婴儿中重度喉软化症临床转归及中长期随访研究

目的 评估伴发畸形的婴儿喉软化症的转归及中长期预后情况,探讨婴儿喉软化症的临床管理规范.方法 回顾性收集2013 年1月至2015 年12月在我院确诊的中-重度喉软化症婴幼儿的临床资料及随访结果.将这些患儿分为伴发畸形组(37例)及不伴发畸形组(19例).结果 56例喉软化患儿纳入研究.伴发畸形组呼吸症状消失月龄[(10.00±3.56)个月]大于不伴发畸形组[(7.89±3.03)个月],差异有统计学意义 (P＜0.05).伴发畸形组患儿在确诊后3、6及12个月时的体重百分位明显低于不伴发畸形组(P＜0.05).而确诊后24个月两组患儿的体重百分位比较差异无统计学意义.伴发畸形组共有5例患儿接受声门上成形术,其中1例最终需行气管切开术;不伴发畸形组共有3例患儿接受声门上成形术.结论 中-重度喉软化患儿呼吸症状及体格发育落后均可随月龄增长而逐渐改善,目前没有证据提示伴发畸形的此类患儿需要更积极的声门上成形术.     

纤维支气管镜在婴儿呼吸系统疾病中的诊治价值

目的探讨纤维支气管镜在婴儿呼吸系统疾病中的诊治价值及其安全性。方法回顾我院收治的52例婴儿行75例次的纤支镜检查及治疗,其中<1个月23例,1个月~1岁29例。结果明确诊断气道狭窄5例,食道气管瘘4例,肺出血5例;肺泡灌洗液细菌培养18例次,13例次有细菌生长,阳性率72.2%;肺不张13例,以炎症为主(88.2%),治愈率为92.3%;难治性肺炎16例,治愈率87.5%。结论纤维支气管镜在小婴儿呼吸系统疾病中具有诊断及治疗双重作用,且其安全性好,值得推广。     

卫生Ⅷ项目管理经验总结

1998年我省12个县开始实施了世界银行贷款基本卫生服务项目(简称卫生Ⅷ项目)，通过几年的实施，我省项目地区农村卫生工作取得了长足的进步，对项目取得的成绩和管理经验进行了简要的总结。     

纤维支气管镜在小儿呼吸系统疾病中的应用

目的:探讨纤维支气管镜(纤支镜)在小儿呼吸系统疾病中的诊治价值及其安全性。方法:回顾该院2000年1月～2005年2月收治的90例患有呼吸系统疾病的小儿行127例次的纤支镜检查及治疗情况。结果:明确诊断气道狭窄10例;食道气管瘘6例;肺出血8例;肺泡灌洗液细菌培养45例次,31例次有细菌生长,阳性率68.89%;肺不张28例,以炎症为主占85.77%(24/28),治愈率为92.86%(26/28);反复性肺部感染31例,治愈率87.10%(27/31)。结论:纤支镜在小儿呼吸系统疾病中具有诊断及治疗双重作用,而且其安全性好,在儿科呼吸系统疾病的诊治中值得广泛推广。     

卡前列素氨丁三醇防治剖宫产术中、术后出血的临床研究

目的:探讨卡前列素氨丁三醇防治剖宫产术中、术后出血的临床疗效。方法:选择有出血高危因素行剖宫产术的产妇120例,分成研究组及对照组,每组60例。两组均在胎儿娩出后常规静脉滴注催产素的基础上,研究组于宫体注射卡前列素氨丁三醇250μg,对照组予卡孕栓1.0mg舌下含服,比较两组术中出血量、产后2h及产后2～24h内的出血量及两组产后出血率。比较两组患者用药前及用药后生命体征变化。结果:研究组术中出血量、产后2h出血量、产后2～24h出血量均少于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),研究组产后出血率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组用药前、后生命体征变化相近,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:卡前列素氨丁三醇可有效防治有出血高危因素产妇剖宫产术中、术后出血,快速方便,效果确切,不良反应少。     

重组人血清白蛋白/干扰素α2a融合蛋白的药效学、药代动力学及安全性评价

目的对具有独立自主知识产权的注射用重组人血清白蛋白/干扰素α2a融合蛋白新药的临床前药效学、药代动力学和安全性评价进行研究。方法通过重组人血清白蛋白/干扰素α2a融合蛋白(rHSA/IFNα2a)对HepG22.2.15分泌乙型肝炎病毒(HBV)细胞作用产生的抗病毒进行体外药效学评价;以给药后的食蟹猴体内2'-5'寡腺苷酸合成酶活性作为干扰素药效学标志基因表达考察药效动力学指标;药代动力学观察了不同剂量的125I-rHSA/IFNα2a单次皮下注射给予小鼠、大鼠后,各组织器官的分布、排泄情况及rHSA/IFNα2a单次和多次皮下注射给予食蟹猴后其体内的代谢情况;安全性评价中,安全药理学研究观察了rHSA/IFNα2a对小鼠中枢神经系统及对狗呼吸和心血管系统功能的影响;毒理学研究观察了rHSA/IFNα2a单次注射给予小鼠(皮下和静脉)、食蟹猴(皮下)的毒性反应,及反复皮下注射给予大鼠和食蟹猴的毒性反应,食蟹猴反复给药的毒性试验中还伴行了毒代动力学的研究。妊娠Wistar大鼠皮下注射给予rHSA/IFNα2a对孕鼠生殖能力及胎仔的影响。结果试验药物rHSA/IFNα2a和阳性对照品(PEG-rhIFNα2a)的最大无毒剂量为3.13×103IU/ml,当以低于最大无毒剂量的rHSA/IFNα2a和阳性对照品处理HepG22.2.15细胞,显示细胞分泌HBV病毒的能力受到抑制。细胞上清液中的HBV核酸量随时间而减少,HBV的s抗原和e抗原表达也同步受到抑制,与PEG-rhIFNα2a对HBV病毒分泌的相对抑制率检测结果相同。药代动力学研究结果显示静脉rHSA/IFNα2a给药组和对照组的t1/2分别为(88.88±9.65)h和(35.81±4.91)h;食蟹猴皮下注射末端半衰期较长为61.20~83.57h。安全药理学研究表明单次皮下注射重组人血清白蛋白/干扰素α2a融合蛋白在100、300、600μg/kg剂量范围内对小鼠中枢神经系统无明显影响,与戊巴比妥钠无协同作用;在50、200μg/kg剂量范围内对狗呼吸和心血管系统无明显影响。rHSA/IFNα2a单次皮下和静脉给予小鼠的最大耐受量≥50mg/kg,单次皮下注射给予食蟹猴的耐受剂量≥10mg/kg。以100、300和1000μg/kg剂量反复皮下注射rHSA/IFNα2a给予大鼠,以50、150和500μg/kg反复皮下注射给予食蟹猴,每周给药1次,连续13周,基本安全剂量分别为1000μg/kg和500μg/kg,注射局部仅见可逆的轻度刺激性反应;多次给药后,动物体内产生抗rHSA/IFNα2a和IFNα2a的抗体,且抗体具有中和rHSA/IFNα2a活性的作用,且停药4周后,抗体滴度明显降低。多次给药后由于中和抗体的产生,血浆中的抗原量低于检测限。单次给药食蟹猴各代谢动力学参数呈现线性动力学特征。当给药剂量高达1000μg/kg时未见孕鼠母体毒性和胎仔毒性,提示rHSA/IFNα2a无致畸作用。结论获得的大量药效学、药代动力学、毒理学试验数据显示rHSA/IFNα2a具有较好的安全性、成药性和长效性,研究结果可供正在开展的临床试验研究参考。     

骨髓间充质干细胞向软骨细胞的分化

背景：以骨髓间充质干细胞构建组织工程气管尚缺乏理想的特异性表面标志物,对其鉴定主要依赖细胞形态学、细胞表型及诱导分化的功能进行分析。 目的：体外分离培养、鉴定兔骨髓间充质干细胞,观察在特定条件下向气管软骨细胞分化的潜能。 方法：无菌环境取兔骨髓,经全骨髓贴壁筛选法分离培养细胞至第2代,流式细胞术鉴定第1、第2代细胞表面抗原CD44、CD45的表达。无菌环境取气管,经酶消化法分离培养气管软骨细胞,甲苯胺蓝染色鉴定软骨细胞蛋白聚糖的合成。在使用转化生长因子β1的基础上,将骨髓间充质干细胞与气管软骨细胞通过Transwell小室非接触式共培养,倒置显微镜观察细胞形态,甲苯胺蓝染色鉴定蛋白聚糖的合成,荧光实时定量PCR鉴定Ⅱ型胶原和蛋白聚糖 mRNA的表达。 结果与结论：分离、培养的细胞呈长梭形、不规则形聚集生长,传代后细胞生长速度明显增快,呈鱼群状聚集生长。第1代有96.97%的细胞表达CD44、13.72%的细胞表达CD45,第2代有99.11%的细胞表达CD44、8.54%的细胞表达CD45。气管软骨细胞甲苯胺蓝染色阳性。在诱导后,骨髓间充质干细胞形态逐渐由长梭形变为三角形或不规则形,表达软骨细胞特异性Ⅱ型胶原和蛋白聚糖 mRNA基因,甲苯胺蓝染色示阳性。结果表明全骨髓贴壁筛选法可成功分离培养骨髓间充质干细胞,第2代纯度较高,且在特定诱导条件下具有分化为气管软骨细胞的潜能。     

抗乙肝药物ZY101对HBV转基因鼠体内抗病毒作用研究

目的:观察ZY101在HBV转基因BALB/c小鼠体内的抗HBV作用。方法:将30只雄性HBV转基因鼠随机分为阴性对照组(杜氏磷酸盐缓冲液,DPBS)、阳性对照组(每天一次灌胃给予拉米夫定150mg·kg-1)、ZY101低剂量组(1mg·kg-1)、ZY101中剂量组(3mg·kg-1)和ZY101高剂量组(10mg·kg-1),每组6只,阳性对照组每天一次灌胃给药,其他组单次尾静脉注射。药前、药后后1、2、3、4、5、6、7、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38 w采集血清,用ELISA试剂盒检测HBsAg、HBeAg的表达,用实时荧光定量PCR技术检测血清中HBV DNA的含量。药后38w处死所有动物,采集肝组织,检测肝组织中HBsAg和HBeAg表达及HBV DNA和RNA的含量。结果:拉米夫定每天灌胃给予HBV转基因小鼠150mg·kg-1能够明显降低血清HBV DNA水平(P0.05),但对HBsAg、HBeAg和HBV RNA无明显影响;ZY101分别单次尾静脉注射给予HBV转基因小鼠1、3、10mg·kg-1,能够降低血清及肝组织中HBsAg和HBeAg的水平(P0.05、P0.05、P0.01),且有剂量依赖性,但血清HBV DNA及肝组织HBV DNA、HBV RNA水平无显著影响。结论:在本实验条件下,拉米夫定每天灌胃给予HBV转基因小鼠150mg·kg-1能够降低血清HBV DNA水平;ZY101单次尾静脉注射给予HBV转基因小鼠1、3、10mg·kg-1,能够剂量依赖的降低HBsAg和HBeAg的表达水平。     

新生兔气管软骨细胞的生物学特性

 目的：探讨体外分离培养的新生兔气管软骨细胞的生物学特性。方法：通过酶消化法体外分离培养新生兔气管软骨细胞;倒置显微镜观察软骨细胞形态及生长状况;电镜观察软骨细胞超微结构;运用real-time PCR、免疫细胞化学染色和甲苯胺蓝染色检测气管软骨细胞分泌的细胞外基质成分。结果：体外分离、培养的兔气管软骨细胞呈短小三角形或不规则形贴壁生长。超微结构显示细胞较多突起,孔隙较多,胞质丰富,细胞器发达,细胞内可见大量蛋白分泌物。软骨细胞表达I、II型胶原、蛋白聚糖等,以II型胶原和蛋白聚糖表达为主。免疫细胞化学染色II型胶原和SOX9阳性,I型胶原弱阳性。甲苯胺蓝染色阳性。结论：适宜的酶消化单层培养法获得的新生兔气管软骨细胞具有分泌软骨细胞外基质成分的特性,可初步为体外构建组织工程气管治疗新生兔气管狭窄的实验研究提供种子细胞。