人MICA基因多态性和表达特性与肿瘤的关系

近年来,关于MICA与肿瘤关系的研究进展显著。MICA是NK细胞活化性受体NKG2D的配体,可高表达于上皮源性的肿瘤细胞;NKG2D不仅表达于NK细胞,还表达于CTL和Vδ1γδT细胞;NKG2D以一种可诱导的方式识别并结合MICA,从而活化上述抗瘤效应细胞。     

抗HIV-1 p24 单克隆抗体的制备、特性鉴定及初步应用

目的：制备抗HIV-1p24单克隆抗体（mAb）及特性鉴定。方法：采用细胞融合技术制备可稳定分泌抗HIV-1p24mAb的杂交瘤细胞。选择高效价、识别不同抗原表位的mAb纯化后，分别包被ELISA板及作为酶标记mAb，建立双mAb夹心ELISA法，检测400份正常人血浆，20份抗HIV抗体阳性（p24抗原阴性）的血浆，20份HIV-1感染的细胞培养上清及HIV-1p24抗原国家参考品，并同时用进口p24抗原检测试剂盒进行对比检测。结果：经细胞融合、筛选、克隆化，共获得10株可分泌高效价mAb的杂交瘤细胞。纯化的腹水mAb经配对试验，选A值≥2．50的2株mAb建立的双mAb夹心ELISA法，敏感性可达2．5ng／L，且与进口试剂盒检测结果的一致性良好。结论：建立了具有高度敏感性和特异性的双mAb夹心ELISA法，为研制可用于检测HIV-1p24抗原的试剂盒奠定了基础。     

抗人白细胞介素15单克隆抗体的制备及特性鉴定

目的 :制备鼠抗人白细胞介素 15(hIL 15)单克隆抗体 (mAb) ,并鉴定其特性。方法 :自重组人白细胞介素 15(rhIL 15)基因工程菌中 ,提取融合蛋白GST IL 15,以 12 0g/LSDS PAGE分离鉴定 ,切取含有目的条带的凝胶 ,免疫BALB/c小鼠。取免疫小鼠的脾细胞与Sp2 / 0骨髓瘤细胞常规融合 ,依次进行HAT选择培养 ,间接ELISA法筛选抗体阳性的杂交瘤细胞及克隆化。对杂交瘤细胞株的稳定性及其分泌的mAb的特性进行鉴定。另外 ,以rhIL 15包涵体蛋白 (rhIL 15IBP)免疫新西兰白兔 ,制备抗hIL 15的多克隆抗体 (多抗 )。用抗hIL 15的mAb与多抗建立双抗体夹心间接ELISA。结果 :获得 1株可稳定分泌特异性抗hIL 15mAb的杂交瘤细胞。建立了双抗体夹心间接ELISA ,检测rhIL 15蛋白的敏感性达 10 μg/L。结论 :成功地制备抗hIL 15mAb ,并建立了一种可用于hIL 15检测的双抗体夹心间接ELISA。     

青蒿琥酯、苦参素对Colon26肿瘤细胞免疫抑制的影响

为了研究青蒿琥酯(ART)、苦参素(MOX)是否可逆转Colon26肿瘤细胞对免疫细胞功能的抑制,分别制备经这两种中药作用后的Colon26再培养上清,同时以不经中药作用的Colon26相应上清作对照,研究对小鼠脾细胞功能的影响,包括以MTT法测定NK杀伤和ConA诱导转化,以及流式细胞术分析的CD4+及CD8+表达的影响,定量ELISA测定TGF-β1、VEGF、IL-4、IL-6和IL-10五种免疫抑制物质的含量,并分析这两种中药下调Colon26分泌免疫抑制物质与上清免疫抑制之间的关系。结果显示,不经中药作用的Colon26培养上清中五种免疫抑制物质均可被测到,以TGF-β1含量最高;该上清对所测的小鼠脾细胞免疫功能均有显著抑制。ART作用后的Colon26,其第一次再培养上清的TGF-β1、VEGF、IL-10含量,及对小鼠脾细胞ConA诱导转化、CD4+CD8-表达及NK细胞杀伤的抑制均明显降低;其第二次再培养上清的TGF-β1和IL-10含量,及对ConA诱导转化和CD4+CD8-表达的抑制继续保持较低,VEGF含量及NK细胞杀伤的抑制恢复至对照水平。MOX作用后的Colon26,其第一次再培养上清的TGF-β1和IL-10含量,及对小鼠脾细胞ConA诱导转化的抑制均明显降低;其第二次再培养上清TGF-β1和IL-10含量继续降低,对ConA诱导转化的抑制恢复至对照水平。相关分析显示,ART及MOX作用后,Colon26培养上清对小鼠脾细胞转化的抑制均与TGF-β1含量正相关;ART作用后,Co-lon26培养上清对NK细胞杀伤的抑制与IL-10含量正相关。以上结果表明,ART和MOX可通过抑制免疫抑制物质的分泌而逆转Colon26肿瘤细胞的免疫抑制作用,这可能是ART和MOX的抗瘤机制之一。     

中国南方汉族人群三种代谢酶基因多态性的分布特征

目的 了解中国南方某汉族人群3种肿瘤易感代谢酶基因多态性的分布特征。方法 以社区为基础的病例－对照研究中对照人群为分析对象，包括有血缘关系内对照290人和无血缘关系外对照404人。结果 3种代谢酶基因多态性在性别、居信地区、胃癌家族史、吸烟史等混杂因素中的频率差异均无显著性，个别组在年龄、饮酒史中的分布有差异，在相关性分析时需调整。CYP1A1 Ile/Val基因型频率为33.43%，Val/Val为5.62%，与中国人、日本人频率接近，但明显高于美洲、欧洲白人及美国黑人；GSTM1缺失基因频率为53.48%，在中国人群中也有一定差异；GSTT1缺失基因频率为45.78%，显著高于白种人和美国黑人。结论 中国南方汉族人CYP1A1突变基因频率和GSTT1缺失基因频率高于其它种族，而GSTM1缺失基因频率与其它种族的差异较小。     

瑞香狼毒甲醇提取物抗瘤机理研究

目的 研究瑞香狼毒甲醇提取物的抗瘤机理。方法 用不同剂量的瑞香狼毒甲醇提取物(简称醇提物)，观察其体内对荷瘤鼠和所荷肿瘤生长的作用；MTT法研究其体内对荷瘤鼠脾细胞转化及NK活性，体外对正常鼠脾细胞生长、转化和NK活性以及对3株肿瘤细胞增殖的影响；流式细胞术和透射电镜检测其体外对K562的细胞周期和凋亡及p53、bcl-2和c-myc基因表达的影响；台盼蓝拒染法检测其体外对K562增殖曲线的影响。结果 体内，每天5μg/kg醇提物可抑制肿瘤生长，提高荷瘤鼠免疫功能。体外，0．1～l0μg/ml醇提物可刺激脾细胞增殖和协同最适量和亚适量ConA刺激脾细胞转化，0．1～10μg/ml醇提物可提高脾细胞NK杀伤活性，0．1～l0μg/ml醇提物对K562、S180和YAC-1的增殖均有抑制作用，K562最为敏感。0．5μg/ml醇提物作用的K562，处于G0/G1期的细胞和凋亡细胞显著增加，p53基因表达显著增加，bcl-2和c-myc基因表达显著下降。K562在0．5μg/ml醇提物作用24h后洗去或不洗去培养9d，细胞虽仍存活，但密度却不增加。结论 醇提物在一定剂量范围内可抑制肿瘤细胞生长，提高荷瘤鼠免疫功能。抗瘤机理与其可刺激脾细胞增殖，协同ConA刺激脾细胞转化和提高脾细胞NK杀伤活性及阻滞肿瘤细胞周期，抑制其分裂增殖，促进其凋亡有关。     

rIL-2、rTNF-α和PHA协同促进胎儿的脾细胞和胸腺细胞增殖的研究

本文观察了胎儿脾细胞和胸腺细胞对ｒＨｕＩＬ-２、ｒＨｕＴＮＦ-α和ＰＨＡ的体外应答能力。胎儿脾细胞对三者单独都能产生增殖反应，ＩＬ-２与ＰＨＡ与ＴＮＦ-α、ＰＨＡ与ＩＬ-２以及ＰＨＡ与ＴＮＦ-α两两联合对胎儿脾细胞都能产生明显的协同刺激作用，三者同时与胎儿脾细胞共育协同作用最强。胎儿胸腺细胞对ＰＨＡ、ｒＨｕＩＬ-２或ｒＨｕＴＮＦ-α单独均不产生应答，只有当ＰＨＡ与ｒＩＬ-２联合刺激时才能产生增殖反应。可见胎儿脾细胞对ＩＬ-２、ＴＮＦ-α和ＰＨＡ已有很好的应答能力，而胎儿胸腺细胞对其应答能力较差。     

国产HIV-1p24抗原检测试剂盒的评价

目的探讨国产的HIV-1 p24抗原检测试剂盒进行药物筛选研究的可行性。方法对国产试剂盒的使用性能与Biomerieux公司商品化的Vironostika试剂盒进行比较,评估国产试剂盒的敏感性、重复性及检验效能。结果国产试剂盒具有较高的敏感性和重复性,在体外药效学筛选实验中国产试剂盒的阳性检出率及药物评价结果与Vironostika试剂盒差异无统计学意义(P>0.05)。结论国产试剂盒具有较好的使用特性,在药物筛选中可以用国产试剂盒替代Vironostika试剂盒。     

黄芪对S180肿瘤培养上清免疫抑制作用的影响

目的：研究黄芪对S180肿瘤培养上清免疫抑制作用的影响。方法：用有或无中药作用的肿瘤培养上清，以MTT法检测其对小鼠脾细胞转化、IL2产生、NK杀伤活性及CTLL2细胞IL2反应性的影响，以流式细胞仪检测其对小鼠脾细胞表面IL2Rα表达的影响。结果：单纯肿瘤上清可强烈抑制所测5项指标。在单纯肿瘤上清中加入中药可明显上调上述5项指标。先用含中药培液培养肿瘤细胞，而后洗去或不洗去中药再培养肿瘤细胞所得的上清，也可明显上调所测5项指标。结论：黄芪可以直接对抗肿瘤上清的免疫抑制作用；下调S180肿瘤细胞合成和/或分泌免疫抑制物质     

丁胺卡那霉素与头孢拉定治疗小儿支气管肺炎对肾小管功能的影响

目的:探讨丁胺卡那霉素与头孢拉定治疗小儿支气管肺炎对肾小管功能的影响。方法:将55例支气管肺炎患儿分成4组,分别用不同抗生素配伍治疗,并测定其尿中β_2微球蛋白含量。结果:丁胺卡那霉素 头抱拉定与其它几种抗生素配伍联合应用相比,尿β_2微球蛋白含量升高有显著差异。结论:头孢拉定确能加重丁胺卡那霉素对肾小管功能的损害,建议作这样的药物配伍要慎重,以避免加重对患儿肾功能的损害。