新藤黄酸与ERK抑制剂PD98059联合应用对肺腺癌A549细胞生长的影响

目的 研究新藤黄酸与ERK特异性抑制剂PD98059联合应用后对肺腺癌A549细胞生长的影响。方法 新藤黄酸与ERK特异性抑制剂PD98059处理肺腺癌A549细胞,倒置显微镜观察细胞形态变化;MTT检测细胞存活率;流式细胞仪检测细胞内活性氧的变化;Western blot法检测ERK,p-ERK蛋白的表达。结果 MTT法结果表明新藤黄酸在2.5μM对肺腺癌A549细胞的增殖有抑制作用,与ERK抑制剂PD98059合用后,24h抑制作用达到50.3％,与单独应用新藤黄酸相比抑制作用更加明显;倒置显微镜观察表明新藤黄酸作用肺腺癌A549细胞24 h后,细胞固缩变圆,体积变小,部分细胞贴壁不牢,呈半贴壁状态;新藤黄酸和ERK抑制剂PD98059合用后,可观察到多数细胞固缩变圆,脱落,漂浮于培养液中,少数细胞体积增大、肿胀、破裂呈坏死状;流式细胞仪检测结果表明,相较于新藤黄酸2.5μM处理组,PD98059 2.5μM新藤黄酸共同处理组作用于A549细胞24 h后,细胞内活性氧显著增加(p<0.01)。Western blot表明p-ERK蛋白在A549细胞加入PD98059作用24 h后,与新藤黄酸组比较表达量显著降低。结论 新藤黄酸能诱导肺腺癌A549细胞凋亡,合用ERK抑制剂PD98059后可减少ERK蛋白的活化,增加肺腺癌A549细胞的凋亡;结果初步表明新藤黄酸诱导肺腺癌A549细胞的凋亡可能与调节ERK信号通路有关。     

新藤黄酸诱导卵巢癌A2780细胞凋亡的作用研究

目的 研究新藤黄酸对卵巢癌细胞增殖的抑制作用及其可能的机制。方法 采用MTT检测新藤黄酸对卵巢癌A2780细胞存活率的影响,采用fluo-3AM染色荧光显微镜观察新藤黄酸对A2780细胞钙离子水平的影响,采用Hoechst 33342染色荧光显微镜观察细胞的凋亡率,采用PI染色流式细胞仪检测新藤黄酸对细胞周期的影响,采用Annexin Ⅴ-FITC/PI染色流式细胞仪检测新藤黄酸对细胞凋亡率的影响,采用Western blot检测凋亡相关蛋白表达的影响。结果 MTT检测结果表明,新藤黄酸对卵巢癌细胞A2780的增殖具有抑制作用,且抑制作用具有明显的剂量依赖性;fluo-3AM染色荧光显微镜下观察,可见各浓度新藤黄酸均能升高A2780细胞内钙离子水平,且呈现浓度依赖关系;PI染色流式细胞仪检测结果表明,新藤黄酸能阻滞A2780细胞于G0/G1期;Hoechst 33342染色和Annexin Ⅴ-FITC/PI染色流式细胞仪检测结果表明,随着新藤黄酸浓度的增加,A2780细胞凋亡率呈现增高的趋势;Western blot检测结果表明,新藤黄酸可以促进凋亡相关蛋白p53、细胞色素C以及Caspase-9表达水平升高。结论 新藤黄酸具有抑制卵巢癌A2780细胞增殖和诱导肿瘤细胞发生线粒体凋亡的作用。     

藤黄酸衍生物的研究

目的:制备藤黄酸的衍生物,并进行抗肿瘤活性的研究.方法:半合成方法制备了藤黄酸甲酯、乙酯和氯代物,用MS,UV,IR,1D和2D NMR光谱法鉴定.其结构分别为藤黄酸甲酯(2),6-甲氧基藤黄酸甲酯(3),藤黄酸乙酯(4),33-氯化转位藤黄酸(33-chlorogambogellic acid,5),33,37-二氯转位藤黄酸(33,37-dichloro-gambogellic acid,6).结果和结论:藤黄酸乙酯,33-氯化转位藤黄酸和33,37-二氯转位藤黄酸为新化合物,初步的药理实验表明,化合物5和6比藤黄酸有较强的抗肿瘤活性.     

新藤黄酸对大鼠肝微粒体细胞色素P450亚型酶活性的影响

目的 采用“Cocktail”探针药物法考察新藤黄酸对大鼠肝微粒体细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)亚型酶活性的影响。 方法 将新藤黄酸与6种亚型酶(CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1、CYP3A4)对应的特异性混合探针药茶碱、双氯芬酸钠、奥美拉唑、右美沙芬、氯唑沙宗和咪达唑仑与大鼠肝微粒体孵育,采用高效液相色谱法同时检测肝微粒体中6种探针底物的相对酶活性并计算其半抑制浓度（half maximal inhibitory concentration, IC50）。 结果 不同浓度新藤黄酸作用后大鼠肝微粒体CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1和CYP3A4酶活性相比较,差异均具有统计学意义,且随着新藤黄酸的浓度增高,各种酶的活性呈现明显的降低趋势。通过抑制曲线计算得到新藤黄酸对CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4的IC50值分别为4.18、45.61、10.02 μmol/L,对CYP1A2、CYP2C9、CYP2E1的IC50值均大于100 μmol/L。 结论 新藤黄酸对CYP2C19酶活性有中等抑制作用,对CYP3A4酶活性有弱抑制作用,但对CYP1A2、CYP2C9、CYP2D6、CYP2E1酶活性没有抑制作用。     

新藤黄酸体内外抗肿瘤作用研究

目的 初步探讨新藤黄酸的体内外抗肿瘤作用.方法 采用MTT方法观察新藤黄酸对多种肿瘤细胞的增殖抑制作用;采用4、8、16、32 mg/kg剂量新藤黄酸作用于人肿瘤裸小鼠(BALB/c-nude)模型,观察新藤黄酸的体内抗肿瘤作用.结果 MTT法显示新藤黄酸对培养的人肿瘤细胞(人结肠癌细胞HCT-8、人肝癌细胞Bel-7402、人胃癌细胞BGC-823、人非小细胞肺癌细胞A549、人卵巢癌细胞A2780)增殖有一定的抑制作用,作用72 h的IC50在1.75～3 μmol/L;8、16、32 mg/kg新藤黄酸iv给药,对人非小细胞肺癌A549细胞肿瘤移植的模型小鼠有一定的抑制肿瘤增长作用(P＜0.05).但4～16 mg/kg剂量的新藤黄酸iv给药,对人肝癌Bel-7402肿瘤模型的抑制生长作用不明显.结论 新藤黄酸能够抑制培养的肿瘤细胞生长;iv给药时对A549细胞肿瘤移植的模型小鼠肿瘤增殖有明显的抑制作用.     

藤黄酸类成分的硅胶干柱层析法分离及其酰胺新实体的合成

目的 探讨从藤黄中提取分离藤黄酸(GA)、新藤黄酸(GN A)的实验技术及其酰胺新实体的合成.方法 藤黄丙酮提取物中分离出藤黄酸吡啶盐的母液浸膏与200目硅胶均匀混合后干法上样,硅胶H干柱逆流梯度层析分离出GA、GNA,N,N'-二异丙基碳二亚胺法催化合成它们的N-芳基和N-烷基酰胺.结果 较高效分离出GA、GNA,温和制备了N-[2-(N',N'-二甲氨基)乙基]藤黄酰胺、N-(3-氯-4-氟苯基)新藤黄酰胺和N-(3-氯-4-氟苯基)藤黄酰胺3种酰胺新实体.结论 本实验所建立的GA、GN A干柱逆流层析分离及其酰胺化方法操作简便、温和、重现性好.     

藤黄中藤黄酸B的制备分离方法优选及结构确证

目的建立一种高效且重现性好的藤黄酸B的制备分离方法,并对分离产物进行结构确证。方法采用乙醇超声提取方式对藤黄药材进行初步提取,用中压制备色谱和高压制备色谱相结合的方式对藤黄乙醇提取物中藤黄酸B进行分离和纯化,并采用正交设计对提取和分离工艺进行优化。采用红外光谱、质谱、1 H-核磁共振谱、13C-核磁共振谱对分离得到的样品进行结构鉴定。结果优选的分离方法较其他方法简便且高效可控,分离得到的样品通过结构鉴定,确定为藤黄酸B且纯度可达到99%以上。结论所建立的藤黄酸B的提取分离方法具有高效、简便且重现性好的特点。同时,本研究提供了藤黄酸B相对完整的谱图信息,并确证了所分离藤黄酸B的结构。     

其他植物产品专利题录及专利号

用含五味子提取物和紫葛葡萄提取物的药物减轻癌症化疗的副作用,无其他毒性KR 2007005289 A用总序天冬、姜黄、光果甘草、苦瓜、蒜、余甘子和诃子等的混合物治疗癌症US 20070122496 A1选自印度楝、麝香草和香茅的提取物用于鱼寄生虫感染JP 2007131611 A     

藤黄超临界二氧化碳流体萃取物中化学成分

目的研究藤黄药材的超临界二氧化碳流体萃取物中的主要化学成分。方法采用硅胶与十八烷基硅烷层析分离,用波谱法鉴定结构。结果从中分离出5个已知化学成分,分别为β-谷甾醇、藤黄酸、新藤黄酸、藤黄吉酸和去氧桑藤黄素。结论应用与已知物薄层色谱对照的方法及波谱法可鉴定所有被分离出的化学成分。     

含古钩藤提取物的肝保护剂

US 2004126439-A1 该剂含有古钩藤Cryptolepis buchanani极性溶剂提取物（A001）和纤维素、碳酸钙及淀粉凝胶糊剂。该提取物及其活性部位的制备：粉碎古钩藤，冷态下用极性溶剂渗滤，浓缩渗滤液，得A001。再用己烷和氯仿增加溶剂极性继续提取A001，分别收集部位F001和F002以及极性溶剂和残渣，在正丁醇-水（5：1）中分配残渣，收集正丁醇可溶部位F003和水溶部位F004。     

藤黄酸提取分离及其抗肿瘤活性

[目的]优化中药藤黄中总藤黄酸的提取分离方法,对藤黄酸抗肿瘤活性进行初步研究。[方法]利用回流法进行提取,通过单因素考察实验,研究不同因素对总藤黄酸提取率的影响,并通过正交实验对提取工艺进行优化。再将总藤黄酸粗品进一步分离纯化得到藤黄酸,并进行表征;采用四氮唑蓝(MTT)比色法考察藤黄酸对两种癌细胞的体外抗肿瘤活性。[结果]总藤黄酸最佳的提取工艺为:提取溶剂为乙酸乙酯,料液比为1∶6(g/m L),提取次数为2次,提取时间为3 h,提取温度为80℃,提取率约为57.0%。通过表征确定纯化后所得是藤黄酸。且藤黄酸对癌细胞具有一定的抑制作用。[结论]正交试验优选的总藤黄酸提取工艺简便、稳定、可行,藤黄酸有较强的抗癌作用。     

薄层扫描法测定藤黄中藤黄酸含量

藤黄系藤黄科植物藤黄(Garcinia hanburryi)所分泌的干燥树脂,呈橙色园柱状或块状,质脆易碎,具有攻毒蚀疮,破血散结等功效。外用可治瘰痢、痈疽、疖肿等;内服为峻泻剂,可治水肿及绦虫病。近年来报道将制成注射剂后,临床用于治疗恶性肿瘤。藤黄中含主要活性成分藤黄酸(Gambogic acid)。关于藤黄酸的含量测定方法已报道的有高效液相色谱法。本文介绍了用薄层扫描法测定藤黄中藤黄酸的含量,测定结果较为满意,     

5种不同中药组合对血管内皮细胞生物活性的影响

目的比较5种不同中药组合对人微血管内皮细胞株(HMEC-1)生物活性的影响,为抗肿瘤血管形成复方中药的研制提供依据。方法设置7个组,A组(阴性对照组)为生理盐水,B_1组为藤黄酸+人参皂苷Rg3+斑蝥素,B_2组为藤黄酸+人参皂苷Rg3+青蒿琥脂,B_3组为斑蝥素+人参皂苷Rg3+青蒿琥脂,B_4组为藤黄酸+人参皂苷Rg3,B_5组为藤黄酸+苦参碱,C组(阳性对照组)为沙利度胺。药物浓度:藤黄酸为20μg/mL,去甲斑蝥素为20μg/mL,人参皂苷Rg3为100μg/mL,青蒿琥脂为150μg/mL,苦参碱为100μg/mL,沙利度胺为50μg/mL。每孔加每种药物100μL,每组设6个复孔。比较每组HMEC-1细胞增殖、黏附、迁移、体外血管形成能力。结果 5种不同中药组合中,藤黄酸+人参皂苷Rg3+斑蝥素组合抑制血管内皮细胞增殖、黏附、迁移、体外血管形成效果最好,其次是藤黄酸+人参皂苷Rg3+青蒿琥脂组合,第3是人参皂苷Rg3+斑蝥素+青蒿琥脂组合,第4是藤黄酸+人参皂苷Rg3组合,第5是藤黄酸+苦参碱组合,与生理盐水组比较,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论藤黄酸+人参皂苷Rg3+斑蝥素组合具有较强的抑制血管内皮细胞生物学活性的效果。     

藤黄酸在大鼠体内的药代动力学

目的:研究藤黄酸在大鼠体内的药代动力学.方法:大鼠静注单剂量藤黄酸后,采用HPLC法测定大鼠血浆、组织、粪便、胆汁及尿液中的藤黄酸.结果:藤黄酸在大鼠体内的平均消除半衰期仅为15 min.AUC与剂量呈现良好的线性相关性,提示藤黄酸在大鼠体内的处置属于线性动力学.静注给药后藤黄酸主要分布于肝、肺、脾、肾、胃、肠和心脏.静注给药后藤黄酸主要通过胆汁排泄,给药后16 h内藤黄酸在胆汁中的平均累积排泄百分率为36.5%;粪便中仅有少量的藤黄酸排出,其平均累积排泄百分率为1.04%;尿液中未检测到藤黄酸.在大鼠的胆汁中检测到藤黄酸的4个代谢物.藤黄酸平均血浆蛋白结合率为31.1%.结论:静注给药后,藤黄酸迅速从大鼠体内消除,并可在体内广泛分布和代谢,主要以原型和代谢物的形式从胆汁排泄.     

藤黄酸的研究进展

藤黄为藤黄科植物藤黄树分泌的干燥树脂,具破血散结、解毒、止血、杀虫之功效,用于癌症、脑水肿等多种病症的治疗,其中藤黄酸是其主要有效成分。从藤黄酸的抗肿瘤作用、药动学和新剂型等方面阐述藤黄酸的研究进展,讨论研究过程中存在的问题,为今后藤黄酸的进一步研究开发提供参考。     

藤黄酸对骨肉瘤中端粒酶逆转录酶和P53蛋白的影响

目的 研究藤黄酸对骨肉瘤(HOS)中端粒酶逆转录酶(hTERT)和P53蛋白的影响,为藤黄酸治疗HOS的临床应用提供理论依据.方法 以0.125、0.25、0.5、1、2、4、8μmol/L剂量的藤黄酸分别作用于对数生长期的HOS细胞,用CCK-8法测定细胞存活率,通过免疫组化SP法测定hTERT、P53蛋白的表达情况,应用生物医学影像分析软件Image Pro Plus和Image J对免疫组化图片进行半定量分析.结果 随着藤黄酸作用时间的延长和浓度的增高,HOS细胞存活率降低;随着藤黄酸作用时间的延长,hTERT的表达减弱,P53蛋白的表达明显增强.结论 在藤黄酸作用下,藤黄酸剂量越高,作用时间越长,HOS细胞存活率越低;HOS细胞存活率越低,hTERT表达越少,P53蛋白表达越多;hTERT与P53蛋白两者属非同步关系.     

蓝莓、黑莓等提取物用于治疗病毒性感染和炎症

US2005266104-A1本品富含蓝莓、黑莓、草莓、酸果蔓、悬钩子、红醋栗、黑醋栗、樱桃的果实和浆果中总的酚类化合物。本品制备时不添加重亚硫酸盐离子,总的酚浓度高于12%。体外具有很强的COX-2活性,其活性至少是阿司匹林标准剂量(660μg/mL)的2.5倍以上。本品可用作抗病毒[A型流     

新藤黄酸对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

目的 探讨新藤黄酸对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）增殖和凋亡的影响。方法 用不同浓度的新藤黄酸培养细胞24、48 h后,采用MTT法观察新藤黄酸对细胞生长的抑制作用;倒置显微镜下观察HUVECs细胞形态变化;通过DAPI染色后倒置荧光显微镜观察新藤黄酸对细胞形态学的影响;通过Annexin V-FITC/PI双染及流式细胞术检测新藤黄酸对HUVECs细胞凋亡率的影响;Western blot检测新藤黄酸对HUVECs中凋亡相关蛋白Caspase-3的表达变化。结果 MTT检测结果显示新藤黄酸能够明显抑制HUVECs的增殖,并呈时效及量效关系;荧光显微镜观察结果显示,新藤黄酸作用HUVECs后出现大量凋亡细胞;流式细胞术结果显示,与空白对照组相比,随着新藤黄酸浓度的增加,细胞凋亡率明显增加;Western blot检测结果表明Caspase-3蛋白表达水平显著增加。结论 新藤黄酸对HUVECs有明显的抑制作用,其作用机制可能是通过诱导细胞凋亡实现的。     

高效液相色谱 蒸发光散射检测法对藤黄中藤黄酸及其衍生物的含量测定

为了测定中药藤黄中藤黄酸及其衍生物的含量,本文建立了HPLC蒸发光散射检测器测定其含量的方法。色谱条件是C18 柱;流动相:甲醇乙腈水冰乙酸(6∶2∶1∶0 .3) ,流速0 .8 ml/ min ;检测器温度75 ℃,N2压力2 .1 L/ min ,进样量20 μl。结果表明藤黄酸及其衍生物响应峰面积回归方程是Y= 1 .582 X 16 .207 ,r =0 .9996 ,5 种商品藤黄中藤黄酸含量为22 .75 % 34 .58 % ,新藤黄酸含量为12 .75 % 21 .79 % ,其回收率分别为95 .89 % ,98 .04 % ;RSD3 .4 % 。方法快速简便,结果准确,只需藤黄酸的回归方程即可对藤黄酸衍生物等未知成分进行初步定量。     

藤黄酸对小白鼠实验性肿瘤的亚显微结构影响(“736—2”研究之四)

藤黄科(Guttiferae)植物藤黄(Garcinia morella Desv.)树为常绿乔木,主要产于印度及中南半岛。其树汁经加热蒸干后即为中药的藤黄(Gutti)。藤黄具有消肿、化毒、止血、杀虫等作用;临床上用于治疗痈疽、肿毒、顽癣、汤火伤等等;以外用为主。藤黄的主要成份为藤黄素(Guttiferin)、藤黄酸(Morellic acid)及异藤黄酸(Isomore-llic acid)。江西“736”抗癌研究协作组提取的藤黄酸(以下简称“736—2”)经临床静脉注射或