~(14)C-醋酸棉酚在大鼠睾丸中亚细胞定位的电镜放射自显影研究(摘要)

<正> 棉酚的抗精子作用,在细胞水平上是以变态期精子细胞和中、晚期精母细胞受损而实现的,而在亚细胞水平上则以线粒体损伤最剧。放射化学研究表明,~(14)C-棉酚在大鼠睾丸5种亚细胞组分中以线粒体含量最高。本研究旨在以电镜放射自显影技术探讨棉酚的亚细胞作用位点,进一步阐明棉酚的生物学作用机理。     

不同旋光异构体棉酚对睾丸支持细胞的影响

研究不同旋光异构体棉酚对体外培养大鼠睾丸中支持细胞的影响。观察到不同旋光异构体棉酚均能引起支持细胞形态产生变化,细胞器中以线粒体变化最明显,表现为SDH活性减弱,有些酶粒变粗,电镜下看到线粒体肿胀,嵴排列不规则,甚至断裂或消失。细胞受损伤程度按( )<(±)<(-)棉酚程序。上述变化与口服棉酚大鼠睾丸中支持细胞变化相似。     

~(14)C-棉酚在大鼠睾丸亚细胞组分中的定量分布及作用位点的研究

~(14)C-棉酚在大鼠睾丸五种亚细胞组分中,以线粒体中含量最高,放射活性较其他组分高2～3倍,差别显著。~(14)C-棉酚和~3H-哇巴因双标记实验也表明,双标记的放射活性高峰均集中于线粒体,其次为细胞膜。这二种细胞组分的~(14)C和~3H放射活性均分别较其他组分高,差异显著。这有力地支持线粒体蛋白质容易与解偶联物质结合的论点,并为线粒体是棉酚的敏感靶子细胞器以及棉酚通过干扰线粒体功能而中断精子发生过程的假说提供了直接证据。     

甲酸棉酚、醋酸棉酚对大鼠睾丸LDH_x的影响

许多动物实验证实,棉酚主要作用在变态过程的精子细胞以发挥其抗生育作用。据国内外资料报道,在成熟的哺乳动物及部分鸟类的生精细胞内有一种乳酸脱氢酶同功酶LDH_x。该酶的出现及活力高低直接与睾丸的生精过程密切相关。本实验用醋酸纤维薄膜电泳法分析了甲酸棉酚和醋酸棉酚对大鼠睾丸LDH_x的影响,借以探讨棉酚的抗生育作用与LDH_x活性的关系。材料和方法选用体重250克左右雄性Wistar大鼠25只,随机分三组:一、甲酸棉酚组,10     

棉酚的药理、化学研究

1971年10月,我所药理室对棉酚进行了抗生育实验,实验结果说明棉酚有破坏雄性大鼠和小鼠睾丸生精上皮的作用,引起雄鼠的不育。此后,我所对棉酚进行了系统的药理和化学研究。研究内容和结果如下:棉酚在雄大鼠有很强的抗生育活性,可破坏精子、精子细胞和精母细胞,引起精子死亡,直至副睾中无精子,产生不育效果。停服棉酚后生育功能可逐渐恢复。但如持续给大鼠棉酚可引起睾丸萎缩、精原细胞死亡、生育力不能恢复。长期给大鼠棉酚还可使副睾体部管腔狄窄、上皮呈假复层增厚,组化染色性质改变。在体外     

男用口服避孕药棉酚临床试用中精液脱落细胞的研究(摘要)

有关醋酸棉酚抑制实验动物精子发生和作为男用避孕药进行临床试验研究已有过不少报告。已知棉酚可破坏大鼠的精子及精子细胞,临床健康人每日服20毫克醋酸棉酚,连服50天可使精子数降到400万/每毫升以下。毒付作用不明显,避孕效果可靠。但棉酚对人睾丸曲细精管生精上皮的作用过程、环节及破坏程度是否也和大鼠一样,尚未进行过细致的研究。本研究的目的是试图通过对服药后人精液中脱落细胞的动态观察,分析     

棉酚短期给药对小鼠的生殖毒性和肾毒性具有可逆性

目的 研究棉酚短期给药对小鼠睾丸和肾脏的影响,同时探究该影响是否具有可逆性。方法 将20只7～8周雄性小鼠随机分成4组：空白对照组、溶剂对照组、棉酚给药组和停药组,分别给与纯化水、1%羧甲基纤维素钠水溶液、30 mg/mL棉酚溶液和30 mg/mL棉酚溶液,每只小鼠每天灌胃1次,0.3 mL/次,连续灌胃14 d后。将空白对照组、溶剂对照组、棉酚给药组小鼠处死,取组织样本;停药组小鼠停止给药,纯化水灌胃14 d后处死,取组织样本。睾丸组织进行称重、HE染色和PAS染色;肾脏组织进行HE染色和线粒体ATPase活力检测。结果 与对照组相比,棉酚给药组小鼠睾丸生精上皮层细胞的数量明显减少,生精小管变圆,生精小管之间空隙明显变大,睾丸间质萎缩,精原细胞分化不完全,无长形精子细胞,大量细胞处于圆形精子细胞状态,顶体PAS反应阴性。肾脏弥漫性系膜细胞增生,系膜基质增多,与肾小囊壁层粘连,肾小囊腔明显缩小甚至消失;肾脏线粒体ATPase活力降低（P<0.001）。停药组与棉酚给药组相比,睾丸和肾脏形态结构、顶体PAS反应及线粒体ATPase活力均有不同程度的恢复。结论 棉酚短期给药处理后出现...     

棉酚对人抗生育效应的研究 精液的细胞学观察

棉酚的抗生育效能,首先是在我国民间食用粗制生棉子油的人群中发现的,本院中山医院曾作过详细的调查。中国医学科学院的大鼠实验报告,观察到棉酚对睾丸精子发生具有明显的抑制与损害作用。上海第六人民医院的研究中看到,食用棉子油可以影响人睾丸的生殖上皮。由于棉酚抗生育效果良好,引起了人们的关注。自1973年以来,     

合并应用甾体激素与低剂量棉酚对雄性大鼠的护一育效果 …

目的 论证甾体激素与低剂量棉酚组合用药的雄性抗生育作用的可行性作用机制。方法 用低剂量棉酚１２ｍｇ／ｋｇ（ｋｄ．ｄ）,甲基睾丸素２０ｍｇ（ｋｇ．ｄ）,炔璃００μｇ／（ｋｇ．ｄ）喂服Ｗｉｓｔａｒ大鼠６周,部分取工始合笼;继续用棉酚１２ｍｇ／（ｋｇ．ｄ）维持１２周,部分取材,余下大鼠停药,观察恢复情况。取材做大鼠睾丸精子计数,精子活动度,睾丸切片的形态学观察等。结果 用药６周大鼠的生精过程受到不完全抑     

(±)、(+)、(-)棉酚对大鼠离体睾丸间质细胞作用的研究

采用CPBA和RIA方法观察(±),(+),(-)棉酚对大鼠离体睾丸间质细胞的作用,结果表明:(±)和(-)棉酚可明显抑制间质细胞的AC活性,(-)棉酚抑制作用明显大于(±)棉酚;两者均能明显降低间质细胞cAMP、PGE和睾丸酮的含量,降低cAMP/cGMP,PGE/PGF的比值。(+)棉酚仅在高浓度时才可抑制间质细胞的AC活性及降低cAMP含量,而对PGE,睾丸酮的含量及cAMP/cGMP,PGE/PGF比值的影响则无显著性意义。     

棉酚对正常男性精子影响的电子显微镜观察

关于棉酚的抗男性生育作用己有实验研究及临床观察,也做了实验动物睾丸的电镜观察。本研究主要观察服棉酚后人体精子超微结构的变化,进一步了解棉酚抗生育作用的原理。     

棉酚对体外人肥大前列腺成纤维细胞的作用

棉酚对体外人肥大前列腺成纤维细胞的生长、ＤＮＡ合成及形态学的作用结果表明：棉酚可以明显地抑制细胞的生长，且抑制作用与时间－剂量相关：用３Ｈ－胸腺嘧啶掺入法测定细胞的ＤＮＡ合成，结果也相同：细胞超微结构的改变主要为细胞质空泡化，内质网、线粒体的损害和核固缩，其中线粒体对棉酚最为敏感，损害最明显。作者还对棉酚抑制体外人肥大前列腺成纤维细胞增殖的作用机理及棉酚用于治疗前列腺肥大症的可能性进行了初步的探讨。     

棉酚对体外人肥大前列腺成纤维细胞的作用

棉酚对体外人肥大前列腺成纤维细胞的生长、ＤＮＡ合成及形态学的作用结果表明：棉酚可以明显地抑制细胞的生长，且抑制作用与时间－剂量相关；用＾３Ｈ－胸腺嘧啶掺入法测定细胞的ＤＮＡ合成，结果也相同；细胞超微结构的改变主要为细胞质空泡化，内质网、线粒体的损害和核固缩，其中线粒体对棉酚最为敏感，损害最明显。作者还对棉酚抑制体外人肥大前列腺成纤维细胞增殖的作用机理及棉酚用于治疗前列腺肥大症的可能性进行了初步的探     

棉酚在大鼠体内的浓度与睾丸损伤的关系

棉酚的抗生育效果早已肯定,但停药后生育力的恢复却有较明显的个体差异,约有1/3大鼠在灌服棉酚並长期停药后其曲细精管仍处于萎缩状态。为了解睾丸对棉酚敏感性的个体差异以及设法防止棉酚造成生精上皮不可逆的损伤,对棉酚在血液中的浓度与睾丸萎缩的关系进行了观察。     

棉酚对纯化LDH-X作用的分析

用纯化的大鼠LDH-X和LDH 1～5,以定量测定酶活性和凝胶电泳相配合的分析方法,发现棉酚对LDH-X的抑制作用显著大于LDH1～5,与在人体内的试验结果基本一致,再次证实了棉酚对LDH-X的抑制有特异性,进一步明确通过抑制精子特异的LDH-X酶,中断 精子的能量供给,损害线粒体功能,阻断生精过程是棉酚抗生育作用机理的一个重要方面。     

棉酚对雄性大鼠的抗生育作用

棉酚对雄性大鼠有明显的抗生育作用。大鼠口服棉酚12毫克/公斤/天5周,24毫克/公斤/天5周和12毫克/公斤/天12周,仃药时大鼠附睾和输精管精子全部死亡,仃药后抗生育作用可维持4～6周。上述棉酚剂量对雄大鼠的抗生育作用是可逆的。棉酚的抗生育效果和剂量、疗程有关。幼年大鼠口服棉酚10毫克/公斤/天18周,对其生长发育无明显影响,抗生育剂量棉酚对大鼠无明显毒性。     

棉酚及其衍生物抗肿瘤机制的研究进展

棉酚具有多种药理活性,近年来其抗肿瘤作用越来越受到重视。棉酚的抗肿瘤机制尚未完全明确,通过体外和动物实验及一些初步的临床试验证实,棉酚的抗肿瘤机制有线粒体途径、调控细胞的周期蛋白、抑制Bcl-2蛋白的过度表达。亦有研究表明棉酚可以通过使高甲基化的抑癌基因去甲基化达到抗肿瘤作用。     

醋酸棉酚对大鼠睾丸作用的超微结构观察

醋酸棉酚给药4周后,大鼠睾丸晚期精子细胞螺旋鞘线粒体肿胀、空泡化,轴丝体裸露。中、早期精子细胞和初级精母细胞线粒体肿胀、空泡化,数目减少,伴内质网扩张。另见中期头帽,顶体肿胀,或出现裂隙。早期高尔基体空泡化,顶体颗粒退化。支持细胞多形线粒体增多,脂滴、溶酶体增多,其后内质网明显扩张。给药8周后,部分精原细胞线粒体亦受损,核膜皱缩或破损。支持细胞间的紧密联接复合体结构大部分丧失。间质细胞的超微结构未见明显变化。     

醋酸棉酚对血浆孕酮和子宫平滑肌的作用

醋酸棉酚能兴奋雌激素化小鼠和豚鼠的离体子宫,对孕激素化或妊娠小鼠和豚鼠的离体子宫无明显影响。给妊娠大鼠灌服醋酸棉酚能使子宫自发收缩明显提高,该作用可被消炎痛拮抗。经醋酸棉酚处理的妊娠大鼠的离体子宫平滑肌对15-Me-PGF_2α的反应比对照组明显提高,醋酸棉酚能降低妊娠大鼠和超排卵大鼠血浆孕酮浓度。结果提示醋酸棉酚兴奋子宫平滑肌作用为雌激素促进;孕激素抑制,促进妊娠大鼠子宫自发收缩可能与其在卵巢水平降低血浆孕酮水平,及促进内源性前列腺素释放有关。     

大鼠烫伤早期肝线粒体ATP合成酶和腺苷酸激酶活性的改变

为进一步了解大鼠烫伤早期肝线粒体氧化磷化偶联增强的机理，应用荧光素和荧光素酶法，以琥珀酸为底物，测定了烫伤３０ｍｉｎ大鼠肝线粒体合成酶和腺苷酸激酶的活性。