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多重LAMP—熔解曲线法检测食品中两种食源性致病菌 总被引:2,自引:0,他引:2
针对沙门氏菌的侵袭蛋白基因(inv A)和金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶基因(nuc)设计LAMP引物,优化反应条件,并分别对反应产物进行熔解曲线分析,判断扩增结果,从而建立食品中沙门氏菌和金黄色葡萄球菌多重LAMP—熔解曲线检测方法。对9株目标菌和23株非目标菌的检测未出现假阳性和假阴性结果,并可通过熔解曲线的熔解温度分析确定所含目标菌;对产物的测序分析表明所得序列与目的基因序列吻合;对目标菌的检测灵敏度均可达到10 fg/μL;对232份样品的检测结果显示,其中2份生猪肉中检出金黄色葡萄球菌。该方法具有良好的检测特异性,并可为食源性致病菌的快速检测提供一种重要技术手段。 相似文献
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沙门氏菌引起的人畜共患疾病每年引发大量财产损失,快速简易的检验方法对于食品沙门氏菌的检验至关重要。环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP)作为PCR的有力替代工具,经历多年发展已在等温扩增领域显示出明显优势,在沙门氏菌检测应用方面也日渐成熟。本文对近五年来LAMP技术在沙门氏菌检测中的应用和LAMP技术检测平台进行了分析汇总。在沙门氏菌LAMP技术的特异性方面,对现有靶标基因的有效性和新靶标基因的有效性进行了探讨,对不同血清型的特异性检测和多重LAMP的应用进行了总结,分析其优点与不足之处,以此说明探针法、多重检测,微流控技术和即时检测(Point-of-Care Testing, POCT)是沙门氏菌LAMP技术的未来发展方向,为LAMP技术更好地应用于沙门氏菌检测提供参考依据,对于提高食品中沙门氏菌的检验能力具有重要意义。 相似文献
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《食品与发酵工业》2012,38(8)
通过设计转基因大豆内源基因(Lectin)、外源基因NOS和2个转基因大豆品系(GTS 40-3-2,MON89788)特异性LAMP引物,建立快速检测转基因大豆以及鉴定转基因大豆品系的LAMP体系,并选取国内豆制品利用CTAB法进行DNA提取,并针对上述基因进行PCR和LAMP扩增的对比,建立起了检测大豆制品中转基因成分的定性的LAMP方法。结果表明:4个LAMP方法均有较好的特异性,除了NOS、GTS 40-3-2的检测限为0.1%外,其他LAMP方法的灵敏度为0.01%,均能满足实际检测要求;在实时浊度LAMP法检测大豆制品转基因成分的鉴定中,传统的CTAB法能成功提取大豆粗加工制品的DNA,且DNA纯度能够进行核酸扩增反应。利用转基因外引物进行的普通PCR结果与实时浊度LAMP结果是一致的,说明建立的转基因实时浊度LAMP检测方法有很好的准确性。 相似文献
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设计并实现了一种基于日志分析的校园网监测预警平台。利用开源软件rsyslog,收集校园网络设备或*nix 系
统的日志信息,并实时存储到Mysql 数据库,基于Apriori 算法对日志信息进行分析处理,以动态监测潜在的攻击行为,一旦监
测到危险行为,平台能够自动部署访问控制列表(ACL),并及时向管理员发出预警通知,以便提前处理。平台为校园网络安全
管理提供了一种有价值的参考。 相似文献
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应用环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),建立了食品中产毒素性霍乱弧菌和副溶血性弧菌二重LAMP-熔解曲线快速检测方法。本方法针对产毒素性霍乱弧菌ctx A基因和副溶血性弧菌gyr B基因分别设计引物组进行二重LAMP扩增,并利用熔解曲线法分析扩增产物,从而判断DNA模板中所含目标菌。应用本方法对9株目标菌和17株非目标菌的检测结果与预期一致,并可通过熔解曲线的特征峰准确分析DNA模板中所含目标菌。对二重LAMP扩增产物的测序分析表明,扩增所得序列与目的基因序列吻合,从而进一步验证了该方法的特异性。经测试,本方法对两种目标菌的检测灵敏度均可达100 fg DNA/反应管。实验证明所建立的方法具有良好的特异性,并可为食品中两种致病性弧菌的快速检测提供一种重要技术手段。 相似文献
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本文从笔者多年在互联网公司从事Web开发的经验出发,谈谈对Java、.NET、LAMP这几种主流平台一些粗浅的认识和感受,希望能抛砖引玉,引发大家透过这些技术流派,进行一些对本质的独立思考。大难不死的J2EE之所以把Java排在前面,是因为有Sun强大的技术支持和开发 相似文献
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应用分层自适应匹配追踪重构MEMS陀螺信号 总被引:1,自引:0,他引:1
对含噪微机械系统(MEMS)陀螺信号进行小波分解重构时,真实信号对应的小波系数很难选取,故本文提出一种分层自适应匹配追踪算法(LAMP)来解决上述问题。建立了含噪MEMS陀螺信号中信号小波系数稀疏提取架构,将信号小波系数提取问题转化为含噪信号中信号小波系数稀疏性的恢复问题。比较已有稀疏重构算法,采用一种新的LAMP算法,在各种可能的小波系数组合中挑选出分解系数最为稀疏的一组,以此消除信号中的噪声小波系数,进而重构MEMS陀螺信号。实验表明:提出的LAMP算法的稀疏重构效果优于其他迭代贪婪重构算法;基于LAMP的信号稀疏小波重构方法,可以有效去除MEMS陀螺信号的大量噪声;去噪前后,纯MEMS陀螺数据解算的方位角平均累积误差由10.060 2(°)/h减小到5.034 6(°)/h,优于传统小波阈值重构法平均累积误差8.596 8(°)/h,显示了较好的应用效果。 相似文献
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LAMP技术在食品致病菌检测中的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
环介导的恒温扩增(LAMP)是近年来发展起来的一种新的恒温核酸扩增技术,该技术具有特异性强、敏感性高、反应快、设备简单等特点,已被应用于病原菌诊断、食品致病菌检测等领域的研究。本文重点阐述了近年来国内外学者应用LAMP技术在食品致病菌检测中的研究进展。 相似文献