乙型肝炎病毒（ayw型）转基因小鼠的建立

目的：建立遗传上稳定的、带有乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ａｙｗ亚型的转基因小鼠品系。方法：通过对受精卵显微注射进行基因转移的途径制备转基因小鼠，以ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂产、ＥＬＩＳＡ、组织切片免疫组化和透射电镜等方法，分析所导入ＤＮＡ在转基因小鼠体内的功能情况。结果：得到２１只建立者小鼠，在它们的血清中检测到了ＨＢｓＡＧ和ＨＢｅＡｇ的存在，还在肝细胞中观察到了ＨＢＶ样病毒颗粒。结论：ＨＢＶ基因组ＤＮ     

大肠癌组织CD95L表达与临床病理及预后的关系

CD95配体 ( CD95 L )是目前已被确定的 3个细胞死亡相关分子之一 ,为 TNF相关的 型细胞跨膜蛋白 ,通过与 Fas结合启动 Fas阳性细胞凋亡 ,在细胞凋亡中发挥重要作用。众多实验研究已证实肿瘤组织 CD95 L阳性表达率较高 ,且能帮助肿瘤逃避机体的免疫作用。本研究采用免疫组织化学染色方法检测大肠癌患者的 CD95 L表达 ,探讨 CD95 L表达与大肠癌临床病理参数及预后的相关性 ,旨在从临床角度揭示 CD95 L 的表达在大肠癌细胞免疫逃避中的作用。1　材料和方法1.1　一般资料　 1993年 1月至 12月收住我科的 10 8例大肠癌手术患者中经随访…     

毛囊蠕形螨感染的皮肤病理学研究(附394例报告)

目的：探讨毛囊蠕形螨感染与皮肤病及皮肤肿瘤的关系。方法：回顾性研究本院近2年来的皮肤活检病理资料和乳腺癌根治手术标本的乳头，统计分析毛囊蠕形螨感染的好发部位、年龄以及与各种皮肤病、肿瘤的关系。结果：毛囊蠕形满各部位感染率依次为乳头（48.89%,66/135）＞头面部（29.21%,52/178）＞外阴（17.14%，6／35）＞其他部位（4.42%,8/181）；各年龄段感染率：20－29岁为6.76%(5/74），30－39岁为9.21%(7/76),40－49岁为16.47%(14/85),50-59岁为23.33%(14/60),60-70岁26.26%（26／99）；各皮肤病的感染率：上皮性肿瘤的感染率最高56.41%＞（22／39），其后依次是瘤样病变18.58%（34／183）、软组织肿瘤9.86%（7／71)、非赘生性病变2.97%（3／101）。而上皮性肿瘤中又以基底细胞瘤和外毛根鞘瘤的头面部皮肤是毛囊蠕形螨最易感染的部位；（2）毛囊蠕形螨感染与年龄有关，随年龄的增长感染机会增加；（3）上皮性肿瘤病变中毛囊蠕形螨的感染率最高，尤以基底细胞癌和外毛根鞘瘤感染最多。     

乙型肝炎病毒x基因转基因小鼠模型的建立及培育

目的：建立可表达乙型肝炎病毒X蛋白的HBx基因（adr亚型）转基因小鼠模型，以研究x基因的功能。方法：采用基因重组技术构建含有CMV启动子和HBx基因（adr亚型）开放阅读框（ORF）的真核表达载体pcDNA3-HBx。该载体经Sal I限制性内切酶线性化后，琼脂糖电泳回收目的的片段，用原核显微注射法将其注射入雄原核，制备转基因小鼠。复合PCR法在基因组水平筛选HBx基因转基因小鼠founder；免疫组织化学法在蛋白水平检测X蛋白在这些小鼠中的表达情况。结果：成功构建了HBx基因真核表达载体pcDNA3-HBx。经原核显微注射法将目的片段注射入受精卵雄原核后，出生并存活了11只新生鼠，经PCR检测后获得5只founder转基因小鼠，命名为C57－TgN(HBx)SMMU。免疫组织化学检测发现5只PCR阳性小鼠的肝细胞质中均有X蛋白的表达。将这5只转基因小鼠与正常同系异性小鼠交配，进行传代培育，复合PCR法筛选阳性转基因小鼠，目前已传至F4代。结论：本研究成功地产生了稳定遗传HBx基因并表达X蛋白的转基因小鼠C57－TgN（HBx)SMMU，它将有利于体内研究HBx基因在肝细胞癌发生中的作用。     

单克隆抗体诱发乙肝转基因小鼠肝组织损伤

目的：诱导整合有乙型肝炎病毒（HBV）全基因组、无病理学反应的转基因小鼠产生病理学改变，建立研究急性肝炎发生机制及治疗药物筛选的转基因动物模型。方法：采用尾静脉注射方法将3种HBV单克隆抗体HBsAb、HBeAb、HBcAb分别或混合导入整合有HBV全基因组的转基因小鼠体内，使之与体内的抗原结合产生免疫学反应，随后进行血清学及常规病理学的研究。结果：3种单克隆抗体单独或混合处理均引起HBV转基因小鼠肝细胞的病理学损伤，以HBsAb及HBsAb HBcAb混合处理组损伤较为严重；但小鼠血清转氨酶基本表现正常。结论：体液免疫反应可以诱导HBV转基因小鼠组织细胞发生损伤，并产生与急性肝炎相似症状的病理学改变，HBsAb及HBsAb HBcAb处理的HBV转基因小鼠可以作为研究急性肝炎发生机制的动物模型。     

胃癌的浸润距离与其病理类型的关系

本文通过对50例中、晚期胃癌手术切除标本,测量癌组织在胃壁内浸润的距离,来探讨癌浸润距离与病理类型的关系。本文证实了不同的病理组织类型,其浸润距离不同;提出把管状腺癌分为大腺管型和小腺管型两个亚型;在各种病理组织类型中,未分化癌、印戒细胞癌和大腺管型管状腺癌浸润的距离较远,乳头状腺癌和小腺管型管状腺癌浸润距离较近。另外,大体类型中浸润型胃癌和胃窦部胃癌浸润距离有较远的趋势。上述的结果,对外科治疗胃癌所取切除范围可能有一些帮助。     

阻塞性睡眠呼吸暂停综合征小型猪模型实验研究

以间歇性低压低氧方法建立阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(Obstructivesleepapneasyndrome,OSAS)小型猪模型。8只小型猪编号后随机分为A、B、C组。A为对照组,置于双室低压氧仓二室,维持海平面压力;B、C组置于双室低压氧仓一室,仓内压力约53.9KPa、氧浓度10%~11.2%。3组每天均入仓6h。第13d处死B组,A、C组第23d同时处死。各组进仓前和处死前均行咽部CT扫描、口咽部呼吸压力、血氧饱和度检查;处死后取咽部组织行病理检查。咽部CT扫描示,咽部舌骨水平咽后壁厚度和侧壁厚度,进仓第13d(8.8±1.1vs6.5±0.6,8.1±0.2vs6.3±0.6)和第23d(9.2±1.2vs6.3±0.7,8.9±0.7vs6.4±0.5)均较进仓前有增加(P<0.05)。舌骨水平左右径和软腭水平前后径进仓第13d(7.6±1.4vs9.7±1.4,3.8±1.1vs6.5±1.3)和第23d(6.4±1.6vs9.3±1.5,4.3±0.9vs5.9±0.8)均较进仓前减小(P<0.05)。舌骨后区前后径进仓第23d后较进仓前减小(3.7±0.9VS6.4±0.6,P<0.05)。进仓第23d口咽呼吸压力(0.0755Mv)较进仓前(0.0658Mv)明显增大(P<0.05),而第13d(0.063Mv)较进仓前变化不明显。血氧饱和度进仓第13d(87%)和第23d(88.5%)均较进仓前(96.3%)明显减小(P<0.05)。病理变化:A组:咽部黏膜为复层扁平上皮,黏膜下层薄,肌层横纹清、肌间脂肪少。B组:咽部上皮组织增生伴角化,黏膜下层水肿纤维组织增生,肌层厚横纹不清、肌间脂肪灶性浸润;C组较B组病理变化程度加重。提示:间歇性低压低氧,使小型猪咽腔组织结构和力学特性发生类似OSAS病人的变化,本研究建立的OSAS小型猪模型,能用于人OSAS的进一步研究。     

肝细胞癌中乙型肝炎病毒变异

基因变异是生物适应生存环境和进化的重要手段。乙型肝炎病毒基因变异改变了其致病性及对组织的亲嗜性,导致持续感染,逃避疫苗诱导或自然产生免疫,产生抗药性等,给乙肝治疗带来了新的问题,乙型肝炎病毒是引起肝细胞癌的主要原因之一,肝细胞癌中的乙型肝炎病毒变异可能在该病的发病机理中起重要作用。     

干细胞样肝原始细胞的分离和鉴定①

目的:证实小鼠胎肝中肝干细胞的存在.方法:小鼠胎肝细胞的分离培养和免疫细胞化学等.结果:从小鼠胎肝组织中成功地分离得到了AFP、CD34及Albumin等特异性分子标记阳性、并呈集落样生长的细胞系.结论:小鼠胎肝中存在具有干细胞特性的原始细胞,为肝干细胞生物学特性的进一步认识和利用奠定了基础.