小鼠PKD1基因的克隆及打靶载体的构建

目的：克隆小鼠的多囊肾病１（ＰＫＤ１）基因,构建ＰＫＤ１基因的Ｋｎｏｃｋｏｕｔ载体,为产生ＰＫＤ１基因缺陷小鼠品系准备条件。方法;以正常小鼠基因组ＤＮＡ为模板,扩增小鼠ＰＫＤ１基因部分序列为探针,应用噬斑原位杂交技术筛选１２９ＳｖＴｅｒ小鼠基因组ＤＮＡ库,并应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交,亚克隆及测序等方法鉴定所得克隆。对克隆到的ＰＫＤ１基因组ＤＮＡ片段进行结构分析,选择合适的亚克隆片段,以ｐＴＫ－Ｎ     

家族性血管脂肪瘤

血管脂肪瘤是一种由脂肪组织和血管所构成的良性肿瘤。普通的血管脂肪瘤多在20～30岁之间发生,肿瘤体积较小,质地柔软,包膜包被完整。多发性血管脂肪瘤,可以在同一个体的不同部位发生,这种肿瘤很容易摘除,并不易复发。浸润性血管脂肪瘤与多发性血管脂肪瘤极不相似,它位于骨骼肌、肌膜、肌腱、关节囊或骨质内,多在成年早期发病,表现为局部软组织的弥漫性肥     

重组乙型肝炎病毒变异s基因的表达及其抗原性的分析

目的 构建乙型肝炎病毒（HBV）变异s基因真核表达载体。研究变异所致乙肝表面抗原（HBsAg)免疫学性状的改变。方法 利用Dra Ⅲ和XhoI双酶切含有突变位点的HBV DNA 1．2拷贝的质粒P．38Ⅱ，获得904bp带有突变点的HBV－S基因片段。将其置换含有HBV DNA（adr亚型）S和S2片段的真核表达载体pCMV-S2．S的相应片估，从而构建s基因nt587G→A突变的真核表达载体CMV-S2.S 145R；并转染人肝癌细胞系Hep G2，以获得分泌变异型HBsAg的细胞系。利用EIA及细胞免疫染色法，探讨变异抗原与抗－HBs结合力的变化。结果 构建了HBsAg的第145位甘氨酸－精氨酸突变体的真核表达载体。将其转染哺乳动物细胞后第3天，培养上清中用EIA检测用HBsAg呈阳性，A值随时间延长而上升，但变异型的A值明显低于野生型。变异型和野生型HBsAg细胞免疫化学检测均有部分细胞呈阳性，但差异不显著。结论 HBsAg第145位甘氨酸－精氨酸的突变体的真核表达载体产物具有良好的抗原性，能够与抗－HBs结合，但与野生型相比结合力明显降低。     

干扰素对丝裂霉素C诱发的姊妹染色单体互换和紫外线诱发的DNA修复合成影响的研究

本文报告了关于干扰素对丝裂霉素C诱发的姊妹染色单体互换频率和(或)对紫外线诱发的非合成期DNA合成的影响的研究。结果发现,4例正常人和3例着色性干皮病病人的淋巴细胞经干扰素处理后再用丝裂霉素C所诱发的姊妹染色单体互换频率显著地低于对照组,而2例正常人和2例着色性干皮病病人的淋巴细胞经干扰素处理后再用紫外线所诱发的非合成期DNA合成水平则与对照组相似。作者认为,干素扰可能具有抗变效应。     

课程教学体系构建与学生自主学习能力培养

学生的自主学习能力是指较少依赖别人的帮助而自己可以进行有效的学习的能力。自主学习能力的培养是一项系统工程，基础教育课程改革所力图实现的“知识与技能、过程与方法以及情感态度价值观”三位一体的课程功能，必须从一门课程的教学体系开始逐步建立和完善。本文通过介绍美国哈佛大学医学院所开设的“分子细胞生物学”课程，讨论了一门课程的教学体系对培养学生自主学习能力的重要性和必要性，同时提出教师首先应该成为一个善于自主学习的人，才能培养出具有自主学习能力的创新型人才。     

Ehlers-Danlos综合征

Ehlers-Danlos综合征(简称为EDS),又称Cheraoguboy氏综合征、皮肤结缔组织发育不良综合征,为橡皮性皮肤。它是一组全身性的结缔组织异常的遗传性疾病,许多器官可以同时受累,临床上以皮肤脆弱并过度伸展、关节活动度过大及易形成皮下     

Hes1基因诱导小鼠肝原始细胞分化为胆管上皮细胞

背景与目的： 采用体外获得性表达外源发状分裂相关增强子-1(hairy and enhancer of split 1,Hes1)基因的方法,探讨Hes1在肝干细胞分化以及胆管上皮细胞发育中的作用。 材料与方法： 通过PCR方法从小鼠基因组中克隆Hes1基因片段,构建表达载体pEGFP-C1-Hes1和pcDNA3.1- Hes1,将2种表达载体分别转染肝原始细胞系(LEPCs) ,应用RT-PCR和Real-time PCR技术检测胆管细胞分子标志物CK19、GGT,胆管上皮细胞相关转录因子HNF6、HNF1β,肝细胞分子标志物GS、BGP和肝卵圆细胞的分子标志物Thy-1的表达,并在荧光显微镜下观察EGFP标记的LEPCs细胞系荧光强度的变化。结果：成功构建表达载体pEGFP-C1- Hes1和pcDNA3.1-Hes1。RT-PCR和Real-time PCR检测均表明胆管细胞分子标志CK19、GGT表达量上调;胆管上皮细胞相关转录因子HNF6、HNF1β表达上调;肝细胞分子标志GS、BGP表达量下调;卵圆细胞的分子标志Thy-1表达量下调;LEPCs细胞系绿色荧光增强。 结论： 初步证明小鼠肝原始细胞经Hes1的表达诱导后可向胆管上皮细胞方向分化,推测Hes1为胆管上皮细胞分化的转录调控因子。     

以雄性生殖细胞为载体建立转基因动物的研究进展

以生殖细胞为载体转入外源DNA是近年逐渐被采用的简便、有效的生产转基因动物方法。本文介绍了外源DNA能进入精子的实验证据 ;DNA与精子的作用机理和结合方式 ;简述了近年来以精子、精原干细胞为载体以及胞质内精子注射法建立转基因动物的原理和方法 ,提出在该方法系统中存在的亟待解决的问题     

医学本科生批判性思维倾向性及相关因素的调查研究

目的：调查医学本科生的批判性思维倾向性及相关因素.方法：采用批判性思维倾向性量表对医学生进行横断面调查.结果：有63％的学生表现为正性批判性思维倾向,其中分析能力得分最高,寻找真相得分最低;批判性思维倾向性与了解批判性思维、成就感、喜欢本专业、阅读科研文献存在正相关性.结论：阅读科研论文可能有助于提高批判性思维能力.     

乙型肝炎病毒x基因转基因小鼠模型的建立及培育

目的：建立可表达乙型肝炎病毒X蛋白的HBx基因（adr亚型）转基因小鼠模型，以研究x基因的功能。方法：采用基因重组技术构建含有CMV启动子和HBx基因（adr亚型）开放阅读框（ORF）的真核表达载体pcDNA3-HBx。该载体经Sal I限制性内切酶线性化后，琼脂糖电泳回收目的的片段，用原核显微注射法将其注射入雄原核，制备转基因小鼠。复合PCR法在基因组水平筛选HBx基因转基因小鼠founder；免疫组织化学法在蛋白水平检测X蛋白在这些小鼠中的表达情况。结果：成功构建了HBx基因真核表达载体pcDNA3-HBx。经原核显微注射法将目的片段注射入受精卵雄原核后，出生并存活了11只新生鼠，经PCR检测后获得5只founder转基因小鼠，命名为C57－TgN(HBx)SMMU。免疫组织化学检测发现5只PCR阳性小鼠的肝细胞质中均有X蛋白的表达。将这5只转基因小鼠与正常同系异性小鼠交配，进行传代培育，复合PCR法筛选阳性转基因小鼠，目前已传至F4代。结论：本研究成功地产生了稳定遗传HBx基因并表达X蛋白的转基因小鼠C57－TgN（HBx)SMMU，它将有利于体内研究HBx基因在肝细胞癌发生中的作用。