转基因苜蓿草J163品系特异性LAMP检测 方法的建立

目的建立针对我国农业部未颁发农业转基因生物安全证书的转基因苜蓿草品系J163品系特异性等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法。方法根据转基因苜蓿草品系J163 5’端外源插入片段与苜蓿草基因组DNA之间的邻接区序列设计6条引物,建立了转基因苜蓿草J163品系特异性LAMP检测方法,并对本方法的特异性、灵敏度进行了测定。结果建立的检测方法特异于转基因苜蓿草J163成分检测,检测最低DNA浓度为(1imit of detection,LOD)为16 pg,相当于10拷贝转基因苜蓿草J163基因组DNA。结论本研究建立的转基因苜蓿草J163品系特异性LAMP检测方法特异性好,灵敏度高,能够快速、准确、稳定地对转基因苜蓿草J163成分进行检测分析。     

Moodle平台的建设及扩展

随着现代教育技术的不断发展,网络教学已经成为当前教学中的一种主要的教学方式。利用开源的教学系统搭建网络教学平台,并根据自身的实际需求进行二次开发及扩展可以满足更多个性化的需要。Moodle是全球著名的开源课程管理系统,广泛应用于全球各大高校的网络教学中,文章主要对Moodle网络教学平台的搭建方法及扩展方式进行了论述。     

新书上架

LAMP网站开发黄金组合，JRuby实战，加密与解密（第三版），互联网单元测试及实践，深入理解.NET（第2版·英文版），PHP网络编程技术与实践     

基于ARM和LAMP技术的抄表服务器系统

提出一种基于嵌入式微处理器ARM技术和网站架设LAMP(Linux操作系统+Apache服务器软件+MySQL数据库管理系统+PHP超级文本预处理语言)技术的抄表服务器系统.该系统通过内嵌有Qtopia软件编写的伺服程序的ARM平台将小区用户电量表数据经RS-485接口进行采集,并将采集到的数据通过小区已架设好的宽带网络传送至电业部门的PC机终端.该PC机上架设有一套基于LAMP技术的软件环境,并结合Qt软件编写的人机图形界面对发布采集命令、数据传入数据库进行控制,最后计算用户预存电费的余额,通过LAMP技术架设的网站进行发布.     

环介导等温扩增技术快速检测奶粉中的单增李斯特菌

环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种在等温条件下特异、灵敏、快速的新型基因扩增技术。试验以单增李斯特菌为研究对象,根据其特有的hlyA基因设计了一套特异性引物,进行LAMP扩增。结果表明,LAMP检测单增李斯特菌的灵敏度为2.45×101cfu/mL,其对人工感染奶粉样品的检出限为7.32×101cfu/mL。对其它食品病原菌进行检测,结果均未出现目的条带,特异性强。表明LAMP法适合于食品中污染单增李斯特菌的快速检测。     

乳品中肠球菌LAMP快速检测方法的建立及应用

应用环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),针对肠球菌16sRNA中高度保守的序列分析设计特异性引物,建立乳品中肠球菌特异性快速检测方法。结果表明,所设计的引物具有良好特异性,10株肠球菌均能扩增出特异性片段,而14株非肠球菌均未扩增出相应片段,无假阴性或假阳性情况出现。同时,该方法可在14 h内完成检测,且阳性LAMP反应所需目标菌DNA浓度仅为10 fg/μL。应用本方法对164份婴幼儿配方乳粉的检测结果显示,共在37个批次中检出肠球菌,检出率为22.6%,污染量在0.36~110 g-1(最近似值)间。该方法为肠球菌的快速检测提供了一种重要的技术手段。     

LAMP技术在检测原料乳及乳制品致病菌方面的应用

环介导等温扩增(LAMP,Loop-Mediated Isothermal Amplification)作为一种新的检测技术,具有操作简便、快速、特异性强等优点,目前已在原料乳及乳制品致病菌的检测中得到初步应用,本文综述了这一技术的原理、鉴别及检测的方法,及其在原料乳及乳制品检测方面的应用进展.     

桶装水中铜绿假单胞菌检测方法的比较

分别采用传统国标GB/T 8538-2008方法、基于OprL基因的PCR方法和环介导等温扩增(LAMP)方法检测桶装水中的铜绿假单胞菌,比较三种方法的检测效果.结果显示,采集的46份市场水样中,用传统GB8538-2008方法检出了3份阳性样品,检出率为6.5％,检测时间至少2天;而PCR和LAMP方法都检出4份阳性...     

水产品中哈维氏弧菌等温快速检测方法优化及比较

目的 基于核酸等温扩增技术,建立并优化哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)荧光法和可视化环介导恒温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)、重组酶聚合酶扩增(Recombinase polymerase amplification,RPA)快速检测方法。方法 选择哈维氏弧菌toxR基因为特异靶标序列,分别设计了2组LAMP引物、3组RPA引物,对引物进行筛选,优化建立了荧光法LAMP、可视化LAMP、普通RPA三种等温扩增方法,对三种方法的特异性和灵敏度进行比较,并用模拟污染样本验证检测实际样品的灵敏度。结果 基于快速提取的哈维氏弧菌基因组DNA,本文所建立的荧光法LAMP、可视化LAMP、普通RPA三种等温扩增方法均具有良好的特异性,与同属及近属的细菌没有交叉反应。三种方法的灵敏度分别为5.27 fg/μL(1.99 fg/μL~0.93 pg/μL,95%CI),0.11 ng/μL,1.07 pg/μL;荧光LAMP和普通RPA对模拟污染样本的灵敏度分别为7 CFU/mL和97 CFU/mL。结论 本文建立优化的三种等温快检方法结果准确、操作简单,扩增效率和灵敏度优于文献报道的同类方法,提高了哈维氏弧菌现场快速检测水平。     

环介导等温扩增技术快速检测食品中变形杆菌的研究

采用环介导等温扩增(LAMP)技术,快速检测食品中的变形杆菌。以变形杆菌(CMCC49027)的atpD基因作为靶序列,设计内、外引物,通过肉眼观察白色沉淀,判断检测结果。共对11株致病菌进行特异性实验。结果表明,变形杆菌为阳性,其他10株菌为阴性。采用FTA滤膜制备模板进行LAMP反应,其方法的灵敏度为6.4×102CFU/mL。利用LAMP技术直接检测人工污染的肉制品中的变形杆菌,其检出限为3.6×103CFU/g。本实验所建立的快速检测变形杆菌的LAMP检测方法具有较高的特异性和敏感性,能够满足变形杆菌快速检测的需要。