著性（P〈0.01）;而B、C组TGF-β1 mRNA的表达（0.545±0.033、0.558±0.035）与A组相比均无显著性差别（P〉0.05）。E、F、G组对Colon 26肿瘤细胞TGF-β1 mRNA的表达（分别为0.566±0.039、0.549±0.030、0.531±0.022）与A组相比无显著性差别（P〉0.05）。L、M、N组的TGF-β1 mRNA表达（分别为0.889±0.028、0.764±0.027、0.752±0.035）均高于A组（0.540±0.012）,差异有显著性（P〈0.01）;而H、K组的TGF-β1 mRNA表达（0.550±0.037、0.537±0.025）与A组相比均无显著性差别（P〉0.05）。结论高浓度的葡萄糖能够上调Colon 26肿瘤细胞TGF-β1 mRNA的表达,不同浓度的胰岛素不影响Colon 26肿瘤细胞TGF-β1 mRNA的表达,高浓度的葡萄糖和胰岛素同时作用能够上调Colon 26肿瘤细胞TGF-β1 mRNA的表达     

1996年对胃癌高发区人群幽门螺杆菌(HP)感染情况的检查报告

本文对胃癌高发区(山东省牟平县)成年人群1038人进行了 HP 感染的检查。每例均做内镜、快速尿素酶试验及四块胃粘膜活检组织学检查。结果显示:1.以 CLO、WS 同时阳性做为判断 HP 阳性的标准,活动性胃炎的HP 感染率最高84.66%,其次是十二指肠溃疡:84.21%,胃溃疡:81.25%,慢性浅表性胃炎:62.87%,慢性萎缩性胃炎:58.55%。2.以 WS 阳性做为判断 HP 阳性的标准,HP 在胃内分布以胃底部阳性率最高:61.51%,其次为体小弯:55.66%,窦大弯:51.24%,窦小弯:50.85%,胃底部 HP 阳性率明显高于胃窦部:P<0.01。3.活检取胃底加体小弯两块组织的 HP 阳性率接近于取四块组织的 HP 阳性率。     

玉屏风散预防放射致小鼠外周血T细胞免疫损伤的研究

放射治疗是许多恶性肿瘤的主要治疗手段.T淋巴细胞是一类对放射最敏感的群体,放疗在杀死肿瘤细胞的同时,会对机体T细胞免疫造成不容忽视的损伤[1].     

医学免疫学实验教学内容的改革

为适应科技发展对人才的要求,提高医学免疫学实验教学效果,以培养学生实验兴趣、能力为出发点,对现有免疫学实验教学内容进行了改革：在优化必不可少的经典验证性实验的基础上,设计开设综合性实验,大力开展设计性实验。实践证明,改革激发了学生的学习热情,培养了学生的创造性思维,锻炼了学生的创新能力、实践能力和解决实际问题的能力,提高了免疫学实验教学的效果。     

葡萄糖、胰岛素对Colon26肿瘤细胞分泌VEGF的影响

目的：观察不同浓度的葡萄糖和胰岛素对结直肠癌细胞株Colon26肿瘤细胞分泌VEGF的影响．方法：体外培养Colon26肿瘤细胞,根据培养液中加入的葡萄糖和胰岛素终浓度的不同,将实验所用细胞分成12组．每组设3个复孔,培养48h,收集细胞培养上清,ELISA法检测VEGF的浓度．结果：B,C,D组（培养液分别加5,10,25mmol／L的葡萄糖）的VEGF浓度与A组（培养液未加葡萄糖和胰岛素,为对照组）的VEGF浓度相比无显著性差异（P〉0．05）．G组（培养液加125mU／L的胰岛素）的VEGF浓度明显高于A,E,F组（培养液分别加0,5,25mU／L的胰岛素）的VEGF浓度,差异有显著性（P〈0．01）,而A组、E组与F组之间无显著性差异（P〉0．05）．K、L组（培养液分别加5,25mmol／L的葡萄糖和125,125mU／L胰岛素）的VEGF浓度均明显高于A组的VEGF浓度,差异有显著性（P〈0．01）,而K、L组组间无差异．H,M,N组（培养液分别加5,5,1．25mU／L的胰岛素和5,25,25mmol／L的葡萄糖）的VEGF浓度与A组相比无显著性差异（P〉0．05）．结论：葡萄糖的浓度对Colon26肿瘤细胞分泌VEGF无明显影响．高浓度的胰岛素可增加Colon26肿瘤细胞VEGF分泌．     

20例再生障碍性贫血的细胞因子和粘附分子的表达分析

目的 评价造血微环境中细胞因子对再生障碍性贫血（AA）发病的影响及其临床意义。方法 对20例AA患者及8名正常人用酶联免疫法检测骨髓和外周血中粒细胞集落刺激因子（G－CSF）、肿瘤坏死因子－α（TNF－α）水平；用免疫荧光法检测骨髓和外周血单个核细胞血小板内皮细胞粘附分子（CD31）、淋巴细胞归巢受体（CD44）抗原表达水平。结果 AA组骨髓及外周血G－CSF、TNF－α水平均明显高于正常对照组（P＜0.01)；而CD31、CD44抗原水平却明显低于正常对照组（P＜0.01)。相关分析发现：AA组骨髓及外周血中，G－CSF与外周血白细胞数有髓中粒系比例呈负相关；TNF－α与外周血白细胞数、血小板、血红蛋白及骨髓中粒系比例、红系比例、巨核细胞数均呈负相关；CD31^ 、CD44^ 细胞数与外周血白细胞数、血小板、血红蛋白以及骨髓中粒系比例、红系比例和巨核细胞数呈正相关。结论 造血微环境异常及细胞因子网络失调可能在AA发病中起一定作用。     

不同类别抗瘤中药制剂逆转结直肠癌NK免疫功能抑制的比较研究

目的比较研究不同类型抗瘤中药制剂对结直肠癌所致NK免疫功能抑制的影响。方法分别制备三氧化二砷（As2O3）、川芎嗪（LHC）、黄芪（AMB）、氧化苦参碱（MOX）、猪苓多糖（PUPS）、蒿甲醚（ART）等6种中药制剂作用后的结直肠癌细胞Colon 26再培养上清,以不经中药制剂作用的相应上清为对照;MTT法检测不同中药制剂作用后再培养上清对小鼠脾细胞NK杀伤活性的影响,直接免疫荧光FCM法检测对小鼠脾细胞CD 3ε^-ζ^＋表达的影响。结果对NK杀伤抑制的下调,As2O3、PUPS及ART之间未见显著差异（均P〉0．05,下调49．65％±8．86％）,LHC及AMB之间未见显著差异（P〉0．05,下调78．15％±9．81％）;AMB的下调作用最强。对CD 3ε^-ζ^＋表达抑制的下调,LHC和PUPS的初始下调幅度未见差异（P〉0．05,下调88．04％±7．57％）,AMB和ART的初始下调幅度未见差异（P〉0．05,下调50．00％±8．24％）,MOX与其他中药制剂的作用之间均有差异（均P〈0．01,完全消除抑制并明显促进表达）;LHC的下调作用最强。结论逆转结直肠癌细胞产生的NK免疫功能抑制是中药制剂发挥抗瘤效应的机制之一。临床可考虑联合使用扶正祛邪类及活血化瘀类抗瘤药物组方,以调整患者不利于临床治疗的NK免疫抑制状态。     

不同IL-15转染对NCI-H446 HLA-Ⅰ和HLA-Ⅱ表达及NK敏感性的影响

目的探讨不同形式IL-15基因转染对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446细胞HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达及NK杀伤敏感性的影响。方法在本室已构建的3种细胞模型（转染IL-15成熟肽基因的NCI-H446／IL-15mp细胞、转染原型IL-15基因的NCI-H446／IL-15细胞和转染以IL-2信号肽替代IL-15信号肽的改型IL-15基因的NCI-H446／IL-2sp-IL-15mp细胞）基础上，以野生株细胞为对照，流式细胞分析仪（Fluorescence-activated cell Sorter，FACS）分析这3种细胞HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达，四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定它们对NK杀伤的敏感性。结果野生株NCI-446细胞表面阳性表达HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子；转染IL-15成熟肽基因或改型IL-15基因后，这两种分子的表达均被抑制为阴性；转染原型IL-15基因后，这两种分子的表达均被显著上调。5名不同健康志愿者的外周血单个核细胞（PBMC）对野生株NCI-H446细胞的平均NK杀伤率最低，对NCI-H446／IL-15、NCI-H446／IL-15mp和NCI-H446／IL-2sp-IL-15mp细胞的平均NK杀伤率依次升高。结论转染不同形式IL-15基因对NCI-H446细胞的免疫生物学特性影响不同。转染IL-15成熟肽基因或改型IL-15基因，抑制NCI-H446细胞表面HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达；转染原型IL-15基因，上调这两种分子的表达；转染不同形式IL-15基因均可增强NCI-H446细胞对NK杀伤的敏感性，但程度不同；以改型IL-15者最高，IL-15成熟肽者次之，原型IL-15者最低。