哇巴因抑制乳腺癌细胞增殖与雌激素受体亚型介导的信号通路有关

目的在确定哇巴因是否经雌激素受体(estrogen re-ceptor,ER)途径发挥抗乳腺癌细胞增殖作用的基础上,进一步探讨ER亚型在哇巴因介导的增殖抑制中的作用。方法选择兼有两种ER亚型表达的人乳腺癌细胞株MCF-7为研究对象,采用MTT法、RNA干扰技术及蛋白印迹检测技术,观察ER亚型对哇巴因介导的细胞增殖抑制作用的影响。结果在0.1～1 000 nmol.L-1浓度范围内,哇巴因以剂量依赖性方式明显抑制MCF-7细胞的增殖活性,该抑制作用可被ER阻断剂ICI 182,780部分阻断。应用RNA干扰技术沉默ERα或ERβ基因表达,进一步证实哇巴因对MCF-7细胞的增殖抑制作用主要由ERα介导。结论哇巴因可通过ERα信号通路对乳腺癌发挥抗肿瘤效应。NKA结合ER可能是未来开发抗乳癌药物的潜在重要靶点。     

Bufalin抗癌机制研究进展

Ｂｕｆａｌｉｎ是传统中药蟾酥成分中的蟾毒配基之一。实验研究表明，Ｂｕｆａｌｉｎ在低浓度时能有效诱导肿瘤细胞分化，高浓度时诱导肿瘤细胞调亡。它是细胞拓扑异构酶Ⅱ的抑制剂，主要作用于细胞周期的Ｓ期；其诱导细胞分化、调亡的机制与细胞生长相关基因的表达有关，也有独特的信号转导途径；对血管生成具有抑制作用。     

四种检测细胞凋亡方法的比较

目的：比较４种细胞凋恨检测方法的优缺点。方法：以ｂｕｆａｌｉｎ诱导ＨＬ６０细胞凋亡为例,选择４例方法即电镜（ＥＭ）、ＤＮＡ电泳、原位缺口标记法（ＴＵＮＥＬ）和流式细胞术（ＦＣＭ）检测细胞凋亡,并对凋亡率进行了比较。结果：ＥＭ和ＤＮＡ电泳技术是定性说明凋亡的可靠方法,而ＴＵＮＥＬ和ＦＣＭ擅长于定量检测凋亡细胞,ＥＭ、ＴＵＮＥＬ和ＦＣＭ检测的凋亡率具有显相关性。结论：研究细胞凋亡时宜选用既特异、灵敏     

蟾蜍灵对人胃癌细胞系MGc-803的细胞毒作用

蟾蜍灵(bufalin)是我国传统中药蟾酥中蟾毒的主要成分之一,研究其抑癌作用及机制具有重要意义。采用台盼蓝染色法、噻唑蓝还原法和光镜观察bufalin对人低分化胃腺癌细胞系MGc—803的生长抑制作用。结果显示,0．01μmol／L及以上浓度bufalin对MGc—803细胞具有显著的抑制作用,IC50值约为0．1μmol／L。bufalin抑制MGc—803生长的机制是致使细胞核染色质凝缩、碎裂,DNA损伤,胞浆RNA含量下降,导致细胞死亡。     

碱性成纤维细胞生长因子和5-氮杂胞苷对大鼠骨髓间充质干细胞分化潜能和细胞增殖的影响

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和5-氮杂胞苷(5-aza)对体外骨髓间充质干细胞(MSCs)细胞增殖与分化潜能的影响。方法:大鼠骨髓中获得MSCs,培养传代,在倒置相差显微镜和透射电镜下观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞周期改变;MTT法检测bFGF和5-aga对MSCs生长的影响;免疫细胞化学方法检测actin、desmin、myoglobin、NSE、GFAP的表达。结果:有心肌样细胞和神经元样细胞的形态变化;MSCs经5-aza以及5-aza加bFGF联合诱导actin、desmin、myoglobin、NSE和GFAP的表达均较对照组显著增高;而经bFGF诱导后,前4种蛋白表达无明显变化,仅GFAP蛋白表达显著增高。结论:5-aza对MSCs细胞生长有抑制作用,而bFGF有明显促增殖作用。MSCs被5-aza诱导分化成心肌样细胞和神经元样细胞,bFGF可使MSCs分化为GFAP阳性的神经胶质样细胞。     

THE STUDY FOR MUTAGENIC TOXICITY OF DIMEHYPO

利用生物微核测定技术，检测了杀虫双对几种水生脊椎动物的微核及核异常效应。结果表明：阳性对照药物丝裂霉素Ｃ对鲢鱼红细胞的微核率有显著影响，且有明显的剂量—效应关系。农药杀虫双对两栖类蝌蚪、鲢鱼及鲤鱼红细胞的微核率没有显著影响。但能显著地诱导蝌蚪及鲤鱼红细胞核异常的产生。说明杀虫是一种非致突变物，但它对各种水生脊椎动物红细胞核膜有一定损伤作用。     

土槿乙酸诱导HL60细胞凋亡及其与半胱氨酸蛋白酶-3活化的关系

目的 探讨土槿乙酸(PLAB)的抗癌活性及其机制。方法 对用不同浓度PLAB处理的HL60细胞，或半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)抑制剂DEVD-fmk预处理的HL60细胞。采用MTT法检测HL60细胞抑制增殖作用，采用Hoechst33342/PI双荧光活细胞染色和原位末端标记(TUNEL)方法检测细胞凋亡，CPP32 colorimetric kit检测caspase-3酶活性。结果 PLAB以剂量依赖的方式抑制HL60细胞的生长，其IC50值为1μmol/L。PLAB诱导HL60细胞死亡的形式以细胞凋亡为主，且该凋亡可被caspase-3抑制剂所遏制。PLAB诱导的caspase-3酶的活化与剂量和作用时间呈依赖关系。结论 PLAB能有效诱导HL60细胞凋亡，该凋亡过程伴有caspase-3的活化。     

鲨鱼软骨制剂抑癌作用与诱发胃癌细胞凋亡

 目的　研究鲨鱼软骨制剂 (SCP)对人胃癌细胞 (MGC80 - 3)生物学行为的影响并探讨其抗癌作用机制。方法　用不同浓度的 SCP加入体外培养的 MGC80 - 3细胞系中 ,用 MTT比色法 ,荧光显微镜 ,透射电子显微镜技术和琼脂糖凝胶电泳方法 ,观察 MGC80 - 3细胞形态学和生化方面的改变。结果　 SCP明显抑制 MGC80 - 3细胞生长 ,IC50 值为 1 mg/ ml;荧光显微镜下可见MGC80 - 3细胞在形态学上出现典型的核固缩、破裂等凋亡细胞的形态学改变 ;透射电镜下可见细胞核染色质凝集呈帽状分布于核膜下 ,凋亡细胞附近可见多个高电子密度的凋亡小体 ;琼脂糖凝胶电泳呈现典型的“梯状”(DNA ladder)带。结论　SCP诱导人胃癌细胞凋亡是其抑制肿瘤作用机制的重要方面之一。     

蟾蜍灵诱导人胃癌细胞凋亡的实验研究

用ＭＴＴ法、形态学观察法、ＤＮＡ电泳和流式细胞仪观察蟾蜍灵（Ｂｕｆａｌｉｎ）诱导的胃癌细胞凋亡。结果表明,０．０１ｕｍｏｌ／Ｌ蟾蜍灵作用ＭＧｃ－８０３细胞４８ｈ,即可显著抑制细胞生长,ＩＣ５０值约为０．１ｕｍｏｌ／Ｌ。琼脂糖凝胶电泳获得梯形图谱,汉式细胞仪ＤＮＡ直方图上出现典型的亚二倍体峰,凋亡主要发生在Ｇ１／Ｇ０期,细胞凋亡率随药物浓度和作用时间的增加而增高,以上结果提示,ｂｕｆａｌｉｎ对胃癌细     

四种检测细胞凋亡方法的比较

目的 评价四种检测细胞凋亡的方法。方法 以蟾蜍素（bufalin)诱导的白血病细胞株HL60细胞凋亡,选择流式细胞术（FCM）、原位缺口末端标记法（TUNEL）、DNA电泳和电镜（EM）技术对比检测细胞凋亡。结果 定性的EM和DNA电泳技术可靠,而TUNEL和FCM主要用于定量检测。结论 EM、TUNEL和FCM检测细胞凋亡率具有显著相关性。