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学科分类
医药卫生 | 880篇 |
出版年
2023年 | 15篇 |
2022年 | 22篇 |
2021年 | 8篇 |
2020年 | 23篇 |
2019年 | 13篇 |
2018年 | 14篇 |
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2007年 | 50篇 |
2006年 | 31篇 |
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2002年 | 35篇 |
2001年 | 31篇 |
2000年 | 31篇 |
1999年 | 19篇 |
1998年 | 8篇 |
1997年 | 5篇 |
1996年 | 6篇 |
1995年 | 5篇 |
1994年 | 7篇 |
1993年 | 3篇 |
1992年 | 8篇 |
1991年 | 5篇 |
1990年 | 1篇 |
1988年 | 1篇 |
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目的:观察核不均一核糖核蛋白(hnRNP)K的表达与定位以及亚砷酸钠(NaAsO2)刺激NIH3T3细胞的反应情况及氧化应激变化,探讨JNK信号通路在hnRNP K蛋白聚集体形成中的作用。方法:构建重组载体pcDNA3-hnRNP K-HA,转染NIH3T3细胞,荧光显微镜观察内源性hnRNP K在细胞中的表达与定位,以及在NaAsO2不同刺激时间该蛋白聚集体的形成情况,并利用活性氧(ROS)检测试剂盒测定胞内ROS水平;给予JNK、MEK、PI3K/Akt、NF-κB和核转运等5种信号通路的抑制剂预处理后,观察聚集体的变化情况。结果:重组质粒构建正确,荧光显微镜观察显示hnRNP K主要定位于胞核中,而重组质粒转染NIH3T3细胞后,可见胞内有蛋白聚集体形成并随NaAsO2刺激时间的延长而递增,且过表达hnRNP K可抑制NaAsO2刺激细胞生成ROS;JNK信号通路抑制剂SP600125明显抑制聚集体的形成。结论:hnRNP K主要定位在NIH3T3细胞的胞核中,胞浆少量分布;NaAsO2可诱导NIH3T3细胞形成hnRNP K蛋白聚集体,此聚集体可抑制胞内ROS生成,且该聚集体的形成有赖于JNK介导的信号通路。 相似文献
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目的:克隆人BTB-Kelch家族蛋白KLHL32编码基因并初步鉴定其在细胞中的功能。方法:采用实时荧光定量PCR分析Toll样受体5(Toll-like receptor 5,TLR5)特异性激活剂鼠伤寒沙门菌鞭毛蛋白(flagllin from S. typhimurium,ST-FLA)刺激经佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate, PMA)诱导分化的THP-1巨噬细胞中KLHL32 mRNA表达水平的变化,应用RT-PCR克隆人KLHL32编码区的cDNA序列并将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1,采用萤光素酶双报告基因表达系统分析KLHL32过表达对转录因子核因子κB(NF-κB)活性的影响,并采用免疫共沉淀实验分析了KLHL32与Cul-3蛋白在细胞内的相互结合。结果:ST-FLA(100 μg/L)刺激经PMA诱导分化的THP-1巨噬细胞4 h引起KLHL32 mRNA的表达水平下调;成功克隆了人KLHL32基因并将其克隆至真核表达载体中获得重组质粒pcDNA3.1-KLHL32-FLAG,在HEK293细胞中过表达KLHL32蛋白对TNF-α诱导的转录因子NF-κB激活没有明显影响,但KLHL32可通过其氨基端的BTB结构域与Cul-3相互结合。结论:成功鉴定了人KLHL32蛋白,其通过BTB结构域与Cul-3蛋白相互结合,可能是一种潜在的E3泛素连接酶,证实了TLR5受体激活可诱导其表达水平的下调,提示KLHL32蛋白在细胞中可能参与炎症细胞信号转导的调控。 相似文献
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目的 评估免疫标记半乳糖凝集素-3(Gal-3)、细胞角蛋白-19(CK-19)、间皮细胞角蛋白-1(HBME-1)和BRAF V600E突变联合检测对术前甲状腺细胞学诊断不确定结节的良恶甄别作用.方法 选取四川大学华西医院2014年12月至2019年3月术前细胞学诊断不确定的甲状腺结节患者992例为研究对象,其中行3项免疫标记和/或BRAF V600E突变辅助检测的314例患者为观察组,未行上述辅助检测的678例为对照组,以术后病理学诊断评估上述检测单独或联合应用辅助技术的诊断价值.结果 观察组术后恶性率高于对照组(P<0.001).观察组中,195例患者行Gal-3、CK-19和HBME-1的免疫标记检测,301例患者行BRAF V600E突变检测,其中仅182例患者行3项免疫标记和BRAF V600E突变联合分析.对于单个检测,BRAF V600E突变和CK-19的特异性和敏感性最高,分别为100.0%和90.6%,当联合使用时诊断效能明显提高.BRAF V600E突变检测、Gal-3和CK-19组合的诊断效果最好,准确率最高达92.9%,该组合术前正确分类了168个恶性结节中的161个(95.8%)和14个良性病变中的8个(57.1%),其中159例甲状腺乳头状癌中有158例被本组合正确分类.结论 免疫标记Gal-3、CK-19和BRAF V600E突变检测对细胞学诊断不确定的甲状腺结节有较高的良恶性甄别价值. 相似文献
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RFP-AWP1原核表达载体的构建及表达特性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:建立红RFP-AWP1融合基因的原核表达载体,研究其表达蛋白特性。方法:将克隆的人AWP1(associated with protein kinase Crelated kinase 1,AWP1)和水母的红色荧光蛋白(redfluorescence protein,RFP)的cD-NA插入到原核表达载体pET-17b的多克隆位点(mutiple clone sites,MCS)中,经AWP1 cDNA的PCR鉴定和E.coli DE3中的表达鉴定后,E.coli DE3表达AWP1-RFP融合蛋白,荧光显微镜观察其表达特性及与GST-beads的pull-down实验。结果:成功构建了载体pET-AWP1-DsRed1,在大肠杆菌中获得了高效表达的AWP1-RFP融合蛋白,其活菌液在荧光显微镜下呈火山熔岩状的亮红色,干固的细菌呈斑片状红色荧光;AWP1-RFP融合蛋白可与GST-beads结合,并在激发波长为508nm的条件下呈红色荧光,而在波长为488 nm激发光条件下可见橙黄色荧光。结论:在体外验证了AWP1-RFP融合蛋白具有可视性表达的特点,同时发现其能与GST-beads结合,为pull-... 相似文献
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目的探究苏木Caesalpinia sappan的活性成分苏木酮A对大鼠类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的治疗作用。方法以牛Ⅱ型胶原蛋白诱导建立RA大鼠模型,以苏木酮A(50mg/kg)进行干预,考察大鼠足容积变化,对大鼠踝关节组织进行病理分析,采用免疫组化考察大鼠踝关节组织中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达。以脂多糖诱导Raw264.7细胞建立炎症细胞模型,考察苏木酮A对Raw264.7细胞上清液中一氧化氮和IL-6水平的影响。结果苏木酮A显著降低RA大鼠足容积(P<0.05),改善RA大鼠踝关节滑膜组织损伤,抑制RA大鼠踝关节滑膜组织中IL-6、TNF-α和MMP-9的表达。苏木酮A显著抑制脂多糖诱导的Raw264.7细胞上清液中一氧化氮和IL-6水平(P<0.01)。结论苏木酮A可有效缓解大鼠RA。 相似文献
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目的 了解2010年我国家庭人均每日食盐消费情况.方法 利用2010年中国慢性病监测家庭问卷调查数据,分析我国家庭人均每日食盐消费量及过量食盐消费比例,描述不同地区、城乡的分布,比较其差异.共有92 814户家庭纳入分析.结果 2010年我国家庭人均食盐摄入10.6 g/d,城市(9.1 g/d)低于农村(11.5 g/d),东、中、西部地区盐摄入量依次增加,西部农村地区盐摄入量最高(12.5 g/d),东部城市地区最低(8.6 g/d).家庭人均每日食盐摄入量超过膳食指南盐摄入建议量(6 g/d)的比例为72.6%,农村(78.3%)高于城市(63.5%).家庭人均每日食盐摄入量超过我国慢性病防治规划2015年减盐目标(9g/d)的比例为38.1%,农村(44.0%)高于城市(28.8%),西部地区高于中部和东部.结论 2010年我国家庭人均食盐摄入过高,在西部农村地区尤为突出,需要制定减盐干预策略,加强健康教育,防控高盐饮食危害. 相似文献