光敏素Ⅱ和酞菁类光敏剂体外光动力学杀伤肿瘤细胞的研究

本实验对体外培养的SMMC-7721人体肝癌细胞系(7721细胞)进行光动力学杀伤(PDT)的研究。共选用了光敏素Ⅱ(PⅡ)、高磺化铝酞菁(AlSPC)、李东方合成的二磺化销酞菁(AlS_2PCL)和二磺化锌酞菁(ZnS_2PCL)、陈发普合成的一磺化铝酞菁(AlS_1PCC)和二磺化铝酞菁(AlS_2PCC)及二磺化锌酞菁(ZnS_2PCC)。在PDT实验中发现:上述光敏剂均对7721细胞有明显的PDT杀伤作用,光敏剂的剂量、种类和孵育     

磺化铝酞青光动力学效应杀伤在体肿瘤的研究

本实验选用磺化铝酞菁(AlSPC,自制)和癌光啉(PsD-007),对荷S_(180)肉瘤昆明小鼠进行了如下工作:①AlSPC在荷瘤小鼠体内的药物动力学分布;②AlSPC光动力学疗法(AlSPC-PDT)和PsD-007光动力学疗法(PsD-007-PDT)治疗S_(180)肉瘤所致的病理学改变(大体、光镜、透射电镜);③AlSPC-PDT和PsD-007-PDT对S_(180)肉瘤的杀伤深度;④AlSPC-PDT和PsD-007-PDT对肿瘤生长曲线和动物生存期的影响;⑤AlSPC-     

骨髓细胞多向分化潜能的初步研究

目的：探讨骨髓细胞在受致死剂量照射的受体鼠体内的多向分化潜能。方法：将C57－TgN(Mx-cre)雄性小鼠的骨髓细胞经尾静脉植入受致死剂量照射的雌性受体鼠，重建受体鼠骨髓，然后分别用PCR和免疫组化分析检测受体鼠的多个器官组织中sry及Mx-cre基因的分布及表达情况。结果：PCR和免疫组化分析结果均显示，供体细胞的两个标志sry及Mx-cre在受体鼠的肝脏，肾脏，皮肤，脾脏等多个器官中都有表达。结论：骨髓细胞不仅可以重建受致死剂量照射受体鼠的造血系统，而且具有分化为肝脏，肾脏，皮肤，脾脏等组织细胞类型的多向潜能性。     

几种多药耐药相关因子在肺癌中的表达及临床病理意义

目的：探讨原发性肺癌中几种与多药耐药相关因子的表达及与临床病理的相关性。方法：采用免疫组化方法对术前未经化疗、术后病理诊断明确的133例肺癌组织标本和15例作为对照的癌旁肺组织（距肿瘤边缘5cm）,进行了P-gp、MRP、LRP、p53及c-erbB-2蛋白表达的检测。结果：（1）133例肺癌组织中,P-gp、MRP、LRP、p53及c-erbB-2的阳性率分别为72.2%（96/133）、40.5%（51/126）、54.1%（72/126）、59.4%（79/126）和45.9%（61/133）,除P-gp外均显著高于正常肺组织中的表达水平（P〈0.05）;且p53表达与P-gp及MRP表达之间（r=0.179及0.185,P=0.039及0.041）,P-gp与LRP之间（r=0.264,P=0.002）,LRP与MRP之间（r=0.309,P〈0.001）,以及c-erbB-2表达分别与MRP、LRP及p53表达之间（r分别为：0.350、0.421、0.541和0.354,P值均〈0.001）均有相关性。（2）P-gp、MRP、LRP和c-erbB-2蛋白表达在不同病理类型之间具有统计学差异,而LRP蛋白表达在不同病理分化程度之间具有统计学差异（P〈0.001）,P-gp在鳞癌不同分化程度间表达有统计学差异（P=0.049）。（3）针对病理类型及亚型：①神经内分泌癌与非神经内分泌癌相比,后者的LRP和c-erbB-2蛋白表达水平较前者高（P=0.005和0.041）;②未发现细支气管肺泡癌与其他类型腺癌间在MDR相关因子的蛋白表达水平上有统计学差异。结论：这些多药耐药相关因子可能均在肺癌的原发性多药耐药中起不同程度的作用,且在多药耐药形成以及肿瘤进展的过程中它们之间有某种程度的关联。     

pcDNA3.1-Annexin A1真核表达载体对结直肠癌细胞迁移、侵袭的影响

目的探讨Annexin A1对结直肠癌细胞迁移、侵袭能力的影响。方法构建重组质粒pcDNA3.1-AnnexinA1,转染至结直肠癌细胞株SW480中,G418筛选稳定表达株,实时荧光定量PCR、蛋白质印迹检测转染前后Annexin A1mR-NA及蛋白表达;以空载体转染组及未转染SW480细胞作为对照,通过划痕修复实验和Transwell细胞侵袭实验对转染前后细胞的迁移和侵袭能力进行比较观察和分析。结果成功构建重组质粒pcDNA3.1-Annexin A1载体;实时荧光定量PCR和蛋白质印迹检测结果均显示,重组体pcDNA3.1-Annexin A1稳定转染细胞株中Annexin A1mRNA及蛋白表达均明显高于空载体转染及未转染组细胞(P<0.01),而后两者间比较差异无统计学意义(P>0.05);重组体pcDNA3.1-Annexin A1转染组SW480细胞的迁移率(0.415±0.002)明显高于空载体转染组(0.267±0.003)及未转染组细胞(0.271±0.002),差异具有统计学意义(P<0.05),而后两者间差异无统计学意义(P>0.05);与空载体转染组(162.80±12.07)及未...     

过氧化物酶体增殖物激活受体α、γ调控长链酰基辅酶A合成酶1对肝纤维化进程的影响

在肝纤维化的发生发展进程中,过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)α、γ具有调控脂代谢、脂肪酸代谢和抗肝纤维化等生物学功能,并与调控脂肪代谢的相关酶类关系密切。长链酰基辅酶A合成酶1(ACSL1)作为脂肪代谢的关键酶之一,在肝脏中参与脂质的合成与分解代谢,可引起肝脏内脂质沉积、炎症反应,并在肝脏中直接或间接促进肝纤维化进程。回顾了PPARα、γ和ACSL1各自的生物学功能与作用;简述了PPARα、γ对ACSL1的转录调控机制;从肝脏脂代谢和肝星状细胞活化等两个方面分析了PPARα、γ对ACSL1的调控作用,进而影响肝纤维化进程。从而指出在肝脏中PPARα、γ通过调控ACSL1直接或间接参与肝纤维化进程。     

壶腹癌胰十二指肠切除术后预后影响因素的Meta分析

目的通过综合评价总结出影响壶腹癌预后的因素,为壶腹癌患者的预后判断及个性化治疗提供依据。方法对符合入选标准的1995年至今公开发表的关于壶腹癌术后生存分析的研究进行Meta分析,并计算每个危险因素的优势比值（OR值）以及其95%可信区间（95%CI）。结果共纳入文献13篇,累积病例986例。局部浸润（浸润至胰腺、浸润至十二指肠壁、浸润至Oddi括约肌外）、淋巴结转移、输血、肿瘤分化程度对壶腹癌术后5年死亡率影响的合并后P值及OR值分别为P〈0.001,OR=4.74、P=0.01,OR=2.75、P〈0.001,OR=4.25、P〈0.001,OR=4.16、P〈0.001,OR=2.56、P=0.002,OR=2.38。结论肿瘤局部浸润（浸润至胰腺、浸润至十二指肠壁、浸润至Oddi括约肌外）、淋巴结转移、输血、肿瘤分化程度均为壶腹癌预后影响因素。     

CD44v6及nm23-H1表达与肝细胞癌侵袭转移

目的原位检测肝细胞癌(HCC)中CD44v6 mRNA及nm23-H1 mRNA的表达,了解CD44v6 mRNA及nm23-H1 mRNA的表达与HCC侵袭转移的关系,了解HCC中CD44v6 mRNA表达与nm23-H1 mRNA表达的相关性.方法采用PCR法合成CD44v6 cDNA探针,体外转录法合成nm23-H1 cRNA探针,采用原位杂交法检测HCC 33例 CD44v6 mRNA和nm23-H1 mRNA的表达.结果侵袭转移倾向高危组的10例HCC标本中,CD44v6 mRNA和nm23-H1 mRNA的阳性率分别为80.0%(8/10)和40.0%(4/10);侵袭转移倾向低危组的23例HCC标本中,CD44v6 mRNA和nm23-H1 mRNA的阳性率分别为21.7%(5/23)和91.3%(21/23).CD44v6 mRNA的表达与HCC的侵袭转移倾向具有正相关性(P＜0.01),nm23-H1 mRNA的表达与HCC的侵袭转移倾向具有负相关性(P＜0.01),CD44v6 mRNA及nm23-H1 mRNA的表达具有负相关性(P＜0.01).结论检测CD44v6 mRNA及nm23-H1 mRNA的表达可能成为HCC转移预后判断的指标.     

人胎肝干细胞在重症联合免疫缺陷小鼠损伤肝脏中的植入

目的:从孕4.5～6周的人胚胎肝脏中分离培养肝干细胞,并观察其在重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠损伤肝脏中的植入.方法:从孕4.5～6周的人胚胎肝脏中分离干细胞并进行体外长期培养,用RT PCR方法检测肝干细胞相关分子标志以及八聚物结合蛋白4(Oct-4)的表达,然后植入经四氯化碳(CCl4)造成急性肝损伤的SCID小鼠体内,在移植后2、l0、17d分别对受体鼠肝脏冰冻切片进行荧光观察和H-E染色.结果:所建立的胎肝细胞系不仅表达二肽水解酶Ⅳ(DPPⅣ)、白蛋白(Alb)、细胞角蛋白(CK)19、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、CK18、肝细胞生长因子受体(c-met)、干细胞因子受体(c-kit)等肝干细胞相关标志,还表达干细胞转录因子Oct-4.在细胞移植后2 d,肝脏冰冻切片未见绿色荧光;移植后10 d和17d肝脏冰冻切片见散在的绿色荧光.对同一切片做H-E染色,发现绿色荧光部位为肝板内的多个成熟肝细胞.结论:从人胚胎肝脏中分离的干细胞能够植入SCID小鼠的损伤肝脏.