进口对虾急性肝胰腺坏死病病原分离鉴定及环介导等温扩增(LAMP)检测方法的建立

该研究抽取了453批在2017～2018年自越南、泰国、马来西亚进境的对虾样品进行对虾急性肝胰腺坏死病(Acute Hepatopancreatic Necrosis Disease,AHPND)病原的分离鉴定,并对结果进行分析.结果显示:直接取对虾肝胰腺组织进行病原分离检出率只有2.87％,而肝胰腺组织经过富集培养后...     

LAMP法检测食品中凝固酶阳性葡萄球菌

建立凝固酶阳性葡萄球菌环介导等温扩增方法(LAMP),运用在食品样品检测中,与实时荧光PCR方法及国家标准检测方法进行比较。以毒力因子——凝固酶的编码基因coa为目的基因设计引物,建立环介导等温扩增方法,对9株凝固酶阳性葡萄球菌和31株对照菌(均为凝固酶阴性)进行测试,并对5种共1 341份食品进行检测。建立的方法具有很好的特异性,检测灵敏度可达到1.8 CFU/100 g～2.5 CFU/100 g。     

等温扩增方法检测耐高温α-淀粉酶基因

建立耐高温α-淀粉酶Amy797E基因环介导等温扩增快速检测方法。LAMP引物,优化反应条件,FIP,BIP浓度为0.8μmol/L,F3,B3浓度为0.2μmol/L,镁离子浓度为2 mmol/L,甜菜碱浓度为1.4 mmol/L,反应时间为40 min,反应温度为62℃,SYBR Green法检测需2 h,电泳法检测共需2.5 h。与实时荧光和普通PCR比较特异性良好,转基因成分检测限达到0.01%。     

转基因玉米 BT11 品系环介导等温扩增(LAMP)检测方法的建立

目的 建立转基因玉米 BT11 品系的环介导等温扩增(LAMP)检测方法。方法 根据转基因玉米 BT11 品系特有序列(AY123624.1 和 AY629236)设计引物, 优化建立 LAMP 反应体系, 对该体系进行特异性、 灵敏度、 稳定性分析。结果 本研究设计的引物具有很好的特异性, 可特异性检测出转基因玉米 BT11 品系; 检测灵敏 度可达 0.5%; 经精密度实验分析, 该方法的稳定性良好。结论 LAMP 方法检测转基因玉米品系 BT11 具有特 异性高、稳定性好、快速灵敏、过程可视等优点, 具有广阔的应用前景。     

LAMP技术在微生物检测中的应用

LAMP(1oop-mediated isothermal amplification)技术是一种新的恒温核酸扩增技术,具有特异性强、等温灵敏、操作简单、产物易检测等优点。该技术已被用于多种病原微生物的检测。本文综述了LAMP技术的原理,及其在几种微生物检测中的应用,并对其应用前景做了展望。     

基于LAMP架构开发Web应用的优势

LAMP（Linux＋Apache＋Mysql＋PHP/Perl）是一种web网络应用和开发环境,是四种开源软件技术的组合。采用LAMP技术的主要特点是：性能稳定、数据安全、运行速度超快、不涉及版权问题。LAMP是一种使用相对简单、方便．但功能强大的应用服务平台,广泛应用于网站建设、办公自动化、电子政务等Web应用系统。     

实时荧光LAMP技术快速检测变形杆菌

建立一种快速检测变形杆菌的方法。采用实时荧光LAMP(Real Amp)技术检测变形杆菌,分析Gen Bank中公布的变形杆菌atp D基因序列,针对其6个区域设计4条引物,利用实时荧光监测仪等温(62℃)扩增模板DNA,通过与电脑相连进行实时监测,对该方法检测变形杆菌的特异性、灵敏度、人工污染猪肉检出限等方面进行研究,并将该检测法的灵敏度与普通环介导等温扩增(LAMP)检测法进行比较。结果表明,Real Amp检测方法比普通LAMP检测方法更加方便快捷,20 min内即可判定结果;用于特异性试验的19株试验菌株中,6株变形杆菌呈阳性结果,其他13株非变形杆菌均呈阴性结果;检测纯菌的灵敏度为8.1CFU/m L,是普通LAMP检测方法的10倍;人工污染猪肉的检出限为81CFU/m L。本研究建立的Real Amp检测方法操作简单,耗时短,特异性强、灵敏度高,能够实现对变形杆菌的快速检测。     

DNA环介导恒温扩增技术速检测结核分枝杆菌的研究

DNA环介导等恒扩增(koop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术是一种特异、灵敏、快速的新型基因检测技术,其检测结果可以通过加入核酸燃料SYBR Green l进行肉眼观察,也可以通过琼脂糖凝胶电泳进行观察.本文以结核分支杆菌(M.TB)作为研究对象,设计了4种LAMP引物以特异地识别结核分支杆菌中gyrB基因的六个特殊区域,着重于利用LAMP技术在几种常见的致病分支杆菌中能快速、特异地检测出结核分支杆菌.实验结果表明,LAMP技术能在恒温(63℃)条件下,1 h内检测出结核分枝杆茵,分别对7株非结核分枝杆茵进行检测,只有一株偶发分支杆菌得到了阳性的结果.说明该技术有望应用于畜牧业中肉制品或乳制品中结核分支杆菌的检测.     

应用环介导等温扩增检测阪崎肠杆菌

建立环介导等温扩增检测阪崎肠杆菌的方法,通过肉眼可见的白色沉淀,判断检测结果。将阪崎肠杆菌(ATCC29544)的16S-23SrRNA间区序列作为靶基因,设计2对特异引物,优化反应条件,进行LAMP扩增。对产物进行酶切分析,与理论上的预期结果相一致。通过测序比对,与GenBank上报道的同源性达到99%。用25株食源性致病菌证实该引物特异性强。LAMP扩增20min,其灵敏度为4.3×102 fg/tube,结果表明,LAMP方法检测阪崎肠杆菌,灵敏度高、特异性强、耗时短、方法简便。