高效液相色谱法检测粮谷及其制品中六种A, B型单端孢霉烯族真菌毒素

目的 建立粮谷及其制品中六种A,B型单端孢霉烯族真菌毒素的高效液相色谱?串联质谱分析方法。方法 样品经乙腈?水溶液(84︰16, V/V)提取, MycoSep?226或MycoSep?227多功能柱净化, Waters Atlantis dC18色谱柱分离, 串联四极杆质谱多反应离子监测模式检测。结果 6种真菌毒素在各自的线性范围内线性关系良好, 相关系数均不低于0.996, 定量下限为0.1~20 μg/kg, 低、中、高3个加标水平下平均回收率为60.1%~123%, 相对标准偏差为7.5%~19.8% 。结论 该方法具有前处理简单、净化效果好、灵敏度高的优点, 适用于复杂基质样品中A,B型单端孢霉烯族真菌毒素残留的确证和定量检测。     

花椰菜花叶病毒CaMV 35S启动子LAMP检测方法的建立

针对花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子的保守序列设计特异性引物,并进行条件优化,建立CaMV35S启动子的LAMP检测方法。该方法具有良好的特异性,检测灵敏度可达0.002%。对80份各类植物及其加工品进行检测,检测结果与实时荧光PCR法完全相符。CaMV35S启动子的LAMP检测方法,在检验检疫行业和食品加工业具有广阔的应用前景,对于加强转基因产品检测监管,促进进出口贸易具有重要意义。     

免疫胶体金技术及其在真菌毒素检测中的应用

综述了免疫胶体金的制备及保存方法,免疫胶体金技术的原理、特点以及免疫胶体金技术在真菌毒素检测上的应用,并分析了该技术存在的问题及发展趋势。     

气相色谱-燃烧炉-同位素比质谱法测定奶粉中 孕酮δ13C值

目的基于高效液相色谱纯化分离,应用气相色谱-燃烧炉-同位素比质谱法(gas chromatography-combustion-isotope ratio mass spectrometry,GC-C-IRMS)建立奶粉中测定孕酮激素碳同位素比值的方法,以气相色谱-质谱法提供定量支持。方法样品经水溶解和乙腈提取,经乙腈饱和的正己烷除脂肪和过C18固相萃取柱净化,经高效液相色谱纯化、浓缩后进行GC-C-IRMS检测。结果外源性孕酮δ~(13)C平均值为-32.297‰,内源性孕酮δ~(13)C平均值为-21.387‰,方法回收率为52.9%,检出限为22.7μg/kg,相对标准偏差小于5%(n=6)。结论内源性和外源性孕酮δ~(13)C值有显著性差异,本方法可以区分内外源性孕酮。但由于方法局限性,只能检测孕酮大于22.7μg/kg的样品。     

进口黑虎虾中霍乱弧菌的鉴定及其挥发性产物分析

目的对进口黑虎虾中分离的菌株F14-2进行种属鉴定,通过顶空气相色谱-质谱联用法(headspace gas chromatography-mass spectrometry,HS-GC-MS)分析分离菌株液态培养代谢的挥发性产物。方法应用VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定系统分析菌株的生理生化特征,利用荧光定量PCR特异性扩增检测病原菌,通过顶空气相色谱-质谱联用法分析分离菌株F14-2的代谢的挥发性产物。结果菌株F14-2为革兰氏阴性菌,生理生化特征与霍乱弧菌(Vibrio cholerae)的相似性为98%,荧光定量PCR检测和血清凝集试验进一步确认为非O1非O139群霍乱弧菌,菌株F14-2在营养肉汤(nutrient broth)中代谢的挥发性产物主要有乙醇、异戊醇、乙酸和2-乙基己醇。结论进口黑虎虾中分离的菌株F14-2鉴定为霍乱弧菌,该菌产生的挥发性产物为霍乱弧菌的鉴定提供参考。     

SDS-PAGE电泳法检测鱼肉热处理终点温度

为寻找快速测定鱼肉热处理终点温度(Heating Endpoint Temperature,EPT)的方法,以4种鱼为研究对象,采用SDS-PAGE法.针对样品的可溶性蛋白进行鱼肉热加工EPT的初步研究.对4种鱼进行EPT为50～77℃的梯度加热以及相同EPT重复加热.试验结果表明,鱼肉梯度加热的SDS-PAGE电泳图谱发生渐进式的变化,无明显分界点.多数条带随温度的升高浓度降低,某些条带则消失,与EPT重复加热及仅加热一次相比,其电泳结果基本没有差别.2种红内鱼的66.2～31.2 kda区域条带随温度变化较明显,可作为参考区域.本文确立了鲭鱼与大马哈鱼SDS-PAGE电泳检测肉类达到目的EPT的方法.     

婴幼儿配方乳粉中维生素A、E检测方法的比较研究

目的 以国家标准GB5009.82-2016第一法(GB方法)和AOAC 2012.10/ ISO20633:2015 (AOAC/ISO方法)为例,通过文本分析和实验数据比较反相液相色谱法(RF-HPLC)和正向液相色谱法(NP-HPLC)检测婴幼儿配方粉中维生素A和维生素E的差异,分析可能导致方法结果产生差异的原因,提出科学建议。方法 通过标准方法文本原理比对,分析两种方法的原理及技术步骤差异;通过质控样检测,分析两组结果的标准偏差、变异系数、95%重复性限、相对重复性限值、平均值、回收率等指标,比对两种方法的精密度和准确度差异;通过市售样品检测,分析两种方法检测结果的系统偏差和比例偏差,判别两种方法对婴幼儿配方乳粉的结果一致性。结果 从方法文本上看,AOAC/ISO方法较 GB方法的步骤更为简便,且标明了方法的适用浓度范围、重复性、重现性等关键指标,标注的检出限及定量限值也较GB方法更低;精密度方面,采用AOAC/ISO方法测得的重复性和重现性标准偏差、变异系数、95%重复性限、相对重复性限值结果,均低于GB方法测得的同类指标。准确度方面,AOAC/ISO方法和GB方法测定维生素AE时均表现出较好的回收率(100±5%);样品对比检测结果表明,维生素A两种方法的检测结果不存在系统偏差和比例偏差,结果一致;维生素E两种方法的结果既有系统偏差也有比例偏差,结果不一致。结论 AOAC/ISO 方法和GB方法原理及操作步骤存在明显不同,可能导致两种方法在测定维生素E含量时,结果呈现统计学显著差异。建议加强国内外检测标准的沟通协调,在检测目标物,样品称量方式,样品适用浓度范围等方面做进一步改进和完善。     

2种方法测定婴幼儿配方食品中8种营养素的比较

目的 对比火焰原子吸收光谱法（FAAS）和电感耦合等离子体发射光谱法（ICP-OES）在测定婴幼儿配方食品中营养素的结果差异,分析差异产生的原因,提出合理建议。方法 收集市售21种婴幼儿配方食品作为对比样品,依据相关标准,分别采用FAAS和ICP-OES法检测样品中铜、锌、铁、钾、钠、钙、镁和锰元素含量,利用统计软件计算两种方法间的系统偏差和比例偏差,分析可能带来差异的原因。结果 检测铁元素时,既不存在系统偏差,也不存在比例偏差,两种检测方法没有显著差异,认为结果具有一致性;而其他元素,包括铜、锌、钾、钠、钙、镁和锰元素,结果差异均达到统计学显著水平。结论 因仪器原理、方法线性范围、样品消解前处理方式等方面的差异,两种方法在检测铜、锌、钾、钠、钙、镁、和锰等7种元素时会得出不一致的检测结果,建议进一步研究前处理方法对结果的影响,并深入分析结果差异对标准实际应用的影响,为检测方法修订和完善提供科学依据。     

RNA病毒检测质控物质-大肠杆菌噬菌体MS2标准样品的研制和应用

目的研制大肠杆菌噬菌体MS2标准样品,以其作为RNA病毒检测质控物质,建立RNA病毒检测全过程的质量控制体系。方法利用液体培养法制备大肠杆菌噬菌体MS2标准样品;采用双层琼脂法对标准样品进行稳定性、均匀性测定并定值;将标准样品添加于贝类样品中,应用于贝类诺如病毒实时荧光检测全过程质量控制。结果该标准样品稳定性与均匀性良好,定值为(1.57±0.0288)×10~(11) pfu/m L;保质期为12个月;在4种不同贝类样品中,病毒提取效率在3.70%~7.84%之间,符合国际标准ISO 15216:2-2013的病毒提取效率大于1%的要求。结论该研究制备的大肠杆菌噬菌体MS2标准样品可以对RNA病毒检测全过程进行良好的质量控制,具有良好的应用前景。     

一种快速检测产黄曲霉毒素菌株的方法

甲基化β-环糊精(Mβ-cyd)可以增强黄曲霉毒素的荧光强度,普通霉菌培养基中添加Mβ-cyd,产黄曲霉毒素的菌株接种在这种培养基上28℃培养5 d后,在365 nm的紫外灯下观察,若菌落周围有蓝紫色荧光即为产黄曲霉毒素菌株,产毒菌株经过产毒培养、毒素提取、高效液相色谱检测等一系列试验证明,这种方法可以有效地检测出产黄曲霉毒素菌株。