3-溴丙酮酸对SMMC-7721肝癌细胞增殖的抑制作用

目的观察3-溴丙酮酸（3-BrPA）对SMMC-7721肝癌细胞增殖的抑制作用。方法对经0．25mmol／L～8．00mmol／L3-BrPA溶液处理的SMMC-7721细胞,采用MTT法检测细胞增殖抑制情况,并在荧光显微镜和电镜下观察细胞内部结构的变化。结果3-BrPA对SMMC-7721细胞的增殖有明显的抑制作用,其中在0．75mmol／L浓度下的抑制作用最强;经处理后的细胞,在荧光染色下显示坏死细胞增多,在电镜下显示细胞染色质分散,少量核染色质凝聚。结论3-BrPA对SMMC-7721肝癌细胞有抑制作用。     

从噬菌体7肽库中筛选的哇巴因结合肽对血管内皮细胞的保护作用

目的:寻找与哇巴因高亲和力结合并抑制其生物功能的相关小分子肽,为治疗原发性高血压提供新策略.方法:以哇巴因为筛选分子,应用M13噬菌体呈现随机7肽库进行筛选.经过3轮生物淘筛,并通过ELISA法鉴定,对噬菌体阳性克隆ssDNA电泳鉴定和基因测序分析.委托合成筛选获得哇巴因结合肽,采用放射配基受体结合法检测其结合活性;MTT法检测血管内皮细胞的增殖抑制率,Hoechst33342/PI双荧光染色检测细胞形态学变化;利用RT-PCR和细胞免疫荧光检测钠泵α1、β1的表达水平;荧光探针检测细胞内游离Na+浓度变化.结果:筛选获得14个阳性克隆,基因测序显示:哇巴因结合肽一致率达64.3%(9/14).委托合成肽(Arg-Cys-Met-Thr-Ser-Arg-Ser).放射性配基受体结合法检测显示,合成的哇巴因结合肽能够与哇巴因结合.哇巴因结合肽+哇巴因的EAhy926细胞组增殖抑制率小于哇巴因组(P<0.05);Hoechst33342/PI双荧光染色显示细胞死亡数量减少;RT-PCR和免疫细胞化学检测钠泵α1、β1亚单位转录和翻译水平,显示哇巴因结合肽能拈抗哇巴因所引起钠泵α1亚单位表达的上调、β1亚单位的下调作用;荧光探针显示哇巴因结合肽能够拮抗哇巴因对钠泵的抑制作用.结论:哇巴因特异性结合肽能够阻抑哇巴因对血管内皮细胞的抑制增殖和诱导死亡作用,为研究哇巴因与钠泵的相互作用机制及进一步研究抗哇巴因的分子药物奠定基础.     

锌指蛋白ZNF580定位在MGC803细胞核

新基因(AF184939)ZNF580是由本组克隆并于Genbank注册的C2H2型锌指蛋白转录因子基因,其cDNA 748~1266 bp之间的碱基构成一个完整的开放阅读框,编码172个氨基酸。蛋白功能基序分析表明:其羧基端序列中含有3个重复串联的C2H2型锌指蛋白主构域:CX2CX3FX5LX2HX3H(X代表保守性差的氨基酸),富含脯氨酸残基的氨基端序列为转录激活结构域[1]。利用绿色荧光(green fluorescence pro-tein,GFP)在活细胞内的示踪作用[2],我们将GFP与ZNF580cDNA开读框融合,导入胃癌MGC803细胞株中,直观地观察到ZNF580基因在细胞内的表达及亚细胞定位,…     

胃癌细胞凋亡及相关基因表达研究进展

胃上皮的稳态依靠细胞增殖与凋亡的平衡来维持，胃癌的发生涉及多基因多步骤的病理过程，在这个过程中始终贯穿着一系列的分子变化，本简述胃癌发生发展过程中细胞凋亡的特征及相关基因的表达。     

蟾蜍灵诱导人白血病HL60细胞凋亡的初步研究

目的 :探讨中药蟾蜍灵诱导白血病HL60细胞凋亡作用。方法 :应用台盼蓝染色法测定HL6 0细胞的生长曲线 ,应用相差显微镜、电子显微镜和DNA琼脂糖凝胶电泳等技术分析细胞凋亡。结果 :蟾蜍灵与HL60细胞共育时 ,能明显抑制细胞生长 ,细胞呈典型的凋亡形态学改变 :细胞皱缩 ,染色质凝集 ,沿核膜内侧分布 ,呈新月形 ,可见由膜包被细胞内容物的凋亡小体的产生 ;细胞DNA裂解成 180～200bp及其倍数的片段 ,电泳得到特有的梯形条带。结论 :蟾蜍灵诱导细胞凋亡是其抗肿瘤的作用机制之一。     

哇巴因信号的传递及其对细胞生长和死亡的影响

哇巴因(ouabain)是能抑制Na+,K+ ATPase活性的强心甾类物质,在Na+,K+ ATPaseα亚单位位于细胞膜外侧有 1个ouabain特异性结合位点,ouabain结合时,活化胞浆中具酪氨酸蛋白激酶活性的Src,形成Na+,K+ ATPase Src复合物,作为一个活化的“二元”受体,介导信号传递。oua bain对细胞生长和死亡起重要调节作用。ouabain介导细胞发生杂合性死亡,即同一细胞兼具细胞肿胀、细胞器溶解等坏死特征和核凝集、DNA裂解、caspase级联反应等凋亡特征,对于细胞死亡的认识具有重要意义。     

9-顺式维甲酸对胃癌细胞周期及周期因子表达的影响

目的：探讨9-顺式维甲酸（9-cisRA）抑制胃癌细胞生长及其机制。方法：RT-PCR检测9-cisRA作用MGC80-3细胞前后细胞周期蛋白D1（CyclinD1）和周期蛋白依赖性激酶4（CDK4）mRNA表达的变化；流式细胞术和MTT法检测其对细胞周期和生长抑制的作用；电镜观察细胞形态学改变。结果：10μmol／L9-cisRA作用MGC80-3细胞96h时，CyclinD1和CDK4mRNA表达均显著下降（P〈0．01）；9-cisRA对MGC80-3细胞生长抑制作用呈时间和剂量依赖性；9-cisRA诱导MGC80-3细胞阻滞于细胞周期的G1期，并呈典型的凋亡特征性的“亚G1峰”和形态学改变。结论：9-cisRA对MGC80-3细胞有显著的生长抑制和诱导凋亡作用，与抑制CyclinD1和CDK4表达将细胞周期阻滞于G1期有关。     

大蒜预防胃癌的细胞学机制研究

目的：探讨大蒜预防胃癌的细胞学机制,为大蒜预防胃癌提供理论依据。方法：以低分化胃癌细胞系ＭＧＣ－８０３为靶细胞,用ＭＴＴ法检测大蒜汁（ＧＪ）对肿瘤细胞活性的影响,透射电镜、ＤＮＡ凝胶糖电泳和原位缺口标记法（ＴＵＮＥＬ）分析细胞凋亡。结果：ＧＪ能有效抑制ＭＧＣ－８０３细胞的活性,并诱导其凋亡。形态学变化表现为细胞皱缩,染色质凝集、碎裂,沿核膜内缘分布,凋亡小体形成等;基因组ＤＮＡ沿核小体之间断裂,电     

蟾蜍灵对人胃癌细胞系MGc-803的细胞毒作用

蟾蜍灵(bufalin)是我国传统中药蟾酥中蟾毒的主要成分之一,研究其抑癌作用及机制具有重要意义。采用台盼蓝染色法、噻唑蓝还原法和光镜观察bufalin对人低分化胃腺癌细胞系MGc—803的生长抑制作用。结果显示,0．01μmol／L及以上浓度bufalin对MGc—803细胞具有显著的抑制作用,IC50值约为0．1μmol／L。bufalin抑制MGc—803生长的机制是致使细胞核染色质凝缩、碎裂,DNA损伤,胞浆RNA含量下降,导致细胞死亡。     

水溶性紫杉醇衍生物PLT抗肿瘤活性的实验研究

目的观察水溶性紫杉醇衍生物(Peg-Leu-Taxol,PLT)的抗肿瘤活性及机制.方法以MTT还原法检测PLT对肿瘤细胞生长的抑制作用,以相差显微镜和荧光显微镜观察细胞形态学改变,免疫组化方法检测细胞生长相关基因p21wafl表达.结果PLT能明显抑制乳腺癌(MCF-7)、非小细胞肺癌(PG-49)和红白血病(K562)细胞的生长.细胞形态呈凋亡特征性改变,细胞皱缩,核染色质凝缩、碎裂、亮珠状浓染.细胞p21wafl蛋白表达显著增高.结论PLT具有明显的抗肿瘤活性,其诱导肿瘤细胞凋亡与p21wafl基因表达上调有关.