HPLC法测定人参三七颗粒中人参皂苷Rg1、Re、Rb1和三七皂苷R1的含量

摘 要 目的: 建立同时测定人参三七颗粒中人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁和三七皂苷R₁含量的方法。方法: 采用HPLC法,色谱柱为Sunfire C₁₈（150 mm×4.6 mm,5 μm）分析柱,流动相以乙腈-水梯度洗脱;检测波长为203 nm;柱温30℃;流速1.0 ml·min^-1。结果:人参皂苷Rg₁,Re,Rb₁和三七皂苷R₁之间有较好的分离度,4种成分在线性范围内与峰面积之间线性关系良好,人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁和三七皂苷R₁加样回收率分别为99.83%,97.84%,98.43%,97.34%,RSD分别为2.08%,1.66%,1.73%和1.42%（n=5）。结论:本方法可同时测定人参三七颗粒中的人参皂苷Rg₁,Re,Rb₁和三七皂苷R₁含量。     

HPLC-MS/MS测定同济2号颗粒剂中黄芪甲苷、绿原酸、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1

目的 建立HPLC-MS/MS同时测定同济2号颗粒中5个主要活性成分黄芪甲苷、绿原酸、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁及三七皂苷R₁的方法。方法 以水(0.1%甲酸)-乙腈(0.1%甲酸)为流动相,梯度洗脱,体积流量为0.4 mL/min。YMC-Pack Pro C₈色谱柱分离,采用电喷雾离子源(ESI源),负离子模式,以选择性离子监测模式(SIM)进行测定。监测离子分别是m/z 829(黄芪甲苷)、m/z 353(绿原酸)、m/z 845(人参皂苷Rg₁)、m/z 1 108(人参皂苷Rb₁)、m/z 932(三七皂苷R₁)。结果 黄芪甲苷、绿原酸、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁和三七皂苷R₁分别在0.075～2.4、0.95～30.3、1.71～54.72、1.12～35.92、0.45～14.28 μg/mL与峰面积呈良好线性关系。结论 该方法专属性好,灵敏度高,准确快捷,适用于同济2号颗粒的快速检测,为该药的质量标准提供依据。     

HPLC-ELSD同时测定跌打丸中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量

目的 建立同时测定跌打丸中三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁和人参皂苷Rb1含量的HPLC-ELSD检测方法。方法 采用Phenomenex Kinetex C₁₈色谱柱(100 mm×4.6 mm,2.6 μm),柱温30 ℃,流速0.5 mL·min^-1,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,ELSD检测器,漂移管温度110 ℃,载气(空气)体积流量3.0 L·min^-1。结果 三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb1分别在0.158~3.16 μg(r=0.999 8),0.407~8.14 μg(r=0.999 5),0.446~8.92 μg(r=0.999 9)内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为97.55%(RSD=1.04%),98.09%(RSD=1.03%),97.34%(RSD=0.81%)。结论 该方法简便、快速、准确,可用于跌打丸的质量控制。     

HPLC法同时测定舒血灵胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷RG1及人参皂苷Rb1的含量

摘 要 目的： 建立舒血灵胶囊中三七皂苷R₁、人参皂苷RG₁及人参皂苷Rb₁的含量测定方法。方法: 采用Hypersil ODS-2 C₁₈（250 mm×4.6 mm, 5 μm）色谱柱;以乙腈(A)-水(B)为流动相进行梯度洗脱,流动相梯度为：0～8 min,20%A→20%A,8～40 min,20%A→30%A,40～60 min,30%A→45%A;流速：1.0 ml·min^-1;柱温：25℃;检测波长：203 nm;进样量：20 μl。结果: 三七皂苷R₁在浓度0.05～0.50 mg·ml^-1范围内,人参皂苷RG₁和Rb₁在浓度0.20～2.00 mg·ml^-1范围内,与峰面积呈较好的线性关系（r=0.999 9）;三种成分的平均加样回收率分别为98.79%、98.42%、98.89%,RSD分别为0.85%、0.97%、0.74%（n=6）;日内精密度分别为0.49%、0.20%和0.39%;日间精密度分别为0.75%、0.56%和0.51%;稳定性、重复性试验的RSD<1%。结论:本试验建立的测定方法简便、准确性高、重复性好,可用于该制剂的含量测定。     

HPLC梯度法测定复方三七维康胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、Rg1的含量

摘 要 目的:建立HPLC梯度法同时测定复方三七维康胶囊中三七皂苷R₁、人参皂苷R_b1、R_g13种皂苷的含量。方法: 色谱柱：大连Spherisorb C¹⁸分析柱(200 mm×4.6 mm,5 μm);流动相：乙腈-水,梯度洗脱;流速:1.0 ml·min^-1;检测波长 203 nm。结果:三七皂苷R₁、人参皂苷R_g1和R_b1分别在1.06～18.55 μg（r=0.997 3）、2.02～35.35 μg（r=0.998 2）和2.02～35.35 μg（r=0.998 2）之间线性关系良好。平均回收率三七皂苷R₁为100.8%（RSD=1.53%,n=5）,人参皂苷 R_g1为98.9%（RSD=1.87%,n=5）,人参皂苷R_b1为99.7%（RSD=1.90%,n=5）。结论:HPLC梯度洗脱法能够将多种皂苷很好地分离检测,该方法准确可靠,重复性好,可用于控制其质量。     

活骨丸质量标准研究

目的 对活骨丸进行质量标准研究。方法 采用薄层色谱法,对制剂中丹参、地黄、当归、川芎、三七、土鳖虫、制草乌进行专属性鉴别;采用高效液相色谱（HPLC）法对处方三七有效成分人参皂苷Rg₁、Rb₁和三七皂苷R₁进行含量测定。以乙腈和水按不同比例混合后进行梯度洗脱,流速每为1.0 ml/min;柱温30℃;检测波长为203 nm;进样量为10 μl。结果 丹参、地黄、当归、川芎、三七、土鳖虫、制草乌等的薄层图谱特征斑点清晰,分离度好,阴性对照无干扰。三七皂苷R₁、人参皂苷Rb₁和Rg₁分别在39.92~399.2、84.28~842.8 μg/ml和135.86~1 358.6 μg/ml范围内有良好的线性关系;三七皂苷R₁、人参皂苷Rb₁和人参皂苷Rg₁的平均回收率分别为102.35%、103.84%、102.97%,RSD均小于2.0%。结论 所建立的质量标准准确、重复性良好,可用于活骨丸的质量控制。     

三七皂苷中人参皂苷Rg1与Rb1口服吸收及其体内药代动力学的研究和比较

分别考察三七总皂苷(PNS)在大鼠灌胃和静脉给药后的人参皂苷Rg₁(Rg₁)、人参皂苷Rb₁(Rb₁)的胆汁排泄；采用平衡透析法测定药物的血浆蛋白结合率；并结合药代动力学的实验结果，研究和比较Rg₁与Rb₁的口服吸收及其体内药代动力学性质。结果表明，静脉给药后10 h，Rg₁及Rb₁胆汁排泄累积量分别为给药剂量的(61.48±18.30)%和(3.94±1.49)%；灌胃给药后12 h，Rg₁及Rb₁胆汁排泄累积量分别为给药剂量的(0.91±0.51)%和(0.055±0.02)%。Rg₁及Rb₁的血浆蛋白结合率分别为6.56%～12.74%和80.11%～89.69%。Rg₁的胃、肠和肝的通过率(F_S，F_I和F_H)分别为49.85%，13.05%和50.56%；Rb₁分别为25.82%，4.18%和65.77%。因此，肠壁吸收差是Rg₁和Rb₁生物利用度低的主要原因。Rg₁具有较高的胆汁排泄和较低的血浆蛋白结合率，Rb₁的胆汁排泄较低，而血浆蛋白结合率较高。Rb₁的肠黏膜透过性和体内消除速度都低于Rg₁，但前者的平均滞留时间(MRT)和血药浓度曲线下面积(AUC)均大于后者。     

HPLC法同时测定复方丹参滴丸中7个活性成分的含量

摘 要 目的:建立同时分析测定复方丹参滴丸中7种活性成分（丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸B、三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1）的方法。方法: 色谱柱为安捷伦Poroshell 120 SB-C¹⁸(100 mm×3.0 mm,2.7 μm),以乙腈为流动相A,0.05%-磷酸溶液为流动相B,梯度洗脱,流速：1.0 ml·min^-1;检测波长分别为280,210 nm。结果:丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸B、三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的线性范围分别为0.020～0.408μg（r=0.999 9）,0.020～0.401 μg（r=0.999 8）,0.021～0.415 μg（r=0.999 9）,0.004～0.080 μg（r=0.999 9）,0.004～0.080μg（r=0.999 9）,0.004～0.080 μg（r=.999 9）,0.004～0.080μg（r=0.999 8）;平均加样回收率97.1%～102.4%,RSD＜1.7%(n=9)。结论:该方法操作简单,重复性好,为评价和监控复方丹参滴丸的质量提供可靠的方法。     

HPLC同时测定藤珠胃康颗粒中4个皂苷类成分

目的 建立HPLC同时测定藤珠胃康颗粒中4个皂苷类成分（人参皂苷Re、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Ro和竹节参皂苷Ⅳa）的方法。方法 采用Hypersil GOLD C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-0.2 %磷酸水溶液,梯度洗脱（-5~0 min,19%乙腈;0~14 min,19%→26%乙腈;14~22 min,26%→29%乙腈;22~30 min,29%乙腈;30~40 min,29%→35%乙腈;40~55 min,35%乙腈）,体积流量1.0 mL·min^-1,检测波长203 nm,柱温30 ℃。结果 人参皂苷Re在0.080 4~1.608 μg（r=1）,人参皂苷Rb₁在0.108 8~2.176 μg（r=0.999 9）,人参皂苷Ro在0.288 8~5.776 μg（r=0.999 9）,竹节参皂苷Ⅳa在0.176 0~3.520 μg（r=0.999 9）内线性关系良好;平均回收率（n=6）分别为99.41%,101.92%,99.76%,100.31%,RSD值分别为2.22%,2.07%,0.33%,0.64%。结论 本实验所建立的方法简单,专属性强,重复性好,可用于藤珠胃康颗粒中人参皂苷Re、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Ro和竹节参皂苷Ⅳa的测定。     

基于近红外光谱分析技术的注射用益气复脉(冻干)红参醇提过程在线监测

目的 利用近红外光谱分析技术建立注射用益气复脉（冻干）主要原料红参醇提过程中3种单体皂苷——人参皂苷Rg₁、Re和Rb₁的定量模型,实现提取过程中关键指标的快速检测。方法 在线采集红参醇提过程的近红外光谱,以超高效液相色谱（UPLC）法测定提取过程药液中人参皂苷Rg₁、Re和Rb₁的量为参考值,采用偏最小二乘法建立光谱与测定值之间的定量校正模型,进而对提取过程进行在线分析。结果 人参皂苷Rg₁和Re的建模波段均为9 403.7～7 498.3 cm^-1和6 102～5 446.3 cm^-1组合波段;人参皂苷Rb₁的建模波段为5 774.1～5 446.3 cm^-1。人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁定量模型的交叉验证决定系数（R²）分别为99.40、99.44、99.41,交叉验证均方根误差分别为5.18、2.77、11.00。结论 所建立的3种单体皂苷定量模型预测性能良好,能够有效测定红参醇提过程中人参皂苷Rg₁、Re和Rb₁的量。     

高效液相色谱-光化学衍生法测定湖南产莲子中黄曲霉毒素G1、G2、B1、B2

目的对不同来源的湖南产莲子中黄曲霉毒素G_1、G_2、B_2、B_1进行高效液相色谱-光化学衍生法测定。方法采用高效液相色谱–光化学衍生法,采用岛津GL Inertsil ODS-3色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇–乙腈–水(35∶13∶52),柱温35℃;光化学衍生器(254 nm)激发波长λ_(ex)=360 nm,发射波长λ_(ex)=450 nm。结果黄曲霉毒素G_1、G_2、B_2、B_1分别在6.7～33.3、11.4～56.8、10.3～51.5、4.1～20.3 pg线性关系良好;平均回收率分别为98.07%、97.72%、96.11%、99.52%,RSD值分别为1.69%、1.40%、2.72%、1.34%(n=6)。9批莲子样品中,有6批未检出黄曲霉毒素,来自于农贸市场农户自存的2批次检出黄曲霉毒素B_1,实验室塑料袋包装储存1年的1批检出黄曲霉毒素B_1、B_2,但质量分数均低于法定标准限量。结论不同来源湖南产莲子中黄曲霉毒素质量分数均低于《中国药典》2020年版规定限量。该法测定结果准确、重复性良好,可为完善莲子安全性控制和质量标准提升提供实验依据。     

高效液相色谱-荧光检测法测定沉香中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2

目的建立高效液相色谱–光化学衍生–荧光检测法测定沉香药材中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2。方法采用高效液相色谱法,通过免疫亲和柱提取和净化,荧光检测器检测。Agilent Zorbax Ecilpse Plus C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇–水(45∶55);体积流量:0.8 m L/min;柱温:30℃;进样盘温度:4℃;荧光激发波长为360 nm,发射波长为450 nm。结果黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2分别在9.3~74.4、3.0~24.0、9.3~74.4、3.5~28.0 pg线性关系良好,r均大于0.998 0;检测限分别为1.86、0.60、1.86、0.70 pg,定量限分别为7.44、2.40、7.44、2.80 pg。平均回收率分别为78%、92%、82%、99%,RSD值分别为4.4%、3.0%、4.3%、2.8%。结论所建立的方法结果准确、重复性、稳定性均良好,可用于沉香药材中黄曲霉毒素的质量控制。     

Aflatoxin B1 and fumonisin B1 affect the oxidative status of bovine peripheral blood mononuclear cells

Mycotoxins are secondary metabolites having a high cytotoxic potential. They are produced by molds and released in food and feed. To date, the mechanisms underlying the mycotoxin-induced cytotoxicity have not been fully clarified. The induction of oxidative stress, as a possible mechanism, has been postulated. This in vitro study was focused on the effect of two widely occurring mycotoxins, aflatoxin B₁ (AFB₁) and fumonisin B₁ (FB₁), on the oxidative status of bovine peripheral blood mononuclear cells (PBMC) incubated for 2 and 7 days at different levels of AFB₁ (0, 5 and 20 μg/ml) and FB₁ (0, 35 and 70 μg/ml). Reactive oxygen metabolites (ROM), intracellular thiols (SH), malondialdehyde (MDA) and gene expression of cytoplasmic superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GSHPX-1) were measured on PBMC after incubation. The highest concentration of AFB₁ and all concentrations of FB₁ caused an increase (p < 0.05) of intracellular ROM without any time dependent effect. Intracellular SH decreased with 20 μgAFB₁/ml (p < 0.05) and the effect was particularly marked after 7 days of exposure. Intracellular SH were not affected by FB₁ even though a lower (p < 0.05) SH level after 2 days exposure than after 7 days was observed. MDA increased (p < 0.05) in AFB₁ or FB₁ treated PBMC. The exposure to FB₁ for 7 days increased MDA (p < 0.05) only in cells treated with 70 μg/ml. Exposure of PBMC to AFB₁ reduced SOD mRNA while FB₁ decreased both SOD and GSHPX-1 mRNA abundance. These results demonstrate that, even though by different mechanisms, AFB₁ and FB₁ may induce cytotoxicity through an impairment of the oxidative status of PBMC.     

HPLC法测定复方吡拉西坦脑蛋白水解物片中维生素B1、B2和B6含量

摘 要 目的:建立HPLC法测定复方吡拉西坦脑蛋白水解物片中维生素B₁、维生素B₂和维生素B₆含量的方法。方法: 采用Insteril ODS-3色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相：0.01 mol·L^-1庚烷磺酸钠（含0.25%三乙胺,用冰醋酸调节pH至3.8)-甲醇（75∶25）,柱温30℃,检测波长为280 nm,流速：1.0 ml·min^-1。结果: 维生素B₁、维生素B₂、维生素B₆分别在3.98～99.40 μg·ml^-1（r=0.999 7）、4.08～101.91μg·ml^-1（r=0.999 9）、2.08～52.00 μg·ml^-1（r=0.999 9）范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.18%、99.53%、99.27%,RSD分别为0.60%、0.67%、0.71%(n=9)。结论:本法简便、快速、准确,可用于复方吡拉西坦脑蛋白水解物片中维生素B₁、维生素B₂和维生素B₆的含量测定     

红参中总皂苷及人参皂苷Rg1、Re、Rb1

目的测定不同产地的26批红参药材中总皂苷及人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁的含量。方法采用紫外可见分光光度法测定红参中总皂苷的含量,高效液相色谱法测定红参中人参皂苷Rg 1、Re、Rb 1的含量。结果26批红参药材中总皂苷含量为1.2%~3.0%,人参皂苷Rg₁、Re含量之和为0.17%~0.61%,人参皂苷Rb₁含量为0.21%~0.81%。结论不同产地的红参药材总皂苷及人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁的含量存在差异,提示应进一步规范红参药材的种植、加工炮制及标准的建立。     

大孔吸附树脂富集参血胶囊中人参皂苷Rb1的工艺研究

目的 研究大孔吸附树脂富集参血胶囊中人参皂苷Rb₁的工艺条件。方法 采用HP1100高效液相色谱仪ZORBAX SB-C₁₈柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),紫外检测波长：203 nm,流动相：乙腈-水(30∶70)对人参皂苷Rb₁进行测定。以树脂的比吸附量、比洗脱量及人参皂苷Rb₁含量为指标,对树脂类型进行筛选,同时进行洗涤溶剂的选择,及应用L₉(3⁴)正交实验进行洗脱条件的研究,从而确定大孔吸附树脂纯化工艺参数。结果 人参皂苷Rb₁在0.752~9.4 μg内呈现良好的线性关系,确定洗涤溶剂为0.5 mol·L^-1 NaOH溶液,最佳洗脱条件：提取液上柱后静置12 h,用15倍60%的乙醇溶液,以流速1.0 mL·min^-1进行洗脱。在此条件下,所得的人参皂苷Rb₁含量较高。结论 该法简便、专属性强,可用于参血胶囊中人参皂苷Rb₁的提取。     

人参皂苷Rg1对移植性白血病模型小鼠的作用

目的 研究人参皂苷Rg₁对移植性白血病模型小鼠的作用。方法 采用免疫磁性分选法（MACS）从K562细胞中分离、纯化CD34⁺CD38^-人白血病干细胞（CD34⁺CD38^- LSCs）,流式细胞术检测分选细胞纯度,台盼蓝染色测定分选细胞活性。将6～8周雌性NOD/SCID小鼠27只随机分为对照组、模型组、人参皂苷Rg₁（200 mg/kg）组,每组9只,模型组和人参皂苷Rg₁组通过尾iv移植CD34⁺CD38^- LSCs构建白血病小鼠模型,ip给药30 d。观察各组小鼠一般情况及腹部包块变化;全自动血常规检测仪检测外周血白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板水平;免疫组化法检测肝、脾脏病理学变化;流式细胞仪分析骨髓细胞周期;CCK-8法检测各组骨髓细胞的增殖能力;细胞免疫荧光染色鉴定骨髓细胞CD34阳性表达情况。结果 分选前K562细胞中CD34⁺CD38^- LSCs细胞群百分比为（9.64±1.14）%,分选后CD34⁺CD38^- LSCs纯度可达（96.45±1.63）%;台盼蓝染色显示分选后细胞活性为（95.26±2.16）%。与对照组比较,模型组小鼠腹部包块明显,生存情况较差,体质量显著下降（P<0.05）;白细胞数显著增高,红细胞数、血红蛋白水平、血小板数均显著下降（P<0.05）;肝、脾脏结构被破坏,有大量白细胞浸润;骨髓细胞周期检测显示G₀/G₁期比例显著下降（P<0.05）,S期比例显著升高（P<0.05）;骨髓细胞增殖活力显著升高（P<0.05）。与模型组比较,人参皂苷Rg₁组小鼠腹部包块明显减小,生存情况好转,体质量显著增加（P<0.05）;白细胞总数显著下降（P<0.05）,红细胞数、血红蛋白水平、血小板数均显著升高（P<0.05）;肝、脾脏结构明显恢复;骨髓细胞G₀/G₁期比例显著升高（P<0.05）,G₂/M期和S期比例显著下降（P<0.05）。细胞免疫荧光检测显示,模型组和人参皂苷Rg₁组中小鼠的骨髓细胞中存在大量的人源白血病细胞。结论 NOD/SCID小鼠尾iv移植CD34⁺CD38^- LSCs可成功构建急性髓系白血病小鼠模型,人参皂苷Rg₁能有效缓解NOD/SCID小鼠的白血病症状。     

人参皂苷Rg1 总被引：25，自引：1，他引：25

王毅  刘铁汉  王巍  王本祥 《药学学报》2000,35(4):284-288