基于LC-MS/MS技术研究黄芩苷在脑、血微透析探针体内外回收率

为进一步研究黄芩苷的入脑行为及脑细胞间液药代动力学,对黄芩苷在脑、血微透析探针的体内外回收率及其稳定性进行了研究。采用LC-MS/MS测定脑、血微透析液中黄芩苷的浓度,计算探针回收率;分别采用增量法、减量法考察不同流速(0.50,1.0,1.5,2.0,3.0μL·min~(-1))对探针体外回收率的影响;采用增量法考察不同浓度(50.00,200.0,500.0,1 000μg·L~(-1))、探针使用次数(0,1,2)对体外回收率的影响;采用减量法考察在大鼠体内探针回收率稳定性及流速对回收率的影响,并与体外结果进行比较。在同一浓度下,黄芩苷的脑、血探针体外回收率均随着流速的增加而降低;在同一流速下,探针回收率与黄芩苷的浓度无关;使用后并经过恢复处理的脑、血探针,在使用2次后,探针的回收率没有明显的变化;增量法和减量法所测得的体外回收率基本相同;减量法测得的体内回收率与体外结果相近,且脑、血探针体内回收率在10 h内的稳定性均良好。研究结果表明减量法能够作为研究黄芩苷体内回收率的测定方法,微透析技术能够用于黄芩苷在脑细胞间液药代动力学、血液药代动力学的同步研究。     

-80℃保存机采浓缩血小板的实验研究

血小板在成分输血中的地位已越来越重要 ,输注比例正逐年显著提高 ,血小板的体外保存也因此成为国内外输血医学的研究热点 [1 ,2 ]。笔者用两年多的时间对 -80℃保存机采浓缩血小板 (以下简称冰冻血小板 )进行了较深入的实验研究 ,比较了不同保存时期冰冻血小板的功能及回收率 ,现将实验结果报告如下。材料与方法1　主要仪器设备　 CS-3 0 0 0 Plus血细胞分离机 ;TYXN-91 A智能血液凝集仪 ;F-82 0血细胞计数仪 ;局部 1 0 0级净化间 ;-80℃深低温冰箱。2　冰冻血小板的制备、保存与解冻　选择符合国家规定体检标准的献血者 ,依照 CS-3 0…     

NP-HPLC法测定痹痛宁胶囊中士的宁含量的研究

目的 建立痹痛宁胶囊中士的宁的含量测定.方法 采用正相高效液相色谱法(NP-HPLC);色谱条件为硅胶柱,以正己烷-二氯甲烷-无水甲醇-三乙胺(比例:47.5∶47.5∶5∶0.4)为流动相,流速为1.0 ml/min,检测波长280 nm.结果 平均回收率为98.7%,RSD=2.00%.结论 此方法简便、灵敏、准确且重现性好,其他成分对测量结果无影响,可用于该制剂的质量评价和控制.     

酶法测定糖化血清蛋白浓度

目的：了解酶法测定糖化血清蛋白（GSP）的实验特点。方法：采用酶法测定GSP，并对其方法学进行初步研究及评价。结果：线性41．0－1829．0μmol/L，达正常值8倍；平均回收率98．2％；精密度：批内CV0．99％－1．89％，批间CV2．23％－3．41％；该法（Y）和NBT法（X）比较：Y＝0．395X＋20．7，r=0.953;干扰影响小。结论：该法线性宽，精密度好，所受干扰小，是理想的GSP测定方法。     

星点设计-效应面法优化壳聚糖微球对凝血酶的固定化作用研究

目的 考察壳聚糖微球对凝血酶的固定化作用。方法 本研究以壳聚糖微球为载体,以戊二醛为交联剂将凝血酶固定于空白微球上,以固定化凝血酶的活性回收率为指标,采用星点设计-效应面法优化固定凝血酶的条件。结果 试验结果表明,壳聚糖微球固定凝血酶的最优条件是：凝血酶浓度69.32 U·mL^-1、戊二醛浓度0.18%、固定化时间1.88 h、固定化pH 7.08,凝血酶的活性回收率为81.55 %。结论 壳聚糖微球对凝血酶的固定化效果良好。     

NDPK-A诊断试剂盒的研制

目的 建立一种灵敏、特异检测血清中二磷酸核苷激酶(NDPK-A)含量的酶联免疫吸附试验(ELISA)法和试剂盒,分析血清中的NDPK-A含量与血液病之间的关系.方法 筛选NDPK-A多株单克隆抗体和多克隆抗体,以建立检测NDPK-A的双抗体夹心ELISA方法.测定了84例健康人,35例白血病与淋巴瘤等血液病患者血清的NDPK-A含量.结果 单抗-多抗夹心ELISA法可测最适范围为1.56～100 μg/L,回归方程为y=-0.000 5x2 0.017 8x 0.089 2, 相关系数r2=0.999 3(y为A490 nm,x为 [NDPK-A]),批内变异系数4.75%～6.32%,批间变异系数11.06%～13.84%,回收率为90.52%～105.16%.84例健康人血清NDPK-A含量为1.75±0.92 μg/L,35例白血病与淋巴瘤患者血清的阳性检出率为16例.急性白血病,尤其是急性单核细胞白血病(M5)和非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者血清中NDPK-A水平与健康对照差异较大,分别为12.97±9.73、20.00±18.55 μg/L.结论 建立了一种可应用于临床检测NDPK-A 的ELISA方法,初步展示了NDPK-A含量检测的临床意义,NDPK-A含量检测可发展为白血病的辅助诊断和疗效判断指标.     

体液中苯二氮类药物提取回收率的研究

目的　探讨溶剂类型和pH选择对动物体液中苯二氮 卓艹 类药物提取回收率的影响。方法　将大鼠连续 2d每日注射苯二氮卓类药物 2mg/kg ,2d后每日采其血液和尿液 ,选择不同的试剂 ,缓冲溶液和pH用UV法测定其体液中药物浓度和计算回收率。结果　实验一组和二组、三组大鼠体液中安定、利眠宁和硝基安定以乙醚溶剂和用pH8为缓冲溶液的提取回收率最高。结论　动物体液中苯二氮卓类药物提取回收率决定于提取溶剂的类型和提取时缓冲溶液的pH的选择。     

CA19-9检测对长光华医全自动化学发光分析系统的性能评价

目前全自动化化学发光检测技术在灵敏度和特异性方面达到了相当高的水平,全自动免疫分析设备也在临床上得到了相当广泛的应用,由于大幅度提高了实验结果的精确度和准确性,因此受到了临床实验室的广泛欢迎[1]。长光华医全自动化学发光检测仪由苏州长光华医生物工程公司生产,拥有15个试剂位,测试速度达180个/h,目前可检测项目有100多项,达到与国外厂家相当的水平,填补了国内全自动化学发光检测系统的空白。本文以此仪器为对象,对其准确度、精密度、回收率、线性以及携带污染率等指标进行了初步测试评价,现将结果报告如下。     

超速离心浓缩技术富集HBV和HCV颗粒的效果研究

目的 分析超速离心浓缩(简称超浓缩)技术对HBV和HCV病毒颗粒的富集效果.方法 将8份不同浓度的HBV阳性标本(10、102、103 IU/ml各2个、104和105 IU/ml各1个)和9份不同浓度HCV阳性标本(102 IU/ml 1个、103 IU/ml 3个、104 IU/ml 3个,105、106 IU/ml各1个),4℃ 24 600 g超速离心1h,9.6倍浓缩富集病毒;使用Roche COBAS AmpliPrep/COBAS Taq-Man HBV及HCV定量试剂盒对原标本及浓缩标本做HBV及HCV定量测定,计算病毒回收率.结果 经9.6倍超浓缩处理后,8份HBV阳性标本的病毒含量均明显上升,平均是原标本的(5.92±1.98)倍,浓缩处理的病毒回收率为(61.65±20.67)％;9份HCV阳性标本的病毒含量亦均明显上升,平均是原标本的(4.70±1.43)倍,浓缩处理的病毒回收率为(48.95±14.84)％.结论 超速离心处理可有效富集HBV及HCV颗粒,病毒浓缩效果显著.     

固相萃取-气相色谱法测定尿液中苯酚的含量

对气相色谱法测定尿液中苯酚的国标方法进行改进。尿液经盐酸加热,使结合态的酚水解,用固相萃取小柱萃取,经毛细管FFAP柱将尿中苯酚及人体正常代谢物对甲酚分离。用氢焰离子化检测器检测。以保留时间定性,外标法峰面积定量。结果表明,尿中的苯酚在0～480 mg/L范围内线性良好,线性相关系数为0.999 96,检出限为0.07 mg/L,定量限为0.22 mg/L,加标回收率为86.1%～96.6%,相对标准偏差为2.50%～3.20%。改进后的气相色谱法测定尿液中的苯酚比原国标方法灵敏度更高,回收率更好,仪器测定时峰形好且与干扰物的分离良好。提示,该方法研究的数据结果(包括线性、定量下限、加标回收率)均优于国家标准,为尿液中苯酚含量的测定提供了一种新的检测手段。