蜗牛酶降解壳聚糖制备壳寡糖的研究

目的 研究筛选蜗牛酶降解壳聚糖的最佳反应条件.方法 采用正交试验法,以降解产物中寡糖的量和糖收率为指标,考察温度、酶浓度、pH对蜗牛酶降解壳聚糖的影响,筛选最佳反应条件;采用SDS-PAGE检测降解产物,用改良Schales法测定还原糖的含量并计算寡糖的收率.结果 蜗牛酶降解壳聚糖的最佳反应条件为:pH4、40℃、酶底比为8:100.最佳条件下的寡糖收率为64.74%,产物主要是聚合度为4以上的寡糖.结论 在最佳反应条件下,蜗牛酶能较好地降解壳聚糖.     

一种低分子壳聚糖硫酸酯铝的制备

本文采用正交试验设计方法对壳聚糖进行氧化降解,获得了一种低相对分子质量的水溶性壳聚糖,并在此基础上经硫酸化和盐交换制得了一种低相对分子质量壳聚糖硫酸酯式铝盐,壳聚糖氧化降解实验结果表明降解的最佳条件是温度为80度,过氧化氢浓度为5％,降解时间为1h,在此条件一产品收率可达52．68％,其粘均相对分子质量为3990,对制是的低相对分子质量壳聚糖硫酸酯铝进行了红外光谱分析和部分理化性质测定,经测定定样品中有机硫（S）含量为9．10％,铝（Al)含量为20．58％,样品制酸力为188．59mL.g^-1。     

壳聚糖及其衍生物体外抗幽门螺杆菌作用及影响因素

目的研究壳聚糖及其衍生物在体外对幽门螺杆菌(Hp)的抑菌作用及其影响因素。方法采用打孔法检测了不同浓度、pH值、脱乙酰度壳聚糖及羧甲基壳聚糖在体外对Hp的抑菌作用。结果①壳聚糖和羧甲基壳聚糖在体外对3株Hp标准菌株具有普遍的抑菌作用;②在pH 6~4范围内,随pH值降低,抗菌作用增强,差异有显著性(P<0.01),最佳pH值为4;③70%、88.5%脱乙酰度壳聚糖及羧甲基壳聚糖的抗Hp作用差异有显著性(P<0.01~0.05),抑菌强度依次为DD70壳聚糖、DD88.5壳聚糖和羧甲基壳聚糖;④在质量浓度为10 g.L-1~50 g.L-1范围内羧甲基壳聚糖抗Hp作用差异无显著性;在质量浓度为5 g.L-1~20 g.L-1范围内70%、88.5%脱乙酰度壳聚糖抗Hp作用差异也无显著性(P>0.05)。结论①壳聚糖和其衍生物对Hp有普遍的抑菌作用;②壳聚糖及其衍生物的抗Hp作用受多种因素影响,其中pH值对壳聚糖抗菌作用的影响最为明显,在pH值6~4范围内,壳聚糖的抗菌活性随着pH值的下降而增强;③壳聚糖的脱乙酰度、结构(化学修饰)及分子量也影响壳聚糖的抗菌活性,不同的细菌所要求的脱乙酰度、修饰基团和分子量有着明显的差异。     

鼻用氟脲嘧啶壳聚糖微球的体外释放及溶胀影响因素

目的考察壳聚糖脱乙酰度、壳聚糖浓度、固化剂用量、固化时间以及介质pH值对氟脲嘧啶壳聚糖微球的体外释放与溶胀的影响。方法乳化化学交联法制备氟脲嘧啶鼻用微球,动态透析法检测微球的体外释放特性;根据微球吸水前后质量变化测定微球的溶胀率。结果壳聚糖的脱乙酰度越高、固化剂用量越大、固化时间越长则微球的溶胀越慢,微球的体外释放越慢;壳聚糖浓度的增加则使微球的溶胀度增加,体外释放量减少;释放介质的pH值对微球的溶胀性能影响很大,在酸性条件下微球溶胀度高且释药加快。结论影响壳聚糖微球溶胀的因素顺序为介质的pH值>固化剂用量>固化时间>壳聚糖浓度≈壳聚糖脱乙酰度;影响壳聚糖微球体外释放的因素顺序为固化剂用量>壳聚糖脱乙酰度>壳聚糖浓度,而固化时间和介质的pH值对体外释放无显著性影响。     

壳聚糖固定谷氨酸脱羧酶的研究

以壳聚糖为载体，戊二醛为交联剂。制备固定化谷氨酸脱羧酶(GDC)，研究固定化反应中pH值、戊二醛浓度、给酶量以及交联反应搅拌时间对固定化GDC活力的影响以及GDC固定化酶和自由酶的酶学特性。实验结果表明：壳聚糖固定化GDC的最适pH4．4．最适温度55℃。与自由酶相比。具有较好的热稳定性、贮存稳定性及可操作性；在米胚芽生产制备γ-氮基丁酸中具有实用价值。     

透明质酸酶催化透明质酸水解的最适反应条件

目的确定透明质酸酶(HAase)催化透明质酸(HA)水解的最适条件。方法HAase不同条件下催化HA水解,反应结束后利用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)法测量反应产物的相对分子质量及其分布系数。结果HAase催化HA水解受温度、pH值、酶浓度、底物浓度、反应时间等因素的影响。结论HAase催化HA水解的最适反应条件是底物浓度为10 g/L,酶浓度为150 000 U/L,pH为5.0,反应温度为50℃。     

固态发酵黑曲霉产壳聚糖酶的纯化及其性质研究

目的 研究黑曲霉产壳聚糖酶的纯化及其性质.方法 紫外诱变筛选黑曲霉产壳聚糖酶高产菌株,并分离纯化其固态发酵物的粗提液,研究纯化的壳聚糖酶的酶学性质.结果 固态发酵120 h,干培养基的酶活力可达58.12 U·g~(-1).固态培养基提取液通过丙酮分级沉淀,经交联壳聚糖树脂亲和层析、DEAE-Sepharose FF层析得到了一种胞外壳聚糖酶,分子量为63kD,最适反应温度为55℃,最适反应pH6～7,降解壳聚糖反应的米氏常数K_m为2.933 g·L~(-1),V_(max)为0.028 g·L~(-1)·min~(-1).该酶不能降解片状甲壳素和纤维素,能微弱降解CMC和胶体甲壳素,最适底物为脱乙酰度90%的胶体壳聚糖.结论 紫外诱变的成本低、方法简单,利用黑曲霉高产壳聚糖酶菌株发酵能生产一种新型壳聚糖酶.     

絮凝法生产胰酶

目的研究壳聚糖对胰酶的絮凝效果。方法探讨壳聚糖用量、pH值、温度对壳聚糖絮凝效果的影响,并按欧洲药典标准测定酶活,计算酶活收率。结果壳聚糖的适宜用量为0.045g/g蛋白,絮凝的最适pH值为5-6。蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶的酶活分别为:1307U/g,74.65kU/g,12.9kU/g,酶活收率分别为18.0%.36.6%和7.0%。结论壳聚糖对胰酶有较好的絮凝效果,脂肪酶的酶活和收率较高。     

低分子量壳聚糖的研制

研究了在酸性条件下过氧化氢对壳聚糖的氧化降解反应，讨论了过氧化氢浓度、温度及反应时间对氧化降解反应的影响。结果表明，用过氧化氢使壳聚糖氧化降解是制备药用低分子量壳聚糖的一种简便易行的方法。     

壳聚糖固定化酵母蔗糖酶的研究

用壳聚糖作吸附剂、戊二醛作交联剂,对酵母蔗糖酶进行固定化研究,同时用琼脂糖固定化的蔗糖酶和游离酶与其进行比较。结果表明,壳聚糖固定化蔗糖酶贮藏稳定性、对变性剂以及对温度的耐受性均明显优越,而Km值与琼脂糖固定化酶相当,但比游离酶明显增高,酶的最适pH三者相近。研究表明,壳聚糖固定化酶所需的戊二醛浓度为0.6%,交联时间不低于6 h。固定化蔗糖酶对变性剂(乙醇、脲)的耐受力明显高于游离酶。     

碘化壳聚糖的制备及其抗菌活性的研究

目的制备碘化壳聚糖并对其抗菌活性进行研究。方法成盐法制备碘化壳聚糖,倾注法测定碘化壳聚糖的抗菌活性,并进行急性毒性试验。结果制备出碘化壳聚糖,其对所测的几种菌种均有明显的抗菌作用。结论碘化壳聚糖在杀菌方面具有较好的应用前景。     

以N-三甲基壳聚糖为载体的纳米粒研究进展

N-三甲基壳聚糖（TMC）是壳聚糖的一种季胺盐衍生物,与壳聚糖具有相似的生物学性质,但TMC在中性及弱碱性条件下具有很好的溶解性。TMC作为载药体系其毒性较低、无抗原性且运载药物和基因的效率较高。离子交联法制备纳米粒操作简单,可避免因使用有机溶剂和超声等造成污染与破坏。本文综述TMC为载体的纳米粒研究进展。     

仿穿膜肽型壳聚糖衍生物N-辛基-N-精氨酸壳聚糖的合成和表征

以壳聚糖为母体,在其侧链氨基上引入亲水基精氨酸以及疏水基辛基,合成了一种新型的具有仿穿膜肽结构的壳聚糖衍生物——N-辛基-N-精氨酸壳聚糖(OACS)。同时通过FT-IR、1H NMR、元素分析和精氨酸显色法确证了OACS的化学结构以及其辛基和精氨酸的取代度。荧光光谱法测得系列OACS的临界胶束浓度为0.12～0.27 mg.mL/1;溶解度实验表明其在pH 1～12溶液中均易溶,并可自组装形成淡蓝色略带乳光的胶束溶液;马尔文粒径测定仪显示系列OACS形成的聚合物胶束平均粒径为158.4～224.6 nm,多分散系数为0.038～0.309,ζ电位为+19.16～+30.80 mV;原子力显微镜图谱显示所得胶束粒子分散均匀、大小规则圆整;MTT实验证实所得OACS在50～1 000μmol.L?1内安全性能良好。细胞实验结果表明,随着精氨酸取代度的升高,OACS胶束进入细胞的荧光量也随之增加,与壳聚糖相比,最大增加倍数可达40倍。因此,OACS有望作为一种兼具促吸收和载药功能的新型纳米载体。     

微波辐射快速制备水溶性壳聚糖

目的快速制备水溶性壳聚糖。方法利用微波辐射 ,用过氧化氢作氧化剂 ,非均相降解高分子量壳聚糖。设计了正交试验法 ,得到最优化反应条件。结果最优反应条件为 5 %过氧化氢、5 %壳聚糖 ,微波辐射功率约40 0W ,辐射 3min ,所得水溶性壳聚糖分子量为 1 .1× 1 0 4 D ,收率可达 60 %。结论微波法制备低聚壳聚糖效果理想 ,可进一步扩展到壳聚糖的其它化学修饰     

Ocular application of chitosan

Introduction: A major problem in ocular therapeutics with classical formulations is the maintenance of an effective drug concentration at the site of action for a long period of time. Enhancement of ocular bioavailability with increased dose penetration and longer retention time at desired sites can be achieved by recent formulations. Chitosan stands out with its unique structural advantageous characteristics for different types of formulations like in situ gelling systems, micro- and nanoparticles, inserts, etc.

Areas covered: In this review, the authors focus on ocular therapeutics and the characteristics that make chitosan more acceptable in ocular applications.

Expert opinion: Chitosan seems to be one of the most promising polymeric carriers for both hydrophilic and lipophilic drugs for ocular application.     

异丁基壳聚糖的制备与生物降解性研究

目的研究壳聚糖化学结构的修饰方法及改构后膜的生物降解性能。方法在碱性条件下 ,以溴代异丁烷为卤化剂对壳聚糖进行化学修饰 ,并通过体外观察及体内植入法研究膜的生物降解性能。结果改构后的壳聚糖有良好的水溶性和生物降解性能。结论异丁基的取代有效地破坏了壳聚糖的分子内氢键 ,使异丁基壳聚糖有良好的水溶性 ,且产物的生物降解性能远优于壳聚糖     

Synthesis and <Emphasis Type="BoldItalic">in Vitro</Emphasis> Evaluation of a Novel Chitosan–Glutathione Conjugate

Purpose It was the aim of this study to synthesize and characterize a novel chitosan–glutathione (GSH) conjugate providing improved mucoadhesive and permeation-enhancing properties.Methods Mediated by carbodiimide and N-hydroxysuccinimide, glutathione was covalently attached to chitosan via the formation of an amide bond. The adhesive properties of chitosan–GSH conjugate were evaluated in vitro on freshly excised porcine mucosa via tensile studies and the rotating cylinder method. The cohesive properties and stability of the resulting conjugate were evaluated by disintegration test and by oxidation experiments, respectively. The permeation-enhancing effect of the chitosan–GSH/GSH system was evaluated in Ussing chambers by using rhodamine 123 as model compound.Results The obtained conjugate displayed 265.5 μmol immobilized free thiol groups and 397.9 μmol disulfide bonds per gram polymer. Because of the formation of disulfide bonds within the polymer, the stability of matrix tablets could be strongly improved. In tensile studies, the total work of adhesion of the conjugate was determined to be 9.9-fold increased in comparison to unmodified chitosan. Results from the rotating cylinder method showed more than 55-fold increase in the adhesion time of thiolated chitosan vs. unmodified chitosan. In addition, the conjugate in combination with GSH displayed a 4.9-fold higher permeation-enhancing effect compared with unmodified chitosan.Conclusions Because of the improved mucoadhesive and cohesive properties, and the strong permeation-enhancing effect of the chitosan–GSH conjugate/GSH system, the novel thiolated chitosan seems to represent a promising multifunctional excipient for various drug delivery systems.     

壳聚糖和羧甲基壳聚糖纳米银复合物的抑菌作用

目的研究自制的壳聚糖和羧甲基壳聚糖纳米银复合物对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和大肠埃希菌的抑制作用。方法采用纸片琼脂扩散法及试管液体培养基稀释法进行试验。结果壳聚糖纳米银复合物对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的抑菌效果均明显优于壳聚糖、AgNO3及壳聚糖银。羧甲基壳聚糖纳米银复合物抑菌效果稍低于AgNO3和羧甲基壳聚糖银。结论壳聚糖和羧甲基壳聚糖纳米银复合物对这三种常见致病细菌均有抑制作用。     

不同取代度的羟丙基壳聚糖生物降解性研究

目的：研究不同取代度的羟丙基壳聚糖膜的生物相容性及其取代度对生物降解性的影响。方法：通过体外降解及动物体内实验研究其降解性和生物相容性。结果：不同取代度的羟丙基壳聚糖均具有较好的生物相容性；随着取代度的增加，羟丙基壳聚糖膜的降解速度加快；并且溶茵酶对羟丙基壳聚糖膜的生物降解性有促进作用。结论：羟丙基壳聚糖膜具有良好的生物相容性。通过控制取代度，可以得到不同要求的羟丙基壳聚糖。     

甲壳胺胶囊质量控制的探讨

甲壳胺具有一定的抗菌作用,抗肿瘤和降脂、降胆固醇作用,已成为国内外医药界关注的热点之一。目前国内尚无口服制剂质量标准的报道,作者依据有关文献并通过实验研究,制定了口服用甲壳胺胶囊制剂的质量标准。该标准较全面的规范了甲壳胺胶囊鉴别、检查及含量测定的规格和测定方法。