天山堇菜总黄酮抗流感病毒作用及机制研究

目的?研究天山堇菜总黄酮（TFVM）的体内外抗流感病毒作用及其机制。方法?体外实验采用细胞病变效应（CPE）法观察TFVM对流感病毒A/FM/1/1947（H1N1）致犬肾细胞（MDCK）病变的影响；设置细胞对照组，病毒感染组，阳性药金刚烷胺（AH）对照药组（10 μmol/L），TFVM 100、50、25 μg/mL 3 个浓度组，以H1N1分别感染MDCK和人髓系白血病单核细胞（THP-1），Western Blot法检测基质蛋白2（M2）、非结构蛋白（NS1）蛋白表达，检测THP-1细胞中p65蛋白表达及核转位；鸡血球细胞凝集实验检测TFVM对血凝素（HA）的抑制作用，荧光法检测神经氨酸酶（NA）活性。体内实验将小鼠随机分为病毒感染对照组，阳性药达菲（11.375 mg/kg）组，TFVM高、低剂量（0.4、0.2 g/kg）组，以流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠建立病毒性肺炎模型，取小鼠肺组织研磨液接种MDCK细胞，CPE法观察对小鼠肺组织病毒增殖量的影响；qRT-PCR检测M2蛋白及肺组织中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、干扰素诱导蛋白10 （IP-10） mRNA表达水平。结果?TFVM明显抑制流感病毒致MDCK细胞病变，其IC50为79.1 μg/mL；其100 μg/mL浓度对MDCK和THP-1细胞中流感病毒M2、NS1蛋白表达均有明显抑制作用；TFVM还可抑制THP-1细胞内p65蛋白表达及其核转位。TFVM对流感病毒的两个膜蛋白NA和HA功能无明显影响；TFVM以0.2、0.4 g/kg剂量给药可明显降低流感病毒感染小鼠肺组织内病毒载量（P<0.05，P<0.01），并降低炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、IP-10 mRNA表达水平（P<0.05，P<0.01），在一定程度上能降低M2 mRNA表达水平（P>0.05）。结论?TFVM在体内外均有明显的抗流感病毒作用，其机制可能是通过抑制M2蛋白和NS1蛋白表达而直接抑制流感病毒的复制；还可能通过抑制宿主细胞内p65蛋白表达及其核转位，从而干预NF-κB信号通路下游炎症因子的表达，发挥间接抗病毒作用。     

RANKL、RANK蛋白在胶质母细胞瘤组织中的表达及临床意义

目的:分析RANKL、RANK蛋白在胶质母细胞瘤组织中的表达及临床意义。方法:收集2017年10月至2019年10月于我科行手术治疗的21例胶质母细胞瘤患者的临床资料，用蛋白印迹试验检测肿瘤中心组织、瘤周组织、皮层造瘘脑组织中RANKL、RANK表达情况，并对其进行统计学分析。结果:肿瘤中心组织RANKL表达高于瘤周组织，有统计学差异(P=0.032)；瘤周组织高于皮层造瘘脑组织，有统计学差异(P=0.024)。瘤周组织RANK表达明显高于肿瘤中心组织，有统计学差异(P=0.006)；肿瘤中心组织高于皮层造瘘脑组织，有统计学差异(P=0.028)。结论:肿瘤中心组织中RANKL表达高于瘤周组织、脑组织，而瘤周组织中RANK明显高于肿瘤中心组织、肿瘤中心组织高于脑组织，我们认为RANKL/RANK通路可能在胶质母细胞瘤侵袭过程中起重要作用，有待后续进一步试验。     

EB 病毒Rta 优势表位抗原的克隆表达及在应用ELISA 诊断鼻咽癌中的价值

目的　制备高活性EB 病毒立即早期蛋白Rta 优势表位抗原，并初步评价该抗原在鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma, NPC）诊断中的价值。方法　分析Rta 氨基酸序列，选取抗原优势表位Rta（301~440aa），合成目的基因， 连接pBVGST-6His 载体，构建重组pBV-Rta 表达质粒，进行诱导表达获得纯化抗原。采用间接ELISA 初步评价优势表 位抗原在鼻咽癌诊断中的价值，以纯化的pBV-Rta 优势表位抗原为包被抗原，抗人IgA，IgG 和IgM 为二抗，检测由烟 台毓璜顶医院提供的50 例经临床病理确诊的NPC 患者血清样本和90 例健康体检者血清样本。结果　获得了高效原核 表达的pBV-Rta 优势表位抗原(301~440aa)，经过小样本验证，确定pBV-Rta 具有良好的抗原活性和特异度。放大样本 进行检测，基于Rta 优势表位抗原的Rta-IgG 间接ELISA 方法检测灵敏度和特异度分别为73.08% 和95.79%。Rta-IgG 检测的AUC 值为0.860。结论　Rta 优势表位抗原pBV-Rta 是优选的可以用于Rta-IgG 检测的抗原，利用该抗原所建立 的间接ELISA 检测方法可以很好地区分鼻咽癌患者和健康对照。     

经颅磁刺激在物质依赖干预中的研究进展

物质依赖是一种复发性极强的慢性疾病,患者躯体与心理上对物质产生依赖,对成瘾物质渴求迫切,严重危害个人健康与社会发展。近年来,非侵入式神经调控技术被广泛应用于各种神经精神疾病的临床康复和治疗研究当中,逐渐成为治疗成瘾行为的潜在方法和手段。经颅磁刺激(transcranial magnetic stimulation,TMS)技术是于1985年首次创立的一种皮质刺激方法,能对皮质代谢及脑血流有不同的影响,还影响脑内多种神经递质的调节和氨基酸的代谢。TMS对不同成瘾行为的干预作用在临床研究中取得一些不错成果,文章就近年来TMS在物质依赖干预中的研究进展作一综述。