米非司酮药流时整合蛋白β3和细胞间粘附分子-1在蜕膜与绒毛内的表达

为了解米非司酮与米索前列醇对早孕流产的蜕膜、绒毛中整合蛋白 (Integrin)β3和细胞间粘附分子 1 (Intercellular adhesion molecule,ICAM 1 )的影响 ,应用流式细胞定性定量分析技术测定了 1 0例采用米非司酮与米索前列醇终止早孕妇女的蜕膜与绒毛组织中整合蛋白β3和 ICAM 1水平 ,并以 1 0例负压吸引人工流产者为对照。结果显示 :蜕膜与绒毛组织整合蛋白 β3和 ICAM 1均较对照组明显降低。实验组蜕膜组织整合蛋白 β3与 ICAM 1分别为 1 9.1± 5.0 1 %和 2 0 .6 1± 6 .51 % ,对照组分别为 2 9.3 1± 5.2 6和 2 6 .6 9± 6 .1 1 ;实验组绒毛组织整合蛋白β3与 ICAM 1分别为 2 1 .3 2± 4 .3 8%和 2 0 .2 9± 6 .4 9% ,而对照组则为 3 1 .3 1± 7.85和 2 8.6 9± 7.98。结果提示整合蛋白β3及 ICAM 1可能与维持早孕有关 ,米非司酮影响蜕膜、绒毛组织中整合蛋白 β3及 ICAM 1的表达 ,可能参与药物抗早孕机制。     

米非司酮对早孕蜕膜与绒毛转化生长因子β基因表达及血清肿瘤坏死因子α的影响

目的:了解米非司酮对早孕蜕膜和绒毛中转化生长因子β基因表达及血清肿瘤坏死因子α水平的影响,探讨来非司酮对母-胎界面及血清中细胞因子的调节作用。方法:应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定正常和服用米非司酮100 mg后的人早孕蜕膜和绒毛中转化生长因子β_1(TGF-β_1)及受体(TGF-β_1R)的基因表达;采用放射免疫法测定米非司酮应用前后血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。结果:服药组蜕膜中TGFβ_1及受体的基因表达比对照组明显下降(P<0.05),而服药组绒毛中TGFβ_1及受体的基因表达与对照组比较没有显著差异(P>0.05)。服药后血清TNF-α水平明显高于服药前(P<0.05)。结论:米非司酮抗早孕作用是多环节的,可能通过多种机理协同参与促进流产的发生。其中,米非司酮通过降调节蜕膜中TGF-β_1与TGF-β_1R的转录,提高血清TNF-α的水平,从母-胎界面局部至外周,使免疫刺激和抑制失调,导致母体对胚胎排斥而不利于妊娠的维持。     

转化生长因子β1β3及其受体βRⅠβRⅡmRNA在子宫肌瘤组织中的表达

目的　探讨转化生长因子 β1、β3 (TGF β1、β3 )及其受体 βRⅠ、βRⅡmRNA与子宫肌瘤发生发展的关系。方法　 2 0 0 0年 12月至 2 0 0 1年 11月采用免疫组化及原位杂交染色方法 ,对 30例子宫肌瘤及正常子宫肌组织标本检测TGF β1、β3 及其受体 βRⅠ、βRⅡmRNA的表达。 结果　 (1)子宫肌瘤组织中TGF β1、β3 蛋白表达强于邻近正常肌层 (P <0 0 1) ,且黄体期较卵泡期增高 (P <0 0 1)。TGF βRⅠ水平较邻近正常肌层亦增高 (P <0 0 1) ,TGF βRⅡ则下降 (P <0 0 5 )。 (2 )原位杂交TGF β1、β3 mRNA杂交信号的检测结果与免疫组化检测结果一致。结论　TGF β1、β3 与子宫肌瘤的发生发展密切相关 ,TGF βRⅡ降表达或表达异常可能是TGF βs促进子宫肌瘤发生发展的始动环节     

TGFβI及其受体在子宫内膜和早孕蜕膜中的表达及意义

目的　探讨转化生长因子 β1 (transforminggrowthfactorβ1 ,TGFβ1 )及受体Ⅰ、Ⅱ型 (TβRⅠ、TβRⅡ )在子宫内膜及早孕 (孕 3个月以内 )蜕膜组织的表达规律 ,了解其对子宫内膜生物学作用。 方法　应用免疫组织化学法 (SP法 )检测 2 5例增生期、 2 9例分泌期子宫内膜及 1 2例早孕蜕膜中TGFβ1及其受体的蛋白表达。结果　TGFβ1、TβRⅠ、TβRⅡ在早、中增生期腺体及间质细胞大多无表达或弱阳性 ,晚增生期三者染色强度明显增加 ,与早、中增生期相比 ,在腺上皮细胞染色有统计学意义 (P <0 0 1 )。TGFβ1及受体在中分泌期腺体和间质细胞表达丰富 ,与早分泌期比较TGFβ1均有统计学意义 (P <0 0 1 ) ,TβRⅠ、TβRⅡ仅在腺上皮细胞有统计学意义。晚分泌期三者表达强度较中分泌期相比下降 ,无统计学意义。三者在早孕蜕蟆腺体及蜕膜细胞均有强染色。结论　TGFβ1调节子宫内膜生长、分化 ,可能参与胚胎的着床过程 ,同时调节胚胎生长、发育。     

蜕膜转化生长因子-β mRNA表达与自然流产的相关性研究

目的 :探讨蜕膜转化生长因子 β(TGF β)mRNA表达与自然流产的相关性。方法 :采用斑点杂交和图象分析技术检测自然流产小鼠模型CBA/J×DBA/2蜕膜TGF βmRNA表达情况 (n =8) ,以正常妊娠小鼠模型CBA/J×BALB/c为对照 (n =8)。结果 :自然流产模型组胚胎丢失率为 30 .0 0 % (15 /5 0 ) ,显著高于正常妊娠小鼠模型组的 4 .5 4 % (3/6 6 ) ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。自然流产模型组蜕膜中TGF βmRNA表达的扫描灰度为4 4 .5 2± 9.2 8,明显低于正常妊娠模型组的 117.97± 3.11,差异有高度显著性 (P <0 .0 0 1)。结论 :蜕膜TGF βmRNA表达异常在自然流产发病中起重要作用。     

自然流产蜕膜及绒毛组织中钙网蛋白的表达及意义

目的:检测早期自然流产蜕膜及绒毛组织中钙网蛋白(CRT)和凋亡蛋白酶Caspase-3的表达及定位,初步探讨其在早期自然流产过程中的作用及相关性。方法:正常早孕者和早期自然流产者(先兆流产组、稽留流产组)行负压吸引人工流产术,取蜕膜及绒毛组织,HE染色比较其形态学变化,免疫荧光法检测CRT及Caspase-3的表达,统计学分析其相关性。结果:(1)CRT及Caspase-3在早期自然流产蜕膜及绒毛组织中表达高于正常早孕组;(2)稽留流产组蜕膜及绒毛组织中CRT及Caspase-3的表达均高于先兆流产组;(3)CRT与Caspase-3呈正相关。结论:CRT及Caspase-3异常表达可能参与早期自然流产的发生机制。     

高雄激素血症对子宫内膜功能的影响

目的探讨高雄激素对子宫内膜分泌功能的影响。方法对25例高雄激素血症分泌期子宫内膜与30例正常对照组分泌期子宫内膜,应用组织细胞学和免疫组织化学法研究其病理变化和转化生长因子β1(transforming growth factor—β1,TGF β1)及受体I型(TGF βRI)、受体Ⅱ型(TGFβRⅡ)的蛋白表达。研究组血睾酮(T)、雄烯二酮(A)较对照组升高,差异有显著性(P<0.01)。结果高雄激素组的分泌期内膜,20例(80％)表现为腺体分泌欠佳;对照组中4例(13.33％)为腺体分泌不良;二者比较差异有显著性(P<0.01)。对照组分泌期子宫内膜腺体或间质细胞胞浆有丰富TGFβ1及受体的蛋白表达,高雄组内膜TGF β1及受体表达均下降,与对照组比较TGFβ1及TGF βRⅡ在间质细胞表达下降有统计学意义(P<0.05)。结论高雄激素直接损伤子宫内膜分泌功能,是高雄激素引起不孕、习惯性流产的原因之一。     

米非司酮对人早孕绒毛及蜕膜中骨桥蛋白和绒毛膜促性腺激素-β表达的影响

目的:探讨米非司酮对早孕绒毛及蜕膜中骨桥蛋白(OPN)和绒毛膜促性腺激素-β(β-hCG)表达的影响。方法:采用免疫组化半定量法检测米非司酮药物流产(n=20)和人工流产(n=20)的早孕绒毛及蜕膜中的OPN(骨桥蛋白)和β-hCG的表达。结果:OPN和β-hCG在早孕妇女绒毛组织和蜕膜组织中的表达米非司酮组均显著低于手术流产组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:米非司酮可能抑制了早孕绒毛及蜕膜中OPN和β-hCG的合成,进而影响胚泡着床和胎盘的形成,使妊娠难以维持,最终流产。     

妊娠高血压综合征患者血浆及胎盘组织中TGFβ1的表达及临床意义

目的　探讨妊高征患者血浆及胎盘组织中转化生长因子 β1 (Transforminggrowthfactor-beta 1 ,TGFβ1 )的表达及其临床意义。 方法　用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测 6 4例妊高征患者 (妊高征组 )血浆TGFβ1含量 ,同时用免疫组化 (SABC)法测胎盘组织中TGFβ1表达水平 ,与 2 0例正常孕妇 (对照组 )作对比分析。结果　妊高征组血浆TGFβ1水平为 (4 0 6± 0 87)ng/ml,明显高于对照组 (1 82± 0 35 )ng/ml (P <0 0 1 ) ,妊高征组胎盘组织TGFβ1表达较对照组明显增高 (P <0 0 1 ) ,且随病情严重程度的增加而升高。 结论　妊高征患者TGFβ1的表达异常引起滋养细胞浸润不足 ,导致血压升高等变化 ,可能是妊高征的发病因素之一。     

TGFβ1、TGFβRⅠ、TGFβRⅡ在妊高征患者胎盘组织中的表达及临床意义

目的　探讨转化生长因子β1(transforming growth factor beta1,TGFβ1)及其受体(TGFbeta receptor, typeⅠand typeⅡ, TGFβRⅠ, TGFβRⅡ)在妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘组织中的表达及其临床意义。　方法　采用免疫组化 SABC法检测 64 例妊高征患者(轻度 21 例,中度20例,重度23例)胎盘组织中TGFβ1、TGFβRⅠ、TGFβRⅡ的表达,20例正常孕妇为对照组。　结果　妊高征组胎盘绒毛滋养细胞及蜕膜细胞 TGFβ1,TGFβRⅠ,TGFβRⅡ的阳性表达率均明显高于对照组(TGFβ1: 70 31%和 35 00%,P< 0.01; TGFβRⅠ: 76 56%和 50 00%,P< 0.05; TGFβRⅡ:79 69%和45 00%,P<0.01)。妊高征组轻、中、重度患者TGFβ1、TGFβRⅠ和TGFβRⅡ表达的阳性率分别为:TGFβ1:52 38%、75 00%和 82 61%;TGFβRⅠ:57 14%、85 00%和 86 96%;TGFβRⅡ:61 90%、85 00%和91 30%,并随病情程度增加而升高。TGFβ1的表达与胎盘重量及新生儿体重呈负相关。　结论　胎盘TGFβ1及TGFβRⅠ、TGFβRⅡ表达异常引起滋养细胞浸润不足,可能是妊高征的发病因素之一。     

米非司酮对早孕蜕膜肿瘤坏死因子-α及转化生长因子-β表达的影响

目的　探讨米非司酮对胚胎生长及蜕膜肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和转化生长因子-β（TGF-β）表达的影响。方法　30例不同孕龄的早孕药物流产妇女（药流组）,予口服米非司酮25mg,每日2次共3d,72h后加服米索前列醇600μg。另选取30例正常育龄人工流产妇女（人流组）做对照。采用免疫组化测定两组妇女蜕膜组织中TNF-α和TGF-β的表达程度及量化均值水平。结果　（1）人流组蜕膜组织中TNF-α和TGF-β阳性表达率分别为70.00%（21/30）和86.67%（26/30）;药流组蜕膜组织中TNF-α和TGF-β阳性表达率分别为73.33%（22/30）和86.67%（26/30）;两组间比较,差异无显著性（P>0.05）。（2）药流组蜕膜中TNF-α表达程度（+　+～+　+　+为9例）显著高于人流组（+　+～+　+　+为4例）,两组间比较,差异有显著性(P<0.05);药流组蜕膜中TGF-β量化均值为0.6667,显著低于人流组量化均值0.9167的水平(P<0.05)。结论　口服米非司酮药物流产妇女的蜕膜组织中,出现的TNF-α升高及TGF-β的降低,可能是蜕膜组织因子网络平衡状态紊乱的表现,米非司酮可能通过抑制TGF-β的活性,刺激TNF-α的分泌作用对胚胎发育产生不良影响。     

凝集素受体WGA、RCA和ECL在米非司酮流产绒毛及蜕膜组织中表达的研究

目的:通过麦胚凝集素(WGA)受体、蓖麻凝集素(RCA)受体和鸡冠珊瑚树凝集素(ECL)受体在米非司酮流产的绒毛及蜕膜组织中的表达,探讨米非司酮的抗早孕机理。方法:以生物素标记的凝集素WGA、RCA和ECL为探针,应用亲和组织化学染色法检测3种凝集素受体在米非司酮流产组(实验组)和人工流产组(对照组)早孕绒毛及蜕膜组织上皮细胞及其间充质细胞的分布。结果:实验组WGA受体、RCA受体和ECL受体在蜕膜组织上皮细胞的表达比对照组均显著降低(P0.01)。实验组ECL受体在绒毛上皮的表达显著低于对照组(P0.01),实验组WGA和RCA受体在绒毛上皮细胞的表达与对照组无显著差异(P0.05)。实验组3种凝集素受体在绒毛及蜕膜的间充质细胞的表达,与对照组无显著差异(P0.05)。结论:米非司酮可能通过下调蜕膜上皮组织中WGA受体、RCA受体和ECL受体的表达,阻碍胚胎发育而导致流产。     

The role of VEGF and its receptors in the etiology of early pregnancy loss

Objective: This study aimed to investigate the role of vascular endothelial growth factor (VEGF) and its receptors (VEGFR1, VEGFR2) in maternal and embryonic tissues in the etiology of early pregnancy loss.

Methods: Immunohistochemistry was used to analyze the expression of VEGF and its receptors in placental and decidual tissues of 80 women with spontaneous incomplete abortion (n?=?20), missed abortion (n?=?20), blighted ovum (n?=?20) and from early terminated pregnancies (n?=?20).

Results: Compared with the controls, all study groups showed weaker VEGF immunoreactivity in cytotrophoblasts and syncytiotrophoblasts of placental villi and endothelial cells of decidua (p?=?0.002, p?=?0.003, p?p?p?p?Conclusion: These results suggest that decreased expression of VEGFR1 in decidua and weaker VEGF and VEGFR2 expression in placental villi and decidua may be associated with early pregnancy loss.     

Interleukin-2 receptor positive cells in human decidua during the first trimester of pregnancy and their association with macrophages

Summary Maternal immune rejection of the fetus could sometimes be the cause of unexplained recurrent spontaneous abortion. Components of the T cell-mediated immunity were investigated in the first trimester of pregnancy in women having spontaneous abortion and compared to those with normal pregnancy having a termination on social grounds. Interleukin 2 (IL-2) had no proliferative effect on the trophoblasts of chorionic villi and there were also no IL-2 receptors in these cells. However IL-2 receptor positive cells were found in the decidua in 7 out of 24 women with normal pregnancy and in 12 out of 18 with spontaneous abortion. A high density of macrophages showed an association with IL-2 receptors in both groups. There were no differences with respect to T-cytotoxis cells and T-helper cells in cases of normal pregnancy (with and without IL-2 receptor positive cells), whereas in women having spontaneous abortion we found lower densities of T-helper and T-cytotoxic cells in those without IL-2 receptors than in those with IL-2 receptors.     

组蛋白去乙酰化酶1蛋白在早期自然流产绒毛和蜕膜组织中的表达

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)蛋白在早期自然流产发生中的病理生理作用及临床意义。方法:应用免疫组织化学和Western blot法检测早期自然流产和早期正常妊娠者绒毛及蜕膜组织中HDAC1蛋白的表达。结果:免疫组化示:HDAC1主要定位于绒毛细胞滋养细胞、合体滋养细胞和子宫蜕膜细胞、腺上皮细胞的胞核;早期自然流产绒毛组织中HDAC1的表达强度低于早期正常妊娠组,而蜕膜组织中,早期自然流产组织HDAC1的表达强度高于正常妊娠组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。Westernblot示:早期自然流产绒毛组织中HDAC1蛋白的相对表达量为1.38±0.63,明显低于正常妊娠组(1.92±0.82),差异有统计学意义(P<0.05);而早期自然流产蜕膜组织中HDAC1蛋白的相对表达量为1.02±0.53,明显高于正常妊娠组(0.71±0.36),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HDAC1在早期自然流产绒毛和蜕膜组织中的异常表达可能在早期自然流产的发生、发展中起重要作用。     

早期自然流产患者绒毛Notch受体mRNA和蛋白表达及与妊娠关系的初步探讨

目的:初步探讨早期自然流产患者绒毛Notch受体(Notch1、Notch2、Notch3、Notch4)mRNA及蛋白表达及对滋养细胞的调控作用。方法:用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应技术和免疫印迹法检测6例自然难免流产患者和12例正常早期妊娠妇女绒毛Notch1、Notch2、Notch3、Notch4的mRNA和蛋白的表达水平。结果:(1)自然流产组绒毛Notch1和Notch3 mRNA表达水平高于正常早期妊娠组(P<0.05);(2)Western-blot检测显示早期自然流产患者绒毛中Notch1、Notch2、Notch3受体蛋白的表达水平高于正常早期妊娠组(P<0.05)。结论:Notch受体蛋白在早期自然流产患者绒毛中表达上调,可能与自然流产的发病原因有关。     

胎盘绒毛血管生成状况及VEGF、MMP-2和MMP-9表达与早期自然流产的关系

目的:探讨VEGF、MMP2和MMP9表达变化对胎盘绒毛血管生成的影响及与早期自然流产的关系。方法:选用CD34作为微血管标记物,应用免疫组化检测30例早期自然流产病例(自然流产组)和20例早期人工流产病例(人工流产组)胎盘绒毛微血管密度(MVD);RT-PCR检测胎盘绒毛VEGFmRNA的表达;酶谱分析法测定MMP-2和MMP-9的表达。结果:自然流产组VEGF121mRNA表达及MVD均明显低于人工流产组(P<0.01)。相关分析显示,两组中VEGF121mRNA相对表达量与MVD值均呈显著正相关(rθ=0.9794,rλ=0.9183)。自然流产组酶原型MMP-9的表达量显著低于人工流产组(P<0.01),激活型MMP-2的表达量显著高于人工流产组(P<0.01)。结论:孕期胎盘绒毛内VEGF121mRNA低表达所致的血管生成障碍以及MMP-2和MMP-9表达失调可能共同参与了早期自然流产的发生发展过程。     

表皮生长因子及其受体与流产关系的探讨

采用放射免疫竞争抑制饱和分析法，检测４７例难免流产患者，６５例人工流产及２０例健康非孕妇女血清表皮生长因子（ＥＧＦ）水平；同时采用免疫组织化学法检测流产者胚胎组织中表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）表达程度。结果：人工流产组血清ＥＧＦ水平高于自然流产及非孕妇女，而自然流产与非孕妇女差异无显著性；胚胎组织中ＥＧＦＲ阳性表达率人工流产组明显高于自然流产组。提示：ＥＧＦ通过与其受体结合对妊娠维持、胚胎及胎儿的     

Expression and localization of tumor necrosis factor receptor 1 protein in the chorionic villi in early normal and spontaneous abortion

BACKGROUND: Increasing tumor necrosis factor alpha (TNFalpha) expression is found to be positively associated with spontaneous abortion. TNFalpha acts through the binding of two types of transmembrane receptors called TNFR1 and TNFR2. Here we compare membrane TNFR1 (mTNFR1) protein expression on chorionic villi in women with spontaneous abortion (SA) and viable pregnancy. METHODS: In a prospective study, 31 women with SA and 30 with a viable pregnancy were studied. Chorionic villous membrane TNFR1 was detected by confocal laser scanning microscopy and immunohistochemistry. RESULTS: The mTNFR1 protein is expressed in villous stromal, vessel endothelial, syncytiotrophoblast, and cytotrophoblast cells in early pregnancy. The intensity of mTNFR1 fluorescence (mean+/-S.D.) in villous stromal cells was higher in the abortion groups than in the control group (35.99+/-6.35 versus 32.64+/-5.01; p<0.05). In the abortion groups, villous cytotrophoblast cells were intensely positive for mTNFR1, whereas mTNFR1 staining of vessel endothelial and syncytiotrophoblast cells was significantly lower (p<0.001). CONCLUSION: Abundant mTNFR1 expression in the cytotrophoblast cells in women with SA may mediate TNFalpha to induce programmed cell death in the mTNFR1-expressing cytotrophoblasts to limit their growth. The over-expressing mTNFR1 in villous stromal cells, mediating TNFalpha effects, may cause pathological changes or tissue damage in chorionic villi locally in nonviable pregnancies.