酵母双杂交筛选Clathrin相互作用蛋白

目的 应用酵母双杂交技术从小鼠肺cDNA文库中筛选与Clathrin相互作用蛋白,进一步阐明Clathrin在急性肺损伤和急性呼吸窘迫症（ALI/ARDS）发生时肺泡上皮极性损伤中的具体作用机制。方法 首先构建酵母双杂交pSos-Clathrin诱饵载体,酶切鉴定,然后确定Clathrin诱饵蛋白无自激活特性并检测了Clathrin诱饵蛋白的表达;最后筛选小鼠肺cDNA文库并对筛选得到的阳性克隆进行回转验证,对回转验证结果为阳性的文库克隆质粒送检测序,分析克隆序列。结果 酵母双杂交筛选小鼠肺cDNA文库得到4个与Clathrin相互作用蛋白,分别是：腺苷酸环化酶关联蛋白1,细丝蛋白α,DAP凋亡诱导蛋白激酶2和G蛋白耦联受体激酶6。结论 Clathrin参与细胞极性调节、炎症损伤和细胞凋亡等过程。     

ABCB1基因C3435T多态性与癫痫耐药关系的Meta分析

目的 运用Meta分析的方法综合评价ATP结合盒B亚家族成员1转运蛋白基因(ABCB1)C3435T多态性与癫痫耐药的相关性. 方法 制定原始文献的纳入和排除标准及检索策略,检索中外文数据库,收集有关ABCB1 C3435T多态性与抗癫痫药物(AEDs)治疗反应相关性的研究报告,采用等位基因型(C vs T)以及共显性模型(CC vs TT,CT vs TT)、显性模型(CC+CT vs TT)和隐性模型(CC vs CT+TT)等基因遗传模型进行对比与定量综合分析,同时按人种所属地域(亚裔人与白种人)进行亚组分析. 结果 共23篇文献纳入Meta分析,包括3704例癫痫耐药患者和4160例治疗有效患者,入选文献无发表偏倚.统计分析显示:C3435T位点多态性与癫痫耐药无统计学关联;等位基因C与T相比,随机效应模型:OR=1.05,95％ CI:0.94～1.18,P=0.390.各基因型对比以及进行亚组分析后也未发现统计学关联. 结论 ABCB1 C3435T多态性与癫痫耐药无关联.     

近端胃癌患者根治性切除术后三种消化道重建方式的对比研究

目的比较胃底贲门癌患者根治性胃切除术后不同消化道重建术式的反流性食管炎发生情况及生活质量。方法前瞻性人组2010年2月至2011年8月间河南省肿瘤医院收治的、拟行根治性胃切除的123例胃底贲门癌患者,按照随机数字表法分为3组,每组41例,在根治性胃切除术后分别行空肠间置吻合术、食管残胃后壁吻合术及食管空肠Roux-en-Y吻合术。分别于术前和术后1月行胃排空试验和食管下段pH值测定以评估患者食管反流情况．追踪肝肾功能及血常规变化情况：于术前和术后12月评估患者肝肾功能及生活质量。结果3组患者手术前、后血常规和肝肾功能指标的变化均无统计学意义（均P〉0．05）。术后空肠间置吻合组、食管残胃后壁吻合组和食管空肠Roux—en—Y吻合组分别有1例（2．4％）、10例（24．4％）和7例（17．1％）患者出现反流性食管炎症状,差异具有统计学意义（P=0．017）;分别有1例（2．4％）、7例（17．1％）和8例（19．5％）患者于上消化道钡餐造影检查时发现钡剂反流入食管,差异有统计学意义（P=0．046）;食管下段pH值分别为6．9±0．2、6.8±0．1和6．9±0．1,差异无统计学意义（P=0．196）。术后1年,3组患者在整体健康状况、躯体功能、情绪功能、疲劳、恶心呕吐、疼痛症状、便秘及腹泻方面的生活质量评分明显优于术前（均P〈0．05）;空肠间置吻合组患者在整体健康状况、情绪功能、恶心呕吐、便秘及腹泻方面的生活质量评分显著优于其他两组（均P〈0．05）。结论近端胃癌患者根治性胃切除术后采用空肠间置吻合术、食管残胃后壁吻合术及食管空肠Roux—en—Y吻合术均能够满足消化道重建的需要,能够有效地改善患者的生活质量;其中空肠间置吻合重建术在减少反流性食管炎的发生和提高患者生活质量方面的效果更为显著,是比较理想的近端胃癌根治术后消化道重建术式。     

基于指纹图谱结合化学计量法评价丹参微波提取与传统提取法的差异性

目的采用UPLC建立丹参微波提取法与传统提取法的指纹图谱并鉴定主要色谱峰,结合化学计量学方法比较不同提取方法化学成分的特征差异。方法采用超高效液相色谱,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,体积流量为0.3 mL/min,检测波长为270 nm,建立丹参传统提取法与微波提取法的指纹图谱;对8个指标性成分进行含量测定,采用SPSS 22.0软件进行主成分分析和t检验分析,从而进一步评价丹参微波提取与传统提取法之间的差异性。结果传统提取法与微波提取法分别标定16个共有峰和17个共有峰,且8个指标性成分的含量具有差异性。在相似度评价中,对丹参不同提取法的指纹图谱进行对比,相似度均0.945。指标性成分的含量上,微波提取法中指标性成分的综合质量分数均高于传统提取法,8个指标成分的均值表明微波提取法高于传统提取法,与传统提取法比,丹参素钠、原儿茶醛、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、隐丹参酮、丹参酮IIA的含量具有显著性差异(P0.05,0.01)。结论通过对指纹图谱的比较,以及化学计量学方法评价,丹参不同提取法下的整体化学组分类似,通过t检验分析化学成分的含量具有一定差异,且丹参微波提取法的含量高于传统提取法。微波提取法相较于传统提取法具有一定的优势,此方法的建立可以为微波提取法在中药领域的广泛应用奠定基础。     

标准卒中救治流程缩短介入治疗再通时间

目的　分析长海医院标准卒中救治流程对大血管闭塞急性缺血性脑卒中（AIS）介入治疗再通时间的影响。方法　回顾性连续选择2013年9月至2019年12月我院脑血管病中心收治的行血管内治疗的大血管闭塞AIS患者876例,排除病例资料不全者66例,最终纳入810例。按照是否实验施标准卒中救治流程（2018年6月22日）将患者分为研究组（采用标准卒中救治流程,335例）和对照组（未采用标准卒中救治流程,475例）。比较两组患者的入院至进针时间（DNT）、入院至股动脉穿刺时间（DPT）、股动脉穿刺至血管成功再通时间（PRT）,以及血管成功再通[改良脑梗死溶栓（mTICI）分级为2b/3级]率、术后90 d预后良好[改良Rankin量表（mRS）评分为0～2分]率。结果　两组患者性别、年龄及入院时美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分差异均无统计学意义（P均>0.05）。研究组采用静脉溶栓+血管内治疗的患者占比低于对照组［14.3%（48/335）vs 31.2%（148/475）P<0.01］。在行静脉溶栓+血管内治疗的患者中,研究组DNT、DPT、PRT均短于对照组［34.2（28.1,60.4）min vs 53.5（27.0,72.2）min、76.5（55.9,106.4）min vs 97.0（68.9,151.1）min、45.0（37.3,90.4）min vs 78.0（55.4,109.3）min］,差异均有统计学意义（P均<0.01）;研究组的预后良好率、血管成功再通率［分别为66.7%（32/48）、91.8%（44/48）］与对照组［分别为57.4%（85/148）、93.2%（138/148）］相比差异均无统计学意义（P均>0.05）。在直接行血管内治疗的患者中,研究组DPT、PRT也均短于对照组［67.0（50.1,109.0）min vs 87.0（60.8,150.0）min、48.0（43.5,80.8）min vs 74.0（60.3,100.6）min］,差异均有统计学意义（P均<0.01）;研究组的预后良好率、血管成功再通率［分别为54.7%（157/287）、93.0%（267/287）］与对照组［分别为52.3%（171/327）、91.1%（298/328）］相比差异均无统计学意义（P均>0.05）。结论　我院的标准卒中救治流程能显著缩短DNT、DPT和PRT时间,缩短介入治疗再通时间。但血管再通率与良好预后率未显示明显提高。     

以病例为导向的客观结构化临床考试在卒中急救护士培训中的应用

目的 探讨以病例为导向的客观结构化临床考试(OSCE)在卒中急救护士培训考核中的应用效果.方法 2018年6月至2019年6月,选择我院符合卒中急救护士岗位要求的71名护士作为研究对象.应用以病例为基础、以脑卒中急救过程为主线、以卒中急救护士急诊室岗位能力要求为本位的OSCE对卒中急救护士的急性缺血性脑卒中急诊绿色通道能力进行考核,考核共设6个站点,考核内容分别为预检初判评估、护理技术操作、患者从急诊预检台至CT室的转运、CT和多模态CT检查前后护士与影像科技师的配合、静脉溶栓药物的使用情况、静脉溶栓过程中对患者的病情观察与宣教.考试结束后计算各站点得分率和考试的难度系数、区分度系数,并通过调查问卷了解考生对本次考核的反馈.结果 71名卒中急救护士的考试成绩为78.6～95.8分,平均考试成绩为(82.9±3.2)分.考试的难度系数为0.17,区分度系数为0.36.6个站点的平均得分率为86.1％,其中第2站点的得分率最高(92.2％),第5站点的得分率最低(74.3％).大部分考生认为这种考试模式符合临床实际(97.2％,69/71),能够反映急性缺血性脑卒中急救思维能力(95.8％,68/71)和综合急救护理能力(95.8％,68/71),且应进行临床推广(98.6％,70/71).结论 以病例为导向的OSCE模式能客观地反映卒中急救护士的急性缺血性脑卒中综合急救能力,并得到了考生认可.     

超时间窗取栓研究的现状分析

机械取栓术治疗急性大血管闭塞性缺血性脑卒中（LVO-AIS ）的主要方式,研究证实机械取栓的明确时间窗为发病内6h,然而对于发病6-24h或超过24h接受机械取栓的患者筛选仍存争议,本研究旨在探讨超时间窗机械取栓的安全性和有效性评估。     

便携式体外生命支持系统在失血性休克猪模型中应用

目的探讨便携式体外生命支持系统在失血性休克救治中的有效性与安全性。方法以小型巴马猪为实验对象,体质量(46.0±5.2)kg,共12只,雄性,建立失血性休克模型,肝素化后转流,应用低温脏器保护液逐步降温至15℃并停止循环。将动物随机分为两组:A组停循环时间为90 min;B组停循环时间为120 min,每组各6只。分别记录操作前后心率、平均动脉压、呼吸、体温、末梢氧饱和度及神经系统评分等。结果 A组死亡0只,存活6只(100%);B组死亡3只,存活3只(50%);两组存活率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。术后1 d神经系统评分,A组明显高于B组(P<0.05);两组术后7 d比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论在失血性休克动物模型救治中,便携式体外生命支持系统可诱导深低温(15℃)水平停循环90 min,保证实验动物存活及神经系统功能正常,安全有效。     

天麻灵芝颗粒的质量标准研究

目的:建立天麻灵芝颗粒的质量标准。方法:采用TLC法对处方中天麻、淫羊藿、灵芝进行定性鉴别;采用HPLC法测定天麻素和淫羊藿苷的含量。结果:薄层色谱上样品与对照品显相同的斑点,分离效果好,阴性对照无干扰;天麻素在0.0502μg~0.3012μg、淫羊藿苷在8.4480μg~84.4800μg与峰面积具有良好的线性关系;平均回收率分别为99.85%和99.78%,RSD分别为0.33%和0.90%(N=9)。结论:该方法简单、可靠、准确,可以作为控制天麻灵芝颗粒的质量标准。     

烟雾病和动脉粥样硬化烟雾综合征成年患者的HR-MRI管壁成像特征比较

目的 回顾性分析烟雾病(MMD)和动脉粥样硬化烟雾综合征(AS-MMS)成年患者大脑中动脉(MCA)高分辨率磁共振(HR-MRI)管壁成像,探讨HR-MRI在MMD诊断中的价值.方法 选取第二军医大学长海医院临床确诊的MMD和AS-MMS成年患者各24例,对比分析两组患者的年龄及危险因素(发病形式、糖尿病、高血脂、高血压、既往卒中史).采用3.0T HR-MRI对各组患者大脑中动脉(MCA)行管壁增强扫描.分析两组患者MCA的血管内径和外径、管壁厚度、管壁信号强度、增强效应和MCA附近微小血管结构及重构指数等特征.采用ROC曲线分析MCA外径对MMD和AS-MMS的鉴别诊断价值.结果 MMD组和AS-MMS组患者的年龄及危险因素差异均有统计学意义(P＜0.05).MMD组患者的MCA外径较AS-MMS组减小[(2.70±0.44) mm vs (3.31±0.54) mm,P＜0.05],MCA管壁厚度增厚[(1.99±0.32) mm vs(1.39±0.57) mm,P＜0.05].AS-MMS组患者发生MCA管壁局灶性信号增强现象较MMD组更常见(50.00％ vs 33.33％,P＜0.05).与AS-MMS组比较,MMD组患者MCA多为阴性重构(79.17％ vs 25.00％,P＜0.05),平均重构指数降低(0.86±0.12 vs 1.05±0.21,P＜0.05),且MCA附近微小血管结构发生率升高(83.33％ vs 24.17％,P＜0.05).ROC曲线显示以3.13 mm为MCA外径界限值时,鉴别诊断MMD和AS-MMS的敏感度为90.7％,特异度为64.0％.结论 HR-MRI对MMD和AS-MMS的鉴别有重要意义.MMD的MCA管壁皱缩,多呈阴性重构,血管外径常＜3.13 mm,呈同心圆增厚,增强无强化或呈同心圆强化,且MCA附近更常见微小血管结构.