肝细胞癌患者血清与癌组织中抗HCV及HCVRNA的检测

８８例经病理确诊的肝细胞癌患者，用ＥＬＩＳＡ法检测其血清抗－ＨＣＶ与ＨＢＶ－Ｍ，阳性率分别为１４．７７％和９０．９１％。用ＰＣＲ法检测发现血清ＨＣＶＲＮＡ阳性１２例（１３．６４％）；１１例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性病人的肝癌组织中８例ＨＢＶＤＮＡ阳性；１例肝癌组织中同时检出ＨＣＶＲＮＡ与ＨＢＶＤＮＡ。结果表明，本组肝癌的发生主要与ＨＢＶ感染有关。而与ＨＣＶ感染也可能有一定关系。     

肝细胞癌和癌旁肝组织中HCVRNA正,负链的检测

用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测了４２例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者肝癌及癌旁肝组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ的正，负链，结果显示，肝组织中ＨＣＶＲＮＡ正，负链的检出率分别为５４．８％和３５．７％，ＨＣＶＲＮＡ的正链和负链在肝癌和癌旁肝组织中，同时阳性的患者分别占４５．２％和３１．０％，血清ＨＣＶＲＮＡ和抗ＨＣＶ阴性埂肝组织中ＨＣＶＲＮＡ的检出率仍有５１．３％，肝组织ＨＣＶＲＮＡ与乙型肝炎     

HBV和HCV感染与原发性肝细胞癌发生的相关性研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，检测２０例肝细胞癌患者肝组织ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ。检测发现８０％的ＨＣＣ癌组织中可检出ＨＢＶ－ＤＮＡ的存在，２５％的病例可以查到ＨＣＶ－ＲＮＡ；所有ＨＢＶ和ＨＣＶ阳性病例均为原发性肝细胞癌，而继发性肝细胞病例未能检出二种病毒核酸序列。本研究揭示我国引起ＨＣＣ发生的肝炎病毒以ＨＢＶ为主，ＨＣＶ也可能起到一定作用。     

应用聚合酶链反应进一步探讨原发性肝癌与HBV,HCV感染的关系

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测原发性肝癌（ＰＨＣ）及肝硬化（ＬＣ）患者血中ＨＢＶ－ＤＮＡ及ＨＣＶ－ＲＮＡ，同时检测血中乙肝５项标志及抗－ＨＣＶ。结果５６例ＰＨＣ中，ＨＢＶ５项标志阳性者４３例（７６．７８％），ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者４２例（７５．００％），两种方法联合应用阳性率为４９例（８７．５％）；其中３４例检测ＨＣＡ－ＲＮＡ阳性者８例（２３．５３％）。６２例ＬＣ中，ＨＢＶ５项标志阳性者３５例（５６．４５％），ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者３８例（６１．２９％），二者联合应用阳性数为４５例（７２．５８％），其中３４例检测ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性数为９例（２３．６８％）。ＰＨＣ组ＨＢＶ感染率显著高于ＬＣ组（Ｐ＜０．０５），ＨＣＶ感染率两组差异无显著性（Ｐ＜０．０５）。并对ＨＢＶ、ＨＣＶ感染与ＬＣ、ＰＨＣ的发生发展作进一步讨论。     

HBV与HCV重叠感染的研究

应用ＰＣＲ法和套式ＰＣＲ法对深圳地区４４例ＨＢＶ血清学标志物阳性者进行ＨＣＶ－ＲＮＡ检测，并同时作ＨＢＶ－ＤＮＡ检测，以了解ＨＢＶ与ＨＣＶ重叠的感染情况，同时观察其血清ＡＬＴ的情况。结果发现，４４例患者中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性１２例（２７．２７％）；ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性２２例（５０．００％），抗ＨＣＶ阳性２１例（４７．７３％）．表明ＨＢＶ与ＨＣＶ的重叠感染率较高，应引起人们的重视。     

原发性肝癌患者肝组织中HCVRNA和HCV抗原的定位

分别用原位杂交过氧化物酶与抗氧化物酶复合物法检测了７３例肝细胞癌患者肝组织切片中的丙型肝炎病毒ＲＮＡ和ＨＣＶ抗原以及乙型肝炎病毒的表面抗原和核心抗原。结果显示：ＨＣＶＲＮＡ，ＨＣＶＡｇ，ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ的检测出率分别为２６．０％，２８．８％，７５．３％和２６．０％；ＨＣＶ阳性的肝细胞多呈散在型分布，可见有ＲＮＡ，ＨＣＶＡｇ，ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ的检测率分别为２６．０％     

人肝癌组织中黄曲霉毒素和肝炎病毒基因检测分析

以肝细胞场（ＨＣＣ）患者手术切除标本为研究材料，采用高效液相色谱荧光法检测组织中的黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１），嵌套式多聚酶链反应技术检测组织中的ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ。在６９．２％（１８／２６例）的ＨＣＣ患者中检出了３．６５－８９．０６ｎｇ不等的ＡＦＢ１／ｇ肝组织；ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ检出率分别为９０．５％（５７／６３例）和１２．７％（８／６３例）。其中，ＡＦＢ１和ＨＢＶＤＮＡ重叠检出率为６１．５％（１６／２６例），ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ重叠检出率为７．９％（５／６３例），４例ＨＣＣ患者重叠检出了ＡＦＢ１、ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ；同步检测对照组５例，无１例出现这种情况。结果表明，上述３种因素均与人类肝癌密切相关，并且可能存在协同致癌效应。     

肝癌及癌旁组织中丙型肝炎病毒基因负链的研究

运用巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）等方法检测了５例丙型肝炎病毒核糖核酸（ＨＣＶ—ＲＮＡ）阳性患者的肝癌、癌旁组织和周围血清中ＨＣＶ—ＲＮＡ正链和负链，其中男４例，女１例。结果，正链检测：血清及癌旁组织全部阳性，癌组织中３例阳性。负链检测：血清中均阴性，癌组织３例阳性，癌旁组织５例均阳性。本组５例患者肝脏ＨＣＶ—ＲＮＡ负链阳性，推测ＨＣＶ以ＨＣＶ—ＲＮＡ负链作为模板在感染的肝脏组织中复制，ＨＣＶ持续存在于肝脏组织中对肝癌的发生起了一定的作用。     

HBsAg阳性肝病患者HCV感染率及其在血中的存在形式

目的：探讨ＨＢｓＡｇ阳性肝病患者合并ＨＣＶ感染后对肝脏病变的影响以及血清中ＨＣＶ存在的形式。方法：被测对象为１６８例ＨＢｓＡｇ阳性肝病患者（肝炎后肝硬化１０４例，原发性肝细胞癌６４例），采用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测血清中ＨＣＶＲＮＡ，采用免疫沉定法判断ＨＣＶ在血清中存在的形式。结果：ＨＢｓＡｇ阳性肝病患者合并ＨＣＶ感染者为２０．８％，与无ＨＢＶ感染人群ＨＣＶ感染率２．２％比较有显著性差异。ＨＣＶ在血清中的存在形式７７％呈游离状态，２３％既有游离状态，又有免疫复合物的形式。ＨＢｓＡｇ阳性脏病患者合并ＨＣＶ感染者肝功能损害明显加重，肝癌并发率为２６．６％。结论：ＨＢＶ与ＨＣＶ重叠感染对肝脏损伤以及并发肝癌可能有协同作用     

丙型肝炎病毒和乙型肝炎病毒重叠感染对肝细胞癌的影响

运用巢式聚合酶锭反应检测３６例经外科手术治疗的肝细胞癌（ＨＣＣ）２的肝癌组织或癌周组织中的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ，并检测血清中的乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）表面抗原来显示ＨＣＣ患者中ＨＣＶ和ＨＢＶ的感染情况。，同时收集一般临床资料。结果表明３６例ＨＣＣ２中，ＨＣＶ感染者１３例（３６．１％），ＨＢＶ感染者３０例９８３．３％），两者重叠感染者１２例（３３．３％），并发现ＨＣＶ、ＨＢＶ重叠感染者较仅ＨＢ     

肝细胞癌和其它慢性肝病HCV HBV感染比较分析

对１２８例有病理诊断依据的肝细胞场（ＨＣＣ）、４７例慢迁肝（ＣＰＨ）、１０５例慢活肝（ＣＡＨ）、４６例肝硬化（ＬＣ）．采用嵌套式ＰＣＲ技术检测其血标本中的丙型肝炎病毒（ＨＣｖ）ＲＮＡ和乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＩＩＡ，对这两种病毒的血清学标志也进行了研究。结果：在ＨＣＣ组。ＨＣＶＲＮＡ１４．１％阳性，ＨＢＶＤＮＡ７ｉ．３％阳性。ＣＰＨ，ＣＡＨ，ＬＣ和ＨＣＣ的ＨＢＶ感染率均在９０％左右，而ＨＣＶ感染率则分别为８．５％、９．５％、１７．４％和１９．５％，显示ＨＣＶ感染率随肝病严重程度的增加而有增加的趋势；晚期肝病组的ＨＣＶ感染率（１９．０％）显著高于慢性肝炎组（９．２％，Ｐ＜０．０５）。提示ＨＣＶ感染后经过慢性肝炎、肝硬化发展为ＨＣＣ可能是一个逐渐演进的病理过程。ＨＣＶ，ＨＢＶ重叠感染率。ＨＣＣ组高于ＣＰＨ，ＣＡＨ，而与ＬＣ相近，显示ＨＣＶ重叠感染在原有ＨＢＶ感染的基础上促进病变向着迁延化、慢性化，进而向着肝硬化、ＨＣＣ方向发展。     

Detection of plus and minus strands of HCV RNA in cancerous and non－cancerous liver tissues of patients with hepatocellular c

ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｐｌｕｓａｎｄｍｉｎｕｓｓｔｒａｎｄｓｏｆＨＣＶＲＮＡｉｎｃａｎｃｅｒｏｕｓａｎｄｎｏｎ－ｃａｎｃｅｒｏｕｓｌｉｖｅｒｔｉｓｓｕｅｓｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａＣｕｉＸｉａｏｈｏｎｇ...     

PCR检测丙型肝炎病毒感染各高危人群

用ＰＣＲ方法克隆了中国丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染者的５’端非编码区（５’－ｎｏｎｃｏｄｉｎｇｒｅｇｉｏｎ，５’－ＮＣＲ）序列，并根据此序列合成引物检测我国ＨＣＶ各高危感染人群的病毒复制情况，结果显示ＨＣＶＲＮＡ在慢性丙型肝炎患者的血清标中的阳性率为８１．８％（９／１１），在ＨＣＶ抗体阳性的血液透析患者血清标本中的阳性率为６３．６％（７／１１），在ＨＣＶ抗体阳性的献血员血清标中的阳性率为２０％（４／     

慢性乙型肝炎患者的HCV重叠感染

研究45例慢性乙型肝炎患者的HCV重叠感染。病例均为后发抗HCV阳性的慢性HBsAg携带者,无先抗HCV阳性而后HBsAg阳性的个案,这可能反映HBV和HCV两种病毒感染的先后次序、不同传播方式及HBV对HCV易感性的增进作用。用RT-PCR检出30/45例血浆HCV RNA阳性,不仅确证HCV重叠感染诊断,还证实HCV复制及传染性。23/30例HCVRNA阳性者有输血史,提示输血是其获得HCV重叠感染的主要途迳。用PCR检出25/45例血清HBV DNA阳性,其中抗HBe阳性者的HBV DNA检出率为42.9％(12/18),明显低于(P<0.001)我们前文报道,提示重叠HCV感染对HBV复制有抑制作用。此外有9例抗HBe阳性者,其HBV DNA阴性但HCV RNA阳性,反映HCV可能已取代HBV成为致肝损害的主要病因。     

聚合酶链反应检测血清及肝脏中丙型肝炎病毒核糖核酸的研究

本文报道了简便快速检测血清及肝脏中丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA)的聚合酶链反应(PCR)方法。检测单浆献血员61例,其中抗-HCV阳性30例,检出血清HCV RNA阳性者17例;抗-HCV阴性31例,检出血清HCV RNA阳性者9例。检测6例血清HCV RNA阴性、抗-HCV阳性丙型肝炎患者的肝穿标本,发现4例HCV RNA阳性。说明本文所建立的PCR方法是诊断HCV感染的特异性强、敏感度高的一种新方法。检测肝组织内的HCV RNA可提高HCV RNA的检出率。本文还对标本的处理及如何避免假阳性等问题进行了讨论。     

慢性肝病和肝癌中丙型肝炎病毒感染的病理学研究

目的 研究广西肝细胞癌（ＨＣＣ）及慢性肝病病变组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染状况。探讨ＨＣＶ感染在肝癌发病中的应用。方法 用免疫组化ＳＰ法,检查２０１例病变肝组织中丙肝病毒核心区抗原（Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ Ｃｏｒｅ Ａｎｔｉｇｅｎ,ＨＣＡｇ）和乙肝病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）,分析各种肝脏病变中ＨＣＶ的感染状况及其与病变程度的关系。结果：１１６例ＨＣＣ和８５例慢性现中的ＨＣＶ感染率分别是４４．８     

肝病患者中丙型肝炎病毒感染的免疫组化检测

以ＨＣＶＮＳ３区单克隆抗体、ＬＳＡＢ法检测了１１６例各类肝病肝组织（其中肝细胞癌５２例，肝炎后肝硬化１６例，慢性肝炎４０例，体质性黄疸８例）及６份正常肝组织（作为对照）中ＨＣＶ抗原的表达状况，结果表明，ＨＣＶ抗原在肝细胞癌、肝炎后肝硬化及慢性肝炎中检出率分别为１３．５％（７／５２）、１２．５％（２／１６）、１０％（４／４０），而在体质性黄疸及正常肝组织中未检出ＨＣＶ抗原。ＨＣＶ抗原可见于癌细胞或癌周肝细胞的胞浆或胞核中，实验结果支持ＨＣＶ与肝细胞癌的关联，ＨＣＶ感染对促使肝病的加重也具有一定影响。肝细胞癌中，胞核型ＨＣＶ抗原表达较多见。癌周组织中ＨＣＶ抗原检出率高于癌组织，提示ＨＣＶ可能主要作用于癌前病变，在肝细胞癌发生的初始阶段起作用，促使正常细胞恶性化。     

肝细胞癌组织中HBV，HCV，HGV的表达

目的　探讨乙型肝炎病毒 (HBV) ,丙型肝炎病毒 (HCV)及庚型肝炎病毒 (HGV)在肝细胞癌 (HCC)组织中的存在状态。方法　分别采用抗 -HBVS ,抗 -HCVNS5及抗 -HGVNS5三种单克隆抗体 ,以免疫组织化学SPAB法检测 2 6例HCC患者石蜡包埋的肝癌及癌旁肝组织中HBVS抗原 (HBsAg) ,HCVNS5抗原 (HCAg)和HGVNS5抗原(HGAg)。结果　检出HBsAg 17例 ( 65 % ) ,HCAg 13例 ( 5 0 % )及HGAg 9例 ( 3 5 % ) ,其中HBV/HCV/HGV重叠感染 7例 ,HBV/HCV重叠感染 4例 ,HBV单独感染 6例 ,HCV单独感染 2例 ,HGV单独感染 2例 ,另有 5例均不表达上述三种抗原 ;HBsAg与HGAg阳性率之间差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,HBsAg与HCAg及HCAg与HGAg阳性率之间差异均无显著性(P >0 0 5 ) ;HBV ,HCV及HGV均表达于肝细胞或肝癌细胞浆内 ,呈细颗粒状分布 ,癌组织表达强度均弱于癌旁组织。结论　HCC患者中有较高的HBV ,HCV及HGV感染率 ,感染率顺序为HBV >HCV >HGV ;推测HBV感染在HCC发生过程中起重要作用 ,HCV和HGV感染可能是HCC发生的相关因素。