絮凝剂在制药发酵液预处理过程中的应用研究

根据制药发酵液的特点,进行絮凝过滤试验,研究了有机高分子絮凝剂对制药发酵液预处理的影响。试验结果表明,添加适量适用有机高分子絮凝剂能够改变发酵液的流变特性,改善固液分离效果,提高滤速,改善滤液质量。     

一种高成活率培养大鼠原代心肌细胞的方法

【目的】探讨原代心肌细胞培养的条件和方法。【方法】取新生1～3d的SD大鼠心室肌,O．25％胰蛋自酶-0．02％EDTA消化后,培养于DMEM—F12培养液中,用差速贴壁法和化学抑制法相结合去除非心肌细胞。倒置显微镜下观察形态学变化,透射电镜观察细胞超微结构。【结果】培养的心肌细胞平均存活率（96．33±6．73）％,培养第4天细胞搏动率达（95．3±9.2）％,并出现单层同步搏动,具有典型的心肌细胞形态特征。【结论】本研究的心肌细胞培养方法操作简便,成活率高,是一种较为理想的原代心肌细胞培养方法。     

影响α-淀粉酶分离液澄清度的因素

本文根据凝聚和絮凝原理,研究了无机盐和高分子絮凝剂加入量对枯草杆菌BF 7658α-淀粉酶分离液澄清度的影响。实验结果表明,氯化钙可使α-淀粉酶发酵液的ζ电位降低,分离液的澄清度增加,用氯化钙和磷酸氢二钠来处理发酵液,则其分离液的澄清度较单用氯化钙为大,阴离子型高分子絮凝剂如海藻酸钠加入量对分离液澄清度也有一定影响。实验中还发现,澄清的发酵液在10℃下贮存可保持澄清透明状态。     

L-脯氨酸发酵液的预处理

本文用絮凝技术对L-脯氨酸发酵液进行了预处理,筛选得无机聚凝剂投加量为3.75%,有机絮凝剂量为5ppm,在pH为6.5,40℃下保温20分时絮凝效果最佳,能很好地改善过滤性能,提高发酵液的固液分离效果,并使树脂对L-脯氨酸的重量吸附容量增加40%。通过滤饼的重量比阻和溶液流动电位的测定分析,从理论上进一步证实了所筛选到的絮凝条件的合理性。     

细胞松弛素B和解冻方法对玻璃化冷冻小鼠卵母细胞的影响

 【目的】探讨细胞松弛素B和解冻程序对玻璃微细管法（GMP）玻璃化冷冻小鼠卵母细胞的影响。【方法】以小鼠MII期卵母细胞为模型，研究冷冻前细胞松弛素B预处理、不同解冻程序对小鼠卵母细胞冷冻效果的影响；随后对经GMP玻璃化冷冻的卵母细胞直接进行培养以检测冷冻是否诱发孤雌发育。【结果】与对照组相比．细胞松弛素B预处理的卵母细胞存活率、受精率、卵裂率及囊胚率没有显著差异（89．3％vs91．3％．44．0％vs40．4％，30．0％vs27．7％，4．0％vs6．4％；P〉0．05）；采用连续浓度梯度递减解冻法的受精率明显高于间断浓度梯度递减解冻法（57．4％vs40．4％；P〈0．05），且前者的卵裂率和囊胚发育率也相对较高f40，2％vs27，7％，14．5％vs6．4％；P〉0．05）。冷冻复苏后卵母细胞的孤雌发育率稍高于未经冷冻的卵母细胞（17．1％vs3．2％；P〉0．05）。【结论】细胞松弛素B预处理对MII期小鼠卵母细胞的GMP玻璃化冷冻保存效果没有影响：采用连续浓度梯度递减解冻法能明显提高复苏后卵母细胞的体外发育能力。     

细胞松弛素B和解冻方法对玻璃化冷冻小鼠卵母细胞的影响

【目的】探讨细胞松弛素B和解冻程序对玻璃微细管法（GMP）玻璃化冷冻小鼠卵母细胞的影响。【方法】以小鼠MII期卵母细胞为模型，研究冷冻前细胞松弛素B预处理、不同解冻程序对小鼠卵母细胞冷冻效果的影响；随后对经GMP玻璃化冷冻的卵母细胞直接进行培养以检测冷冻是否诱发孤雌发育。【结果】与对照组相比．细胞松弛素B预处理的卵母细胞存活率、受精率、卵裂率及囊胚率没有显著差异（89．3％vs91．3％．44．0％vs40．4％，30．0％vs27．7％，4．0％vs6．4％；P〉0．05）；采用连续浓度梯度递减解冻法的受精率明显高于间断浓度梯度递减解冻法（57．4％vs40．4％；P〈0．05），且前者的卵裂率和囊胚发育率也相对较高f40，2％vs27，7％，14．5％vs6．4％；P〉0．05）。冷冻复苏后卵母细胞的孤雌发育率稍高于未经冷冻的卵母细胞（17．1％vs3．2％；P〉0．05）。【结论】细胞松弛素B预处理对MII期小鼠卵母细胞的GMP玻璃化冷冻保存效果没有影响：采用连续浓度梯度递减解冻法能明显提高复苏后卵母细胞的体外发育能力。     

高效液相色谱法测定益心片中阿魏酸和丹酚酸B的含量

【目的】建立益心片中阿魏酸和丹酚酸B的含量测定方法。【方法】采用高效液相色谱法(HPLC),样品以100倍甲醇为溶媒,超声30min,在C18柱上以乙腈-磷酸(体积分数为0．05％)水溶液为流动相梯度洗脱,于波长320nm处检测。【结果】阿魏酸在0．02432～0．72960μg线性关系良好,r=0．9999,丹酚酸B在0．4168．12．5040μg线性关系良好,r=0．9999,P平均回收分别为100．95％、99．35％。【结论】本法灵敏准确,简便易行,重现性好。     

糖尿病患者和患有陈旧性心肌梗死的非糖尿病患者的心血管风险研究

【目的】探讨糖尿病患者与非糖尿病的陈旧性心肌梗塞（myocardia linfarction，MI）患者的心血管风险。【方法】对比97例糖尿病患者和65例陈旧性心肌梗死的非糖尿病患者的心血管风险.【结果】糖尿病组心血管性死亡的风险比为1．78％（95％CI，1．72～1．83），非糖尿病的陈旧性MI组风险比为1．81％（95％CI，1．73～2．01），两组风险比无差异（P〉0．05）。两组全因病死率相似，其结果分别是1．33％（95％CI，1．30—1．35）和1．31％（95％CI，1．25～1．34）（P〉0．05）。【结论】心血管风险在30岁以上的糖尿病患者和非糖尿病的陈旧性MI患者中是相似的。     

高效液相色谱法测定不同产地续断药材中木通皂苷D的含量

【目的】考察不同来源续断药材中木通皂苷D的含量,为评价续断药材质量提供参考。【方法】采用反相高效液相色谱法测定续断药材中木通皂苷D的含量,色谱柱KromasilC18柱（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为乙腈-水梯度洗脱,检测波长212nm,流速为1．0ml／min。【结果】在实验条件下木通皂苷D分离效果良好,0．036～3．695μg范围内其线性关系良好（r=0．9999）;平均加样回收率为104．87％,RSD为1．85％。【结论】该方法准确、可靠,为续断药材的质量评价提供研究基础。     

聚（N-异丙基丙烯酰胺-丙烯酸）水凝胶中5-氟尿嘧啶的释药性能研究

【目的】研究聚（N-异丙基丙烯酰胺-丙烯酸）水凝胶作为药物载体的释药性能。【方法】参照文献合成聚（N-异丙基丙烯酰胺-丙烯酸）水凝胶,采用浸泡法包埋5-氟尿嘧啶,紫外可见光谱法观察其在不同条件下药物释放情况。【结果】聚（N-异丙基丙烯酰胺-丙烯酸）水凝胶中5-氟尿嘧啶的载药量12．62％;37℃、pH=7．4条件下释放性能较好,500min累积释放率达到76％。【结论】聚（N-异丙基丙烯酰胺-丙烯酸）水凝胶具有温度和pH值双重敏感性,可作为5-氟尿嘧啶的缓释药用载体。     

气相色谱内标法同时测定土木香中土木香内酯、异土木香内酯的含量

[目的]建立内标法测定土木香药材中土木香内酯、异土木香内酯的含量.[方法]SE-30毛细管柱（30m×0.32mm×0.25μm）;FID检测器温度为260℃;进样口温度240℃程序升温：初始温度50℃,以20℃/min的速率升温至170℃,保持28min,再以25℃/min的速率升温至250℃,保持1 min;以尼泊金丁酯为内标物定量.[结果]土木香内酯与异土木香内酯分离良好,在0.6～4.2mg/ml范围内,呈良好的线性关系（r=0.9999,n=5）.[结论]本法简便、灵敏、专属性强、重复性好,可用于土木香药材的含量测定,控制其质量.     

土槿乙酸衍生物抗真菌活性研究

【目的】对14种土槿乙酸衍生物进行体外抗真菌试验，测定其最低抑菌浓度（MIC80）值。【方法】采用微量液基稀释法进行药敏试验。【结果】除衍生物PB-9外，其余13种衍生物抗真菌活性均优于或相当于土槿乙酸。衍生物PB-3抗真菌作用最强，对5株真菌的MIC80在8～64μg／ml之间，其对絮状表皮癣菌抑制作用与二性霉素B相同。【结论】某些土槿乙酸衍生物具有更强的抗真菌活性，有进一步开发价值。     

发酵槐米液中有效成分检测方法的建立

目的 建立利用高效液相色谱法(HPLC)测得槐米发酵液中芦丁和槲皮素含量的方法。方法 采用发酵法提高槐米中的芦丁和槲皮素含量。采用色谱柱为Phenomenex Gemini 5μ C18 110A (250 mm × 4.6 mm I.D.,5 μm);流动相为甲醇(B)-水(A)(0.05%甲酸)的溶剂系统线性梯度洗脱[0 min→15 min→20 min→25 min→26 min→36 min,甲醇-水(0.05%甲酸)比例为35:65→50:50→55:45→60:40→35:65→35:65];流速1.0 mL/min,槲皮素的检测波长254 nm,芦丁的检测波长为257 nm,柱温25℃。结果 芦丁和槲皮素在0.031~1 mg/mL质量浓度范围线性关系良好(R12=0.9997,R22=0.9991);精密度RSD分别为芦丁0.997%,槲皮素0.392%;稳定性RSD分别为芦丁0%,槲皮素0.05%;重复性RSD分别为芦丁1.405%,槲皮素1.649%;平均加样回收率分别为芦丁93.90%,RSD 1.55%,槲皮素为98.55%,RSD 1.65%。3批槐米供试品溶液中芦丁的含量为(19.9199±0.1436)mg/g,槲皮素的含量为(0.6501±0.0089)mg/g。结论 检测方法准确可靠、简便,适用于槐米发酵液中芦丁和槲皮素的含量测定。     

正交实验优选益视口服液纯化工艺

目的：考察壳聚糖澄清剂用于益视口服液的纯化工艺。方法以益视口服液中2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的转移率及干膏率为考察指标,采用 L9（34）正交试验设计,优选壳聚糖絮凝沉降法的纯化工艺条件;并对纯化前后药液的黏度、浊度、蛋白质及鞣质含量进行测定。结果壳聚糖絮凝沉降法的最佳条件是药液质量浓度是1.0 g / mL,壳聚糖的加入量为30％,药液 pH 4,温度是40℃,经纯化后黏度、浊度、蛋白质及鞣质含量均有所下降。结论壳聚糖絮凝沉降法可用于益视口服液的纯化。     

RP-HPLC法测定陕西产茜草中QA的含量

目的:测定陕西产茜草中1,3,6-trihydroxy-2-methylanthraquinone-3-O-3-[3-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside]的含量。方法:选用Purospher star RP-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm,Merck公司);流动相为甲醇-水-四氢呋喃(65∶34.7∶0.3),流速为1.0 ml/min,检测波长为276 nm,柱温为25℃,外标法定量分析。结果:该方法在0.020μg~0.160μg范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率101.4,RSD=2.0%(n=6),测定结果为0.053%。结论:该法测定茜草中1,3,6-trihydroxy-2-methylanthraquinone-3-O-3-[3-O-acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside]含量灵敏、准确、重现性好。     

高效液相色谱法测定十三味马钱子丸士的宁的含量

[目的]用高效液相色谱法测定十三味马钱子丸士的宁的含量。[方法]采用HyperClone BDS C18柱（250×4.6mm,5um）;流动相为乙腈-0.01mol/L庚烷磺酸钠与0.02mol/L磷酸二氢钾等量混合溶液（用10%磷酸调节pH值为2.8）（21：79）;流速1.0ml/min;检测波长260nm;柱温30℃。[结果]士的宁浓度的线性范围为7.382～366.4μg/ml,r=0.9996,回收率为98.74%（RSD=0.6%）。[结论]本法方便、快速、准确,可用于十三味马钱子丸的质量控制。     

腹部硬膜外阻滞复合全凭静脉麻醉对老年患者围术期鼻咽温度的影响

[目的]研究腹部硬膜外阻滞复合全凭静脉麻醉对老年患者围术期鼻咽温度的影响。[方法]选择2009年9月至2011年1月在我院择期行胃癌根治术老年患者40例(65岁),美国麻醉师协会(ASA)Ⅱ～Ⅲ级,随机分成2组,I组采用腹部硬膜外阻滞复合全凭静脉麻醉,Ⅱ组采用全凭静脉麻醉。各组于诱导时开始,每隔30min记录鼻咽温度,直至手术结束。[结果]诱导后两组患者的鼻咽温度呈进行性降低,术毕值与诱导值比较差异显著(P0.0l),I组鼻咽温度下降幅度(1.87±0.47)℃明显Ⅱ组(1.24±0.30)℃(P0.05)。两组的生命体征比较,差异无统计学意义(P0.05)。[结论]腹部硬膜外阻滞复合全凭静脉麻醉过程中老年患者围术期鼻咽温度显著降低,围术期应采取保暖措施。     

大枣发酵液对小鼠抗缺氧能力的影响

[目的]探讨大枣发酵液对小鼠的抗缺氧作用.[方法]将小鼠按体重随机分为3组,即对照组、大枣发酵液高剂量组[0.16 g·(kg·d)-1]和大枣发酵液低剂量组[0.04 g·(kg·d)-1].小鼠每天按0.01 ml/g灌胃给药,连续4周,测定小鼠常压缺氧耐受时间、亚硝酸钠中毒存活时间、全血血红蛋白(Hb)含量.[结果]大枣发酵液高低剂量组小鼠均较对照组小鼠耐缺氧时间显著延长(P＜0.05),全血Hb的含量明显均升高(P＜0.05).[结论]大枣发酵液具有提高小鼠抗缺氧应激的能力.     

冷冻损伤大肠菌群在乳糖胆盐发酵培养基生长状况

目的研究经-20℃冷冻损伤的大肠菌群在乳糖胆盐发酵培养基上的生长状况。方法选用大肠埃希氏菌、阴沟肠杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌、产气克雷伯氏菌等4株大肠菌群菌株为研究菌株,经-20℃冷冻贮存不同时间后,分析在乳糖胆盐发酵培养基的生长。结果-20℃冷冻损伤大肠埃希氏菌、阴沟肠杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌、产气克雷伯氏在菌乳糖胆盐发酵培养基生长抑制;大肠埃希氏菌、弗劳地枸橼酸杆菌、阴沟肠杆菌的损伤率大于产气克雷伯氏菌的损伤率,冷冻1d后,其损伤率高达70％以上;阴沟肠杆菌、产气克雷伯氏菌的死亡率大于大肠埃希氏菌、弗劳地枸橼酸杆菌,冷冻1d后,其死亡率均高达80％以上。结论-20℃冷冻损伤大肠菌群在常规检测中使用的乳糖胆盐发酵培养基生长抑制,提示应探索有效的检测方法,以修复冷冻损伤大肠菌群。     

黄精发酵体系中植物乳杆菌的分离鉴定和MTT法活菌快速检测研究

目的 从黄精发酵体系中分离鉴定益生菌,并建立其快速检测方法.方法 通过形态学观察、革兰氏染色、16S rRNA基因序列测定和同源性分析对分离的菌株进行鉴定,采用MTT法建立快速检测方法.结果 从鲜黄精发酵体系中分离获得一株乳酸菌,鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum);建立了植物乳杆菌检测的...