糖基化终末产物对大鼠肾皮质基质金属蛋白酶2活性和表达的影响

的　研究糖基化终末产物 (AGEs)对肾皮质基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )活性及其mRNA表达的影响。方法　用链脲佐菌素制备大鼠糖尿病模型。大鼠血清蛋白与 0 .5mol/L葡萄糖孵育制备AGEs,分静脉注射AGEs(AGEs组 )、静脉注射大鼠正常血清 (阴性对照组 )和未注射大鼠 (对照组 ) 3组进行观察。ELISA测定肾皮质和血清AGEs含量 ,RT PCR检测MMP 2、金属蛋白酶组织抑制物 2 (TIMP 2 )mRNA表达水平 ,酶谱法测定MMP 2活性。结果　糖尿病大鼠肾皮质AGEs含量明显升高 ,MMP 2mRNA表达下降 ,TIMP 2mRNA表达上调 (均P <0 .0 1)。AGEs处理组大鼠肾皮质AGEs含量明显升高 (P <0 .0 1) ,MMP 2活性也明显下降 (均P <0 .0 5)。结论　AGEs通过降低大鼠肾皮质MMP 2的活性及其mRNA表达及增加TIMP 2mRNA表达 ,由此减少肾小球细胞外基质 (ECM )降解 ,可能是导致糖尿病肾病ECM积聚的原因之一     

基质金属蛋白酶-9和金属蛋白酶组织抑制物-1在IgA肾病肾组织中的表达

目的 探讨基质金属蛋白酶－9（MMP－9）／金属蛋白酶组织抑制物－1（TIMP－1）系统在IgA肾病肾组织中的表达及其对IgA肾病的进展的影响。方法 采用免疫组织化学和原位杂交技术,分别在蛋白质和基因水平检测38例IgA肾病患者肾组织中的MMP－9和TIMP－1的变化。结果 MMP－9在正常肾脏肾小球的脏层上皮细胞和内皮细胞有少量表达,在肾小管上皮细胞和间质血管壁也有少量表达;在IgA肾病中,MMP－9在系膜增殖性肾小球和间质血管壁的表达均明显增多（P＜0．001）,而在硬化肾小球内的表达则明显减少,肾小管细胞的MMP－9表达无明显变化。TIMP－1在正常肾组织中不能检出,在IgA肾病患者具有系膜增殖性病变的肾小球中有微量表达,在增殖在很重但尚未完全硬化的肾小球内表达增多,在肾小管间质表达最为明显（P＜0．001）,其主要见于肾小管细胞、间质细胞和血管内皮细胞。肾组织中的TIMP－1表达与血清肌酐水平呈显著相关（P＜0．05）,与肾小管间质的纤维化和炎细胞浸润程度亦明显相关（P值均＜0．01）。肾小球中的MMP－9表达与尿蛋白无明显相关性,但与血清肌酐水平呈显著负相关（P＜0．05）。结论 MMP－9和TIMP－1的异常表达可能是影响IgA肾病进展的因素之一。     

基质金属蛋白酶/组织金属蛋白酶抑制物表达失衡在大鼠肾脏衰老过程中的意义

目的:探讨基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制物(TIMPs)在大鼠肾脏衰老过程中的作用。方法:选用3、12和24月龄大鼠，采用免疫组化技术分别检测基质金属蛋白酶—2、9(MMP—2、9)、组织金属蛋白酶抑制物—1、2(TIMP—1、2)、转化生长因子—β1(TGF—β1)等在不同月龄大鼠肾组织中的表达。结果TIMP—1、TIMP—2及TGF—β1主要表达在肾小球、肾小管、间质及血管，并随增龄表达增强(P＜O．01)；MMP—9、MMP—2主要表达在肾小管上皮细胞，随增龄表达无变化；TIMP—1与TGF—β1与肾小球硬化面积有相关性(r分别为O．751、O．771，P＜O．05)；TIMP—1与TIMP—2与小管间质纤维化面积有相关性(r分别为O．783、O．766，P＜O．O5)。结论:MMPs／TIMPs表达失衡在肾脏衰老过程中可能起重要作用。     

基质金属蛋白酶在类似人类2型糖尿病大鼠肾病中的研究

目的 动态研究基质金属蛋白酶－2（MMP－2）和其体内特异的抑制物－金属蛋白酶组织抑制剂－2（TIMP－2）在类似人类2型糖尿病大鼠肾组织的改变。方法 利用免疫组织化学观察Ⅳ型胶原在肾小球的表达,酶谱法测定肾皮质MMP－2的活性,蛋白印迹法检测肾皮质TIMP－2的含量,Northern Blot观察肾皮质MMP－2和TIMP－2的基因表达。结果 类似人类2型糖尿病大鼠肾小球Ⅳ型胶原成分表达增强,肾皮质MMP－2基因表达减弱（P＜0．01）;其活性进行性减少（P＜0．0001）,而TIMP－2基因表达（P＜0．01）及其含量逐渐增加（P＜0．01）。结论 类似人类2型糖尿病大鼠肾组织MMP－2活性进行性降低、TIMP－2含量增加,两者比例失衡为肾小球ECM成份沉积的重要原因之一,基质降解减弱也参与了2型糖尿病大鼠肾脏病变的发生和发展。     

基质金属蛋白酶2、9及其抑制剂1在肺癌侵袭转移中的作用

基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases ,MMPs)是一组重要的细胞外基质(extracelluarmatrix ,ECM )降解酶。肿瘤细胞可通过MMPs对ECM的降解促进其对周围组织的侵袭破坏,特别是MMP 9、MMP 2被认为是肿瘤侵袭转移的标志物之一[1,2 ] 。本研究通过检测肺癌患者外周血白细胞中MMP 9、金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP 1)的mRNA和血浆中MMP 2、MMP 9的蛋白水平,探讨MMP 9与肺癌侵袭转移的关系及肺癌患者外周血白细胞MMP 9mRNA表达水平与血浆中MMP 9蛋白水平的相关性。对象与方法　对象:( 1)肺癌组:肺癌患者30例,均经病理学检查…     

基质金属蛋白酶及其抑制因子与肝纤维化

基质金属蛋白酶是肝内细胞外基质降解酶的重要酶类。肝内MMP家族包括MMP-1、MMP-2、MMP-3及其抑制因子TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3。MMP主要由肝脏间质细胞合成和分泌,TIMP可由肝脏实质及间质细胞合成和分泌。肝纤维化早期时,肝组织间质胶原酶活性较高,纤维化晚期活性下降;而肝纤维化时肝组织中TIMP-1表达增强,慢性肝炎患者血清TIMP-1水平显著增高,并与肝纤维化程度呈显著正相关,提示MMP及TIMP家族对于肝纤维的发生、发展及预后都有重要意义。     

L-158809对2型糖尿病大鼠模型肾脏保护的机制探讨

目的：观察血管紧张素Ⅱ（ATⅡ）受体拮抗剂L－158809对2型糖尿病大鼠模型肾脏的保护作用,并探讨其作用机制。方法：2型糖尿病大鼠在L－158809治疗16周后,测定肾组织ATⅡ含量,利用组织学检查观察肾组织结构的改变,免疫组化观察基质金属蛋白酶2（MMP－2）及其金属蛋白酶2组织抑制剂（TIMP－2）在肾小球的表达,酶谱法测定肾皮质MMP－2的活性,Western印迹检测肾皮质TIMP－2的含量,结果：L－158809治疗使糖尿病大鼠血浆和肾皮质ATⅡ浓度进一步升高,肾小球基质增生明显减轻,肾小球MMP－2染色强度和肾皮质MMP－2的活性增强,但不能使肾小球TIMP－2染色及肾皮质TIMP－2含量降至正常。结论：L－158809对类似人类2糖尿病大鼠肾脏病变有保护作用,对肾脏细胞外基质沉积的改善部分是通过促进基质转化而实现的。     

溃疡性结肠炎患者基质金属蛋白酶-2,9和抑制因子-1,2的表达及其意义

目的　在转录和蛋白水平检测基质金属蛋白酶 (MMP) 2 ,9和特异性组织抑制因子(TIMP) 1,2在溃疡性结肠炎 (UC)患者和正常志愿者肠粘膜中的表达情况及活性变化。方法　对病理证实的 2 2例UC和 2 0名健康志愿者在内窥镜下取活检 ,采用NorthernBlot和WesternBlot法分别对MMP 2 ,9及TIMP 1,2进行检测 ,并采用明胶酶谱法测定MMP 2 ,9活性。结果　MMP 2 ,9和TIMP 1在正常肠粘膜中均呈现低表达 ,在患者肠粘膜中表达显著升高 (P <0 .0 1) ,而TIMP 2在两种粘膜中的表达量无明显差别。明胶酶谱结果显示MMP 2 ,9在后者中的活性较前者中显著升高 (P <0 .0 5 ) ,且与炎症程度相关。结论　MMP 2 ,9在UC肠炎肠粘膜上皮重塑过程中具有重要作用 ,在疾病的发生和发展中可能起到促进作用     

酒精性肝纤维化基质降解机制的研究

目的：揭示酒精性肝病肝纤维化基质降解的病原机制。方法：28例酒精性肝炎肝穿刺组织按其纤维化程度分为3组，利用原位杂交技术以寡聚核苷酸为探针，分别检测各组MMP－1、MMP－2、MT1－MMP和TIMP－1 mRNA的表达情况。结果：发现MMP－1、MMP-2、MT1－MMP和TIMP－1 mRNA表达阳性的细胞主要是肝窦壁细胞（可能为增生的HSC）和少数肝细胞；MMP－2、MT1－MMP 和TIMP－1mRNA表达阳性细胞数随肝纤维化程度的增加而增多，相反，MMP－1 mRNA表达阳性细胞数则随肝纤维化程度的增加而减少。结论：HSC可能是肝组织内产生MMP－1、MMP－2、MT1－MMP和TIMP－1的主要细胞，在酒精性肝纤维化ECM沉积中起重要作用；MMP－1减少和TIMP－1增多可能是EMC沉积，尤其是I型胶原过量沉积的原因；而MMP－2和MT1－MMP增多的意义尚须进一步确定。     

血清胶原酶对判断慢性乙型肝炎肝纤维化及炎症程度的意义

目的观察慢性乙型肝炎患者血清基质金属蛋白酶(MMPs)及金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)水平与肝纤维化及炎症程度的相关性,寻找新的判定肝纤维化程度的血清学指标.方法慢性乙型肝炎患者88例,间隔半年行两次肝穿刺活检,病理组织进行炎症活动度及纤维化程度半定量计分;检测血清TIMP1、TIMP2、MMP1、MMP2、MMP9、Ⅳ型胶原、层黏连蛋白、Ⅲ型前胶原N端肽、透明质酸水平.结果血清TIMP1(r=0.540,P＜0.001)、MMP2(r=0.314,P=0.003)、TIMP1/MMP1(r=0.269,P＜0.001)与纤维化分级成正相关,MMP1与纤维化分级成负相关(r=-0.49 5,P＜0.001),且与血清Ⅲ型前胶原N端肽、透明质酸相关;根据受试者工作特性曲线(ROC)下面积计算,MMP1以13.96(ng/ml)为临界值,判别S2及S2以上纤维化的敏感性为90.5%,特异性为52.0%;TIMP1以76.84(ng/ml)为临界值,敏感性为91.6%,特异性为64.0%.MMP1以6.86(ng/ml)为临界值,判别肝硬化(S4)期敏感性为70.7%,特异性为80.9%;TIMP1以210.04(ng/ml)为临界值,其敏感性60.5%,特异性92.3%.MMP1、TIMP1与炎症分级及计分均有相关性,而TIMP1与碎屑坏死、桥接坏死相关性最好(r=0.435,P＜0.001),TIMP2与MMP9与炎症没有明显相关性.结论血清TIMP1、MMP1、MMP2水平、TIMP1/MMP1比值可作评估肝纤维化发展或减轻的指标.     

MMP-1、TIMP-1及其在肝纤维化中的作用

基质金属蛋白酶(MMP)和金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)是细胞外基质(ECM)合成和降解调节中的两个重要的因素。其中MMP-1主要降解细胞外基质的主要成分Ⅰ、Ⅲ型胶原,TIMP-1可抑制MMP-1的活性。肝纤维化时MMP-1活性下降,而TIMP-1活性不断升高。研究显示,二者活性失衡是导致肝纤维化进展的重要因素。它们的来源结构、活性的调节及功能成为目前的研究热点。     

基质金属蛋白酶组织抑制物-2基因多态性与慢性阻塞性肺疾病易感性的关系

基质金属蛋白酶 (MMPs)及其组织抑制物 (TIMPs)在慢性阻塞性肺疾病 (COPD)发生中的作用逐渐引起人们的注意。MMPs在COPD患者中存在高表达[1] ,而其抑制物在肺组织中主要是TIMP 2 [2 ] ,当TIMP 2基因发生突变 ,使得TIMP 2活性降低 ,MMP/TIMP 2处于不平衡状态 ,可导致COPD的发生。TIMP 2基因多态性主要表现在启动子的- 4 18位点和第 3外显子的 +85 3位点[3 ] 。本研究通过对吸烟的COPD患者和健康吸烟者的基因频率进行研究 ,分析TIMP 2基因多态性与COPD易感性的关系。一、对象与方法1 对象 :COPD组 :吸烟的COPD患者 …     

MMP－2、MMP－3、TIMP－1及氯沙坦与氨氯地平在老年前期自发性高血压大鼠肾硬化中的作用及其机理探讨

目的 探讨MMPs/TIMPs与高血压性肾损害的关系。方法 将SHR随机分为3组,每组10只。氨氯地平10mg·kg~(-1)·d~(-1)或氯沙坦30 mg·kg~(-1)·d~(-1)治疗3个月,为实验组;以模型SHR为空白对照组。同时以10只WKY大鼠为健康对照组。测量治疗前、后血压变化,血尿素氮、肌酐和24 h尿蛋白定量,观察Ⅳ型胶原(COⅣ)、层连蛋白(LM)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)在肾组织中的表达。结果 ①SHR血压显著增高;肾功能明显受损;肾组织病理改变显著。肾小球细胞外基质(ECM)成分(如:COⅣ、LM)及TIMP-1表达增多;MMP-3、MMP-2表达减少;②治疗后,血压明显降低;肾功能损害减缓;肾组织病理改变减轻。肾组织中COⅣ、LM、TIMP-1表达减少;MMP-3、MMP-2表达增多。结论 氯沙坦与氨氯地平能延缓高血压性肾损害,改善已失调的MMPs/TIMPs比例;减少ECM在肾小球中的聚积,具有延缓高血压性肾硬化的作用。     

金属蛋白酶-2和金属蛋白酶组织抑制物-1与糖尿病肾病关系的实验研究

目的　观察链脲佐菌素 (STZ)实验性糖尿病大鼠肾脏基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )及金属蛋白酶组织抑制物 1(TIMP 1)蛋白的表达及功能、形态学改变 ,探讨MMP 2、TIMP 1在糖尿病肾病(DN)发生机制中的意义。　方法　 2 0只雄性Wistar大鼠随机分为糖尿病组和正常对照组 ,分别于第1、2、4、6、8周测定尿白蛋白排泄率 (UAER) ,第 9周用Western印迹方法检测MMP 2、TIMP 1蛋白表达水平 ,电镜观察肾小球基底膜厚度 (GBMT)。　结果　糖尿病组较正常组TIMP 1蛋白表达明显增加 ,MMP 2蛋白表达显著降低 (P <0 .0 1)。 4、6、8周UAER显著增加 ,GBMT明显增厚 (P <0 .0 1)。电镜发现糖尿病组肾小球基底膜弥慢性增厚 ,局部有系膜细胞插入和双轨征。　结论　持续高血糖可使大鼠肾脏MMP 2下降 ,TIMP 1增加。导致肾小球基底膜增厚 ,UAER增加。MMP 2、TIMP 1失衡可能对糖尿病肾病功能和形态学改变有重要意义。     

1,25-二羟维生素D3对人成骨细胞基质金属蛋白酶及其抑制因子的作用

目的　研究 1, 25 二羟维生素D3 [ 1α, 25 (OH)2D3 ]对人成骨细胞基质金属蛋白酶(MMP) 1、MMP 2、膜型基质金属蛋白酶 1 (MT1 MMP)、基质金属蛋白酶抑制因子 1 (TIMP 1 )的影响,探讨 1α, 25(OH)2D3 调节骨代谢作用机制。方法　人成骨细胞用 1α, 25 (OH)2D3 干预。Western杂交检测MT1 MMP蛋白质表达。MMP 1、MMP 2、TIMP 1的分泌及MMP 2的活性用ELISA检测。Northern杂交检测维生素D受体、MT1 MMPmRNA表达。结果　 1α, 25 (OH)2D3 对人成骨细胞MMP 1、MMP 2、TIMP 1表达无影响, 10-10 ~ 10-8 mol/L 1α, 25 (OH)2D3 干预诱导成骨细胞MT1 MMP表达呈剂量依赖性 (P值均 <0 05);促进MMP 2激活呈剂量依赖性 [MMP 2活性分别为(42 3 ± 8 6)、(64 4 ±11 4)、(93 5 ±9 9)μg/L, P值均<0 05]。结论　由于MT1 MMP在骨吸收过程中起着关键作用, 1α, 25(OH)2D3 可通过诱导成骨细胞MT1 MMP表达刺激骨吸收。     

人参皂苷Rg1对纤维化肝脏肝细胞超微结构及其表达基质金属蛋白酶组织抑制剂-1的影响

基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1随肝纤维化病情的发展表达增强,与基质金属蛋白酶(MMP)-1特异性结合,使间质胶原酶活性下降,造成细胞外基质(ECM)沉积增加,促进肝纤维化进一步发展.三七可以增强胶原酶活力,降解肝内的Ⅰ、Ⅲ型胶原,其发挥作用的主要成分为三七总甙~([1]);而三七总甙是一种混合物,含人参皂苷共7种,人参皂苷Rgl为其中主要成分之一.前期研究表明,人参皂苷Rg1对肝纤维化有明显的治疗作用~([2]).本研究通过RT-PCR检测人参皂苷Rg1对CCl_4所致肝纤维化模型大鼠肝组织TIMP-1mRNA及Ⅰ型胶原mRNA表达的影响,以探讨其抗肝纤维化的可能机制.     

基质金属蛋白酶-9及组织抑制剂-1与肾小管间质纤维化

肾小管间质纤维化（TIF）是所有慢性肾脏疾病（CKD）进展到终末期肾病（ESRD）的共同途径,其主要病理特征为肾间质成纤维细胞的增生和细胞外基质（如I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白、层粘连蛋白）的过度积聚。基质金属蛋白蓐每／基质金属蛋白酶组织抑制剂（MMPs／TIMPs）是调控细胞外基质（ECM）降解的重要酶系,大量研究表明其在肾小管间质纤维化的发生与发展中起重要作用,其中以MMP-9及TIMP-1最为重要。现对MMP-9及TIMP-1与肾小管间质纤维化关系的研究进展作一综述。     

MMP-2及其抑制剂在子宫内膜异位症中的表达及与临床分期的关系

目的　研究基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )及其抑制剂 (TIMP 2 )在子宫内膜异位症 (EMs)中的表达 ,探讨其在EMs发生发展中的作用。方法　应用免疫组化S P法检测 50例异位内膜组织标本 ,2 0例在位内膜组织中MMP 2 ,TIMP 2蛋白的表达情况。结果　MMP 2在 50例异位内膜组织中有表达者 41例 ,阳性表达率为 82 % ,而在 2 0例在位内膜组织中 ,有表达者 2例 ,阳性表达率为 1 0 % ,两组比较差异有极显著意义 (P <0 0 1 )。检测同时发现 ,MMP 2随EMs临床分期增高表达上调 ,TIMP 2则随临床分期增高表达下调 ,两者比较差异具有统计学意义 (P <0 0 5)。结论　MMP 2表达增强和TIMP 2表达下降 ,可能在EMs发生发展中发挥关键作用 ,两者表达的平衡失调程度可作为评估EMs进展及预后不良的指标。     

脑梗死患者基质金属蛋白酶1，9及其组织抑制因子1与血脂关系的研究

目的 探讨脑梗死患者基质金属蛋白酶1(MMP1)、基质金属蛋白酶9(MMP9)及其组织抑制因子1(TIMP1)与血脂、脑梗死面积的相互关系.方法 选择脑梗死患者40例,分别于发病后第1天、第3天、第7天采集肘静脉血,应用酶联免疫吸附法检测血清MMP1、MMP9及其TIMP1的浓度变化,并检测血脂的变化,通过头颅CT评估脑梗死的面积.结果 脑梗死患者MMP1、MMP9、TIMP1数值在检测不同的天数有不同改变,脑梗死面积增大,则MMP1、MMP9、TIMP1数值变大(P<0.05);血脂指标的改变在脑梗死入院后第7天内无明显变化.结论 脑梗死患者MMP1、MMP9、TIMP1在不同的时间窗存在一定规律的改变,三项血浆浓度与脑梗死面积表现为正相关系,但与患者的血脂无显著性关联.     

冬虫夏草对肾小球硬化大鼠肾脏组织抑制因子-1,2 mRNA表达的影响

肾小球硬化是多种慢性肾脏疾病进展至终末期肾衰的主要病理基础,在这一过程中,基质金属蛋白酶及其组织抑制因子失衡所致的细胞外基质的积聚发挥着重要作用[1].研究表明,冬虫夏草(Cordycepssinensis)能拮抗氨基糖甙类肾毒性;减少尿蛋白;改善CsA肾中毒大鼠的肾小管损害;延缓肾功能减退等等[2～5].但关于冬虫夏草在对肾小球硬化细胞外基质(ECM)积聚的影响尚未见报道.本研究利用5/6肾切除制备进行性肾小球硬化模型,观察了冬虫夏草水提取液对其的影响,以探讨冬虫夏草防治肾小球硬化的可能作用机制.