肿瘤新生血管靶向的顺磁性长循环纳米脂质体的构建

目的 构建一种以肿瘤新生血管为靶向的顺磁性长循环纳米脂质体,并探讨其靶向肿瘤的能力。 方法 设计并采用FMOC（fluorenylmethyloxycarbonyl,FMOC）固相合成法合成RGD10肽（GARYCRGDCFDG）－赖氨酸-甘氨酸-甘氨酸（lysine-glycine-glycine,KGG臂）－棕榈酸（Pal）复合物;采用薄膜超声分散法制备包封MRI（magnetic resonance lmaging,MRI）造影剂GD-DTPA（Gadopentetate Dimeglumine）的血管靶向顺磁性长循环纳米脂质体（neovessel targeted PEGylated Gadopentetate Dimeglumine liposomes,T-PEG-GD LP）和普通顺磁性长循环纳米脂质体（PEGylated Gadopentetate Dimeglumine liposomes,PEG-GD-LP）,采用激光粒度分析仪和透射电子显微镜进行形貌表征测定,超滤离心法测定其包封率,MRI扫描测定其信号强度;为验证T-PEG-GD-LP与肿瘤组织的特异性亲和力,检测了HUVEC、A549细胞对其的摄取能力。结果 透射电子显微镜显示T-PEG-GD-LP、PEG-GD-LP均呈规则的圆形或略呈椭圆形,粒径检测结果显示其平均粒径小于100nm,MRI测定T-PEG-GD-LP信号强度介于GD-DTPA与PEG-GD-LP之间,HUVEC、A549两种细胞对T-PEG-GD-LP的摄取量均高于GD-DTPA和PEG-GD-LP（P<0.05）。结论 构建的肿瘤新生血管靶向顺磁性长循环纳米脂质体具有良好的肿瘤靶向能力,可成为一种新型有效的肿瘤靶向MRI造影剂。     

一种靶向肿瘤新生血管的新型长循环纳米脂质体的制备

目的:构建一种靶向肿瘤新生血管的长循环纳米脂质体,以期成为一种新型抗肿瘤药物载体.方法:采用9-芴甲氧羰基(fluorenylmethyloxycarbonyl, FMOC)固相合成法合成丙氨酸-脯氨酸-精氨酸-脯氨酸-甘氨酸(alanyl-prolyl-arginyl-prolyl-glycine, APRPG)肽-赖氨酸-甘氨酸-甘氨酸(lysine -glycine-glycine, KGG)臂-棕榈酸(palmitate, Pal)复合物;应用薄膜超声分散法制备靶向血管的长循环纳米脂质体(neovessel targeted-polyethylene glycol-liposomes, T-PEG-LP)和普通长循环纳米脂质体(polyethylene glycol-liposomes, PEG-LP),采用激光散射粒度分析仪检测其粒径分布,并在透射电子显微镜下观察其形貌特征;应用薄膜超声分散法制备罗丹明标记的血管靶向荧光长循环纳米脂质体(neovessel targeted-fluorescent-polyethylene glycol-liposomes, T-F-PEG-LP)和普通荧光长循环纳米脂质体(fluorescent-polyethylene glycol-liposomes, F-PEG-LP),通过荧光分光光度计和FCM检测其与人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)和人肺癌A549细胞的特异性结合力;同时,将该载体包封抗肿瘤药物紫杉醇(paclitaxel, PTX)制备紫杉醇长循环纳米脂质体(polyethylene glycol-paclitaxel liposomes, PEG-PTX-LP)和血管靶向的紫杉醇长循环纳米脂质体(neovessel targeted-polyethylene glycol-paclitaxel-liposomes, T-PEG-PTX-LP),应用荧光分光光度计和FCM检测HUVEC和A549细胞对其的摄取能力.结果:透射电子显微镜下观察到T-PEG-LP和PEG-LP均呈规则的圆形或略呈椭圆形,激光散射粒度分析仪检测其平均粒径＜100 nm;T-F-PEG-LP与HUVEC和A549细胞的结合能力均优于F-PEG-LP(P<0.05),2种细胞对T-PTG-PTX-LP的摄取量均高于市售紫杉醇溶液(Taxol)和PEG-PTX-LP(P<0.05).结论:构建的靶向血管的长循环纳米脂质体有望成为一种新型有效的肿瘤靶向药物载体.     

cRGD-氧化铁纳米粒的构建及应用于核磁共振成像诊断中的动物研究

目的:构建肿瘤靶向的核磁共振成像(magnetic resonance imaging, MRI)阴性造影剂纳米粒,并初步探讨其在肿瘤MRI中的应用.方法:化学共沉淀一步法制备超小型超顺磁性氧化铁(ultrasmall superparamagnetic iron oxide, USPIO)纳米粒.采用化学交联法将含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp, RGD)序列的环形短肽(cyclic RGD, cRGD)与USPIO共价结合,制备具有整合素α靶向作用的超顺磁性造影剂,并对其进行理化性质的检测.采用普鲁士兰染色法检测cRGD-USPIO和USPIO与人肺腺癌A549细胞及人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)的特异性结合能力.建立A549裸鼠移植瘤模型,尾静脉注射USPIO和cRGD-USPIO,行MRI检测,评价cRGD-USPIO对肿瘤MRI信号增强的作用.结果:成功制备获得cRGD-USPIO纳米粒,其核心纳米粒径为5～10 nm,平均粒径为(43.97±10.10)nm,比饱和磁化强度为59.94 A·m~2·kg~(-1).细胞结合实验结果提示,与USPIO组比较,cRGD-USPIO组阳性染色明显增强.动物体内MRI诊断结果显示,与USPIO组比较,cRGD-USPIO组肿瘤信号明显降低(P<0.01).结论:构建的靶向性超顺磁性氧化铁纳米粒可能成为一种新型的、具有肿瘤早期诊断特异性的MRI阴性造影剂.     

肿瘤靶向磁共振成像研究进展

以恶性肿瘤细胞或肿瘤组织表达的特定分子为靶点,采用相应的分子探针载体连接铁类或钆类磁共振对比剂,即磁共振肿瘤靶向对比剂.用于孵育体外培养的肿瘤细胞,以及经静脉注射到载瘤裸鼠体内.近年来许多研究者证实磁共振成像(MRI)能观察该类肿瘤靶向对比剂的靶向效果,有望实现恶性肿瘤的磁共振定性诊断,检测肿瘤靶向治疗效果,并指导临床选择合适的靶向化疗药.     

超小超顺磁性氧化铁粒子的靶向磁共振显影剂研究进展

超小超顺磁性氧化铁粒子(Ultrasmall superparamagnetic iron oxid, USPIO)作为MRI阴性显影剂因其较高的空间分辨率及低毒性近年来已逐渐投入临床使用。结合迅猛发展的分子影像学、高分子聚合物技术, 各种肿瘤靶向MRI显影剂受到广泛且深入的研究; USPIO结合不同肿瘤特异性的受体在肿瘤的早期诊断及疗效预测、肿瘤干细胞示踪等方面相比传统的钆螯合物MRI显影剂表现出巨大的潜力及优势。      

SPIO增强MRI成像在大鼠脾脏荷VX2肿瘤模型的实验研究

目的：建立大鼠脾脏VX2肿瘤模型，研究大鼠脾VX2肿瘤超顺磁性氧化铁（SP10）增强MRI上信号强度变化与病理学改变之间的关系。探讨SPIO在大鼠脾脏转移瘤的应用价值。方法：对8只脾脏荷VX2肿瘤模型鼠；静脉注射SP10后行MRI扫描，扫描序列采用T1WI（450／12ms）和T2WI（4000／128ms）。结果：平扫SET1WI上肿瘤-脾脏的对比噪声比极差，所有病灶均不能很好显示。SP10增强T2WI上正常脾实质信号强度明显降低，信号强度下降百分比（PSIL）为55．04％；脾脏VX2肿瘤信号强度无明显下降，PSIL为0．87％，与正常脾实质信号强度下降程度差异有统计学意义，t=3．879，P〈0．001。脾VX2肿瘤的CNR较增强前显著提高，t=6．963，P〈0．001。结论：SP10增强T1WI上正常脾实质与VX2肿瘤组织的对比差，病灶的检出率低，不利于描述病灶的特征。SPIO增强T2wI上脾脏-肿瘤的对比显著，提高了病灶的检出率，改善了病灶影像学特征的描述。     

肿瘤新生血管示踪剂RRL机制研究

[目的]研究新型血管示踪剂RRL与肿瘤来源内皮细胞结合的机制,研究血管内皮生长因子受体亚型2（VEGFR-2）是否为RRL与内皮细胞结合的靶点。[方法]设计合成纯度达到99%以上的小分子肽RRL,绿色荧光素FITC标记氨基端,培养VEGFR-2表达量不同的细胞系与RRL结合,激光共聚焦显微镜观察RRL结合不同细胞能力的差异。[结果]不同VEGFR-2受体表达量的细胞系结合RRL的能力也存在差异,差异有一致性。[结论]新型血管示踪剂RRL能够结合于高表达VEGFR-2受体的内皮细胞,VEGFR-2可能是RRL与肿瘤血管内皮细胞靶向结合的作用位点。     

SPIO增强MRI成像在大鼠脾脏荷 VX2 肿瘤模型的实验研究

目的:建立大鼠脾脏VX2肿瘤模型,研究大鼠脾VX2肿瘤超顺磁性氧化铁(SPIO)增强MRI上信号强度变化与病理学改变之间的关系.探讨SPIO在大鼠脾脏转移瘤的应用价值.方法:对8只脾脏荷VX2肿瘤模型鼠;静脉注射SPIO后行MRI扫描,扫描序列采用T1WI(450/12 ms )和T2WI(4 000/128 ms ).结果:平扫SET1WI上肿瘤-脾脏的对比噪声比极差,所有病灶均不能很好显示.SPIO增强T2WI上正常脾实质信号强度明显降低,信号强度下降百分比(PSIL)为55.04%;脾脏VX2肿瘤信号强度无明显下降,PSIL为0.87%,与正常脾实质信号强度下降程度差异有统计学意义,t= 3.879,P<0.001.脾VX2肿瘤的CNR较增强前显著提高,t= 6.963,P<0.001.结论:SPIO增强T1WI 上正常脾实质与VX2肿瘤组织的对比差,病灶的检出率低,不利于描述病灶的特征.SPIO增强T2WI 上脾脏-肿瘤的对比显著,提高了病灶的检出率,改善了病灶影像学特征的描述.     

超顺磁性氧化铁与肿瘤血管生成磁共振成像和靶向治疗研究

超顺磁性氧化铁(SPIO)具有磁靶向性好、低毒、灵敏和粒子小等特点,可定量评价肿瘤新生血管结构与功能,并可选择性地定位于肿瘤新生血管,发挥抗肿瘤血管生成分子靶向治疗的作用,是医学分子影像学中具有重要作用的选择性磁共振成像对比剂.     

血管内皮生长因子受体在恶性肿瘤中的研究进展

血管内皮生长因子受体（VEGFR）是血管内皮生长因子的特异性受体，包括VEGFR-1、VEGFR-2、VEGFR-3、神经纤维因子-1及神经纤维因子-2。前三者是酪氨酸激酶亚家族的成员之一，具有特征性的胞外区和酪氨酸激酶区，通过与相应的VEGF结合刺激血管内皮细胞增殖、迁移、促进新生血管的生成，与机体多种常见肿瘤的发病和转移有着密切的关系。本文就VEGFR家族成员、基因结构及其与肿瘤的关系做一系统综述。