HCC癌组织和癌旁组织中HCV RNA检测及半定量分析

ＨＣＶ相关ＨＣＣ癌组织能检出ＨＣＶ ＲＮＡ负链，但许多学者检测不到或对其检测方法的准确性产生怀疑。作者收集１３例ＨＣＶ相关ＨＣＣ标本，采用严格的负链检测方法和ＰＣＲ半定量方法系统地比较了ＨＣＣ癌组织和癌旁组织中ＨＣＶ总ＲＮＡ和负链的检出情况及其数量关系。ＨＣＣ癌组织和癌旁组织中，ＨＣＶ ＲＮＡ负链检出率分别为３０．８％和６９．２％，平均滴度分别为３．５和２９．２，两者平均相差８．４倍。癌组织中ＨＣ     

肝细胞癌和癌旁肝组织中HCVRNA正,负链的检测

用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测了４２例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者肝癌及癌旁肝组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ的正，负链，结果显示，肝组织中ＨＣＶＲＮＡ正，负链的检出率分别为５４．８％和３５．７％，ＨＣＶＲＮＡ的正链和负链在肝癌和癌旁肝组织中，同时阳性的患者分别占４５．２％和３１．０％，血清ＨＣＶＲＮＡ和抗ＨＣＶ阴性埂肝组织中ＨＣＶＲＮＡ的检出率仍有５１．３％，肝组织ＨＣＶＲＮＡ与乙型肝炎     

肝癌及癌旁组织中丙型肝炎病毒基因负链的研究

运用巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）等方法检测了５例丙型肝炎病毒核糖核酸（ＨＣＶ—ＲＮＡ）阳性患者的肝癌、癌旁组织和周围血清中ＨＣＶ—ＲＮＡ正链和负链，其中男４例，女１例。结果，正链检测：血清及癌旁组织全部阳性，癌组织中３例阳性。负链检测：血清中均阴性，癌组织３例阳性，癌旁组织５例均阳性。本组５例患者肝脏ＨＣＶ—ＲＮＡ负链阳性，推测ＨＣＶ以ＨＣＶ—ＲＮＡ负链作为模板在感染的肝脏组织中复制，ＨＣＶ持续存在于肝脏组织中对肝癌的发生起了一定的作用。     

肝细胞癌患者血清与癌组织中抗HCV及HCVRNA的检测

８８例经病理确诊的肝细胞癌患者，用ＥＬＩＳＡ法检测其血清抗ＨＣＶ与ＨＢＶ－Ｍ，阳性率分别为１４．７７％和９０．９１％。用ＰＣＲ法检测发现血清ＨＣＶＲＮＡ阳性１２例（１３．６４％）；１１例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性病人的肝癌组织中８例ＨＢＶＤＮＡ阳性；１例肝癌组织中同时检出ＨＣＶＲＮＡ与ＨＢＶＤＮＡ。结果表明，本组肝癌的发生主要与ＨＢＶ感染有关，而与ＨＣＶ感染也可能有一定关系。     

精细胞及血单个核细胞中丙型肝炎病毒RNA及其负链检测

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法对８例慢性丙型肝炎患者的血浆、外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）、精液和精细胞中的正链和负链丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ进行检测，以了解ＨＣＶ在肝外细胞中是否存在，有否复制。结果血浆中正链ＨＣＶＲＮＡ均阳性，而负链ＨＣＶＲＮＡ全部阴性；ＰＢＭＣ中正链ＨＣＶＲＮＡ阳性者５例，其中２例检出负链ＨＣＶＲＮＡ。在３例留取精液的患者中１例精液和精细胞中检出正链ＨＣＶＲＮＡ。精细胞未次洗液ＨＣＶＲＡＮ阴性，精细胞负链ＨＣＶＲＮＡ阴性。上述结果提示：（１）血浆中可能仅有正链ＨＣＶＲＮＡ存在；（２）ＨＣＶ可在ＰＢＭＣ中存在，并可能在其中复制；（３）精液中有ＨＣＶ存在，因此通过性交传播丙型肝炎的可能性确实存在，但ＨＣＶ可能不在精细胞中复制     

肝细胞癌患者血清与癌组织中抗HCV及HCVRNA的检测

８８例经病理确诊的肝细胞癌患者，用ＥＬＩＳＡ法检测其血清抗－ＨＣＶ与ＨＢＶ－Ｍ，阳性率分别为１４．７７％和９０．９１％。用ＰＣＲ法检测发现血清ＨＣＶＲＮＡ阳性１２例（１３．６４％）；１１例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性病人的肝癌组织中８例ＨＢＶＤＮＡ阳性；１例肝癌组织中同时检出ＨＣＶＲＮＡ与ＨＢＶＤＮＡ。结果表明，本组肝癌的发生主要与ＨＢＶ感染有关。而与ＨＣＶ感染也可能有一定关系。     

人肝癌组织中黄曲霉毒素和肝炎病毒基因检测分析

以肝细胞场（ＨＣＣ）患者手术切除标本为研究材料，采用高效液相色谱荧光法检测组织中的黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１），嵌套式多聚酶链反应技术检测组织中的ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ。在６９．２％（１８／２６例）的ＨＣＣ患者中检出了３．６５－８９．０６ｎｇ不等的ＡＦＢ１／ｇ肝组织；ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ检出率分别为９０．５％（５７／６３例）和１２．７％（８／６３例）。其中，ＡＦＢ１和ＨＢＶＤＮＡ重叠检出率为６１．５％（１６／２６例），ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ重叠检出率为７．９％（５／６３例），４例ＨＣＣ患者重叠检出了ＡＦＢ１、ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ；同步检测对照组５例，无１例出现这种情况。结果表明，上述３种因素均与人类肝癌密切相关，并且可能存在协同致癌效应。     

人肝细胞癌及癌旁肝组织HBV-DNA的原位杂交检测

①目的探讨乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ与增生结节和肝癌的关系。②方法应用原位杂交技术检测５８例肝细胞癌（ＨＣＣ）及癌旁组织中ＨＢＶ－ＤＮＡ的表达。③结果肝细胞癌及癌旁组织中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为３７．９％（２２／５８）和４４．８％（２６／５８），差异无显著性（χ２＝０．５６，Ｐ＞０．０５）。ＨＢＶ－ＤＮＡ在癌旁组织中主要位于胞浆内，而肝癌组织中以胞核定位为主。２２例ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性的ＨＣＣ中，１６例ＨＣＣ及癌旁组织均阳性，６例ＨＣＣ单独阳性，两者差异有显著性（χ２＝９．０９，Ｐ＜０．０１）。６例癌旁增生结节中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性（６／２７），以胞核定位为主。④结论ＨＢＶ感染与ＨＣＣ存在密切关系。癌周组织ＨＢＶ－ＤＮＡ以复制型为主，癌组织内ＨＢＶ－ＤＮＡ以整合型为主；癌旁增生结节为ＨＣＣ的癌前病变。     

丙型肝炎病毒C33c抗原、核心抗原和HBxAg在人原发性肝内胆管细胞癌中的分布及意义

目的：研究丙型肝炎病毒Ｃ３３ｃ抗原及核心抗原在人肝内胆管细胞癌中的分布及意义。方法：以免疫组织化学方法检测ＨＣＶ两种抗原及ＨＢｘＡｇ在肝内胆管细胞癌及癌旁肝组织中定位及分布。结果：ＨＣＶＣ３３ｃ抗原位于癌细胞或肝细胞的胞浆内；ＨＣＶ核心抗原在癌组织主要呈核阳性，在癌旁肝以胞浆阳性为主。ＨＣＶＣ３３ｃ抗原在癌组织及癌旁肝的阳性率分别为６０％（２１／３５）及１００％（２１／２１），ＨＣＶ核心抗原在上述两种组织的阳性率分别为８７．８％（２９／３３）及６１．９％（１３／２１）；ＨＢｘＡｇ在两种组织中检出率分别为７４．３％（２６／３５）及７６．２％（１６／２１）．Ｃ３３ｃ及ＨＢｘＡｇ双阳性分别为４８．６％（１７／３５）及７６．２％（１６／２１）．结论：除ＨＢＶ感染外，ＨＣＶ感染在人肝内胆管细胞癌的发生中可能起重要作用     

肝炎病人血清、外周血单核细胞及肝脏中GBV-C/HGV负链RNA的检测

目的：研究２７例肝炎病人血清、外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）及肝脏中ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ正链及负链ＲＮＡ（复制中间体）的存在状况。方法：应用逆转录－巢式多聚酶链反应技术检测ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ正、负链ＲＮＡ。结果：２７例病人中２１例病人血清、７例ＰＢＭＣ、１０例肝组织中检测到ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ正链ＲＮＡ,其中２例单一ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ感染者肝组织中检测到负链ＲＮＡ,在２７例病人血清及ＰＢＭＣ中均未检测到负     

小儿肾小球肾炎肾组织中HBsAg和HBcAg的观察

本文应用免疫组化法对７６例小儿肾炎肾组织进行了ＨＢｓＡｇ及ＨＢｃＡｇ检测。ＨＢＶ抗原总检出率为１８．４％（１４／７６），ＨＢｓＡｇ与ＨＢｃＡｓ沉积分别为１７．１％（１３／７６）与１３．２％（１０／７６）。膜性肾病肾组织中ＨＢＶ抗原检出率为７６．９％（１０／１３），ＨＢｓＡｇ与ＨＢｃＡｇ沉积分别为６９．２％（９／１３）及６１．５％（８／１３）。而其它病理类型肾炎肾组织中ＨＢＶ抗原检出率仅为６．３％（４／６３），ＨＢｓＡｇ及ＨＢｃＡｇ阳性各为６．３％（４／６３）及３．２％（２／６３）。提示ＨＢＶ抗原尤其是ＨＢｓＡｇ与其相关抗体形成的免疫复合物与小儿膜性肾病的发病密切相关。并对ＨＢｓＡｇ参与膜性肾病发病的可能途径进行了讨论。     

丙型肝炎病毒和乙型肝炎病毒重叠感染对肝细胞癌的影响

运用巢式聚合酶锭反应检测３６例经外科手术治疗的肝细胞癌（ＨＣＣ）２的肝癌组织或癌周组织中的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ，并检测血清中的乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）表面抗原来显示ＨＣＣ患者中ＨＣＶ和ＨＢＶ的感染情况。，同时收集一般临床资料。结果表明３６例ＨＣＣ２中，ＨＣＶ感染者１３例（３６．１％），ＨＢＶ感染者３０例９８３．３％），两者重叠感染者１２例（３３．３％），并发现ＨＣＶ、ＨＢＶ重叠感染者较仅ＨＢ     

丙型肝炎患者HCV基因的检测,分型及临床分析

运用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术检测临床肝炎患者血清中ＨＣＶ ＲＮＡ对５４例ＨＣＶＲＮＡ阳性标本用限制性内切酶Ｓａｕ３ＡＩ／ＨａｅⅢ春５’ＮＣ区扩增产物进行酶切。结果显示４种酶切类型：ＨＣＶ Ⅰ型感染３．７％（２／５４），ＨＣＶⅡ型感染７７．８％（４２／５４），ＨＣＶⅢ，Ⅳ型感染１１．１％（６／５４），ＨＣＶⅡ／Ⅲ，Ⅳ型混合感染７．４％（４／５４）；     

肝病患者中丙型肝炎病毒感染的免疫组化检测

以ＨＣＶＮＳ３区单克隆抗体，ＬＳＡＢ法检测了１１６例各类肝病肝组织（其中肝细胞癌５２例，肝炎后肝硬化１６例，慢性肝炎４０例，体质性黄疸８例）及６份正常肝组织（作为对照）中ＨＣＶ抗原的表达状况，结果表明，ＨＣＶ抗原在肝细胞癌，肝炎后肝硬化及慢性肝炎中检出率分别为１３．５％（７／５２），１２．５％（２／１６），１０％（４／４０），而在体质性黄疸及正常肝组织中未检出ＨＣＶ抗原，ＨＣＶ抗原可见于癌细胞或癌     

HBV和HCV感染与原发性肝细胞癌发生的相关性研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，检测２０例肝细胞癌患者肝组织ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ。检测发现８０％的ＨＣＣ癌组织中可检出ＨＢＶ－ＤＮＡ的存在，２５％的病例可以查到ＨＣＶ－ＲＮＡ；所有ＨＢＶ和ＨＣＶ阳性病例均为原发性肝细胞癌，而继发性肝细胞病例未能检出二种病毒核酸序列。本研究揭示我国引起ＨＣＣ发生的肝炎病毒以ＨＢＶ为主，ＨＣＶ也可能起到一定作用。     

人肝细胞癌和癌旁组织中雄激素受体的定量检测

①目的了解肝癌病人癌与癌旁组织中雄激素受体（ＡＲ）的改变。②方法用葡聚糖包裹活性炭饱和吸附法（ＤＣＣ法）检测２１例肝细胞癌（ＨＣＣ）癌组织和癌旁组织中ＡＲ，并与７例男性肝硬变病人肝组织中的ＡＲ进行了比较。③结果癌组织中ＡＲ的含量显著高于癌旁组织（ｔ＝２．７９３，Ｐ＜０．０１）及硬变肝组织（ｔ＝２．３２３，Ｐ＜０．０５）。④结论ＡＲ的增加与肝细胞的恶变有关，从而为ＨＣＣ的内分泌治疗提供分子生物学依据。     

RIBA在慢性丙型病毒性肝炎中的应用价值

采用含ＨＣＶ三种抗原（Ｃ２２，Ｃ３３Ｃ，Ｃ１９０）的重级免疫印迹试验（ＲＩＢＡ）检测了７１例抗－ＨＣＶ阳性一（ＲＩＡ－２法）的慢性非甲非乙型肝炎患者血清并与ＨＣＶＲＮＡ结果进行比较。ＲＩＢＡ阳性５６例，可疑８例，对应ＨＣＶＲＮＡ检出率分别为９４．６４％（５３／５６）和３７．５％（３／８），ＲＩＢＡ阴性的７例均未检出ＨＣＶＲＮＡ。ＨＣＶＲＮＡ阳性病例中ＲＩＢＡ多为阳性，可疑仅占５．３６％（３／５６０     

用原位 PCR 研究石蜡包埋肝组织中微量 HCV RNA

为定位分析石蜡包埋肝组织中微量ＨＣＶＲＮＡ，改良建立了原位ＰＣＲ检测技术，并对１７例丙型肝炎相关的肝细胞癌患者癌组织和癌周肝组织石蜡包埋切片进行检测。结果显示：该技术的特异性可靠，敏感性高于原位杂交法；两种组织切片ＨＣＶＲＮＡ阳性率分别为４１．２％和７０．６％，阳性信号主要呈胞浆型分布；在癌细胞中核型和核膜型分布比例较癌周肝组织明显增高，提示ＨＣＶ可能与宿主细胞基因存在着相互作用。     

树Qu对丙型肝炎病毒的易感性研究

目的：探讨树Ｑｕ对丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的易感性。方法：对来自云南的树Ｑｕ接种含ＨＣＶ的病人血清,然后用ＰＣＲ方法检测树Ｑｕ血清的ＨＶＣ ＲＮＡ,用反向被动血凝法测定抗－ＨＣＶ抗体,用原位ＰＣＲ方法检测树Ｑｕ肝细胞内的ＨＶＣ ＲＮＡ。结果：３４．８％的树Ｑｕ（８／２３）在接种ＨＣＶ后,血清中检出ＨＣＶ ＲＮＡ,对４例抗ＨＣＶ阳性和谷丙转氨酶升高的树Ｑｕ的肝组织进行原位ＰＣＲ检测,结果在１例肝细胞中     

血浆及其外周血单个核细胞中丙型肝炎病毒检测比较

目的：了解慢性丙型肝炎患者的血浆及其外周血单个核细胞（ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｃｅｌｓ，ＰＢＭＣ）中丙型肝炎病毒（ｈｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓ，ＨＣＶ）的存在及存在形式。方法：反转录多聚酶链反应（ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＲＴＰＣＲ）技术检测１２４例慢性丙型肝炎患者的血浆及ＰＢＭＣ中的ＨＣＶ。结果：在７０例抗ＨＣＶ及血浆ＨＣＶＲＮＡ阳性的患者中有２１例（３０％）的患者其ＰＢＭＣ内存在ＨＣＶＲＮＡ正链，仅１例存在ＨＣＶＲＮＡ负链。在５４例抗ＨＣＶ阳性、血浆ＨＣＶＲＮＡ阴性的患者中，仅有２例（３．７％）检出ＨＣＶＲＮＡ正链，未检出ＨＣＶＲＮＡ负链，这２例患者均为干扰素治疗３～６个月的病人。结论：ＰＢＭＣ可作为肝外病毒复制场所。对慢性ＨＣＶ感染者来说，３～６个月的干扰素治疗时间可能是不够的，ＨＣＶ在ＰＢＭＣ内的存在可能是干扰素治疗后复发的原因之一。