~(14)C-醋酸棉酚在大鼠睾丸中亚细胞定位的电镜放射自显影研究(摘要)

<正> 棉酚的抗精子作用,在细胞水平上是以变态期精子细胞和中、晚期精母细胞受损而实现的,而在亚细胞水平上则以线粒体损伤最剧。放射化学研究表明,~(14)C-棉酚在大鼠睾丸5种亚细胞组分中以线粒体含量最高。本研究旨在以电镜放射自显影技术探讨棉酚的亚细胞作用位点,进一步阐明棉酚的生物学作用机理。     

14C—棉酚在大鼠睾丸亚细胞组份中定位分希的初步观察(简报)

我们进一步分析~(14)C-棉酚在睾丸生精细胞亚细胞组份内的定位分布。~(14)C标记在棉酚的甲酰位,比放射性为12.70微居里/毫克。于第1、4日分别给健康雄性大鼠灌服~(14)C-棉酚50微居里/389毫克并于第7、9、11日杀死取材,分别测定五种亚细胞组份的~(14)C-棉酚分布和蛋白质含量(见下表)。     

棉酚对大鼠支持细胞蛋白质合成的影响

本文以同位素放射自显影方法测定了棉酚对大鼠支持细胞(sertoli cell)蛋白质合成过程中亮氨酸参入活动的影响。实验组及对照组各有大鼠20及10只,实验组取醋酸棉酚(30mg/kg/d)以混悬液灌服,服药第 4及 6周各取实验及对照10及 5只,断头处死并取睾丸分离培养支持细胞,对照组培养液内分别加入棉酚0、2、5、8μg/ml,取培养96小时已成单层的各组细胞(以不加棉酚组为对照),分别测定各组细胞~(14)C-亮氨酸放射自显影结果。结     

不同旋光异构体棉酚对睾丸支持细胞的影响

研究不同旋光异构体棉酚对体外培养大鼠睾丸中支持细胞的影响。观察到不同旋光异构体棉酚均能引起支持细胞形态产生变化,细胞器中以线粒体变化最明显,表现为SDH活性减弱,有些酶粒变粗,电镜下看到线粒体肿胀,嵴排列不规则,甚至断裂或消失。细胞受损伤程度按( )<(±)<(-)棉酚程序。上述变化与口服棉酚大鼠睾丸中支持细胞变化相似。     

~(14)C—醋酸棉酚在大鼠体内代谢的研究

(一)大鼠内分布、定位的整体及组织放射自显影的动态观察(摘要)以~(14)C 标记的醋酸棉酚喂饲成年雄性大鼠,一次口服组的剂量为94微居里/35毫克/动物;累加服药(每日连续口服)组为4.45微居里/日/动物。分别于服药后不同时期取材制成整体及组织放射自显片。追踪标记棉酚在体内各脏器和组织中的吸收、分布和累积的定位变化动态。相应的组织切片用 H·E 染色,作细胞病理观察。结果摘述如下:     

化学致癌物、抗致癌物检测技术的基础和应用研究

本研究由于它的创新设计获1991年度卫生部科技进步一等奖。已在国内外发表论著33篇。主要内容有:1.非程序性 DNA 合成试验的改进本改进法以~(14)C胸苷预标记的同步化培养细胞为测试细胞,从而在测量非程序性DNA合成的~3H-胸苷掺入的比放射活性时可省略繁杂的DNA定量测定而以~3H/~(14)C放射活性比代替。使这个唯一     

互隔交链孢霉提取物261—B_2—3诱发人羊膜FL细胞UDS的研究

本文应用互隔交链孢霉261株提取物261—B_2—3诱发人羊膜FL细胞UDS,以研究其致突变性。按余应年等的方法,在~(14)C—TdR预标记的FL细胞中由提取物引起酸不溶性组分的HU抗性非程序性~3H—TdR掺入。用液闪计数器测量。以放射比~3H/~(14)C为UDS水平的反     

棉酚对大鼠及豚鼠肾细胞膜Na-K-ATP酶影响的研究

本文对喂服不同剂量棉酚后大鼠和豚鼠肾皮质细胞膜组分中的Na-K-ATP酶的活性变化进行了分析。结果表明:大鼠及豚鼠喂服棉酚(5mg/d×56、10mg/d×28、15mg/d×48)后,肾皮质细胞膜组分中与Na-K-ATP酶特异结合的~3H-哇巴因的量,随棉酚药量增加而有减少趋势,但服药组与对照组之间的差别无显著意义。但当豚鼠喂服棉酚与不同饲料(20mg/d+低钾饲料40～60mg/d+常规饲料)后,肾细胞膜及匀浆的Na-K-ATP酶活力,     

固定量放射配基结合法在棉酚作用机制研究中的应用

采用固定量放射配基结合法(FCRRA)研究棉酚对~3H-哇巴因与其受点结合动力学的影响,并与经典的饱和配基结合法(SRRA)相比较。两者的结果一致,都显示棉酚可降低Kd和Bmax值,其作用方式为反竞争型抑制。但前者的线性相关系数较后者优,并有不必用大量放射配基和操作方便等优点。     

十六种~(14)C全标记氨基酸的生物合成

利用小球藻进行光合作用,使放射性~(14)CO_2参入到细胞体内,再从~(14)C标记的小球藻细胞体中提取蛋白质,经水解、分离、提纯和鉴定,得到十六种~(14)C-全标记氨基酸。产品为层析放化纯(纯度>99.5％),比放射性与法、意、比三国联营公司的同年产品相当。投入原料B_a~(14)CO_399mCi,得21.2mCi~(14)C-全标记氨基酸,利用第一次培养小球藻的废液再培养又获得11.5mCi~(14)C-小球藻蛋白质水解液,两者产率32.7％。     

棉酚及其衍生物抗肿瘤机制的研究进展

棉酚具有多种药理活性,近年来其抗肿瘤作用越来越受到重视。棉酚的抗肿瘤机制尚未完全明确,通过体外和动物实验及一些初步的临床试验证实,棉酚的抗肿瘤机制有线粒体途径、调控细胞的周期蛋白、抑制Bcl-2蛋白的过度表达。亦有研究表明棉酚可以通过使高甲基化的抑癌基因去甲基化达到抗肿瘤作用。     

棉酚对蛋白质代谢的影响

棉酚具有抗生育作用,同时对动物有些毒副作用,为了分析棉酚代谢性质和毒性作用之间的关系,本实验通过整体自显影实验方法,观察棉酚对蛋白质对代谢的影响。结果说明,棉酚对~(14)C标记氨基酸的参入有一定的影响,棉酚对动物某些器宫蛋白质代谢有一定的作用,     

丹皮酚的吸收、分布、代谢及排泄

丹皮酚(Paeonol)是牡丹皮的主要成分,也是牡丹酚原甙(Paeonolide)、丹皮甙(Paeonoside)等的组成成分。至今已报告丹皮酚只有抗致兰尾炎菌作用,中枢抑制作用(镇痛、镇静作用)和抗炎症等作用。本文用~(14)C标记丹皮酚投与大鼠、追踪~(14)C的放射能,观察吸收到机体内的丹皮酚的归宿情况。     

棉酚对大鼠睾丸线粒体氧化磷酸化影响的研究

用Warburg测压法和Clark氧电极法观察了棉酚对大鼠睾丸线粒体呼吸及氧化磷酸化的影响,表明棉酚能抑制正常大鼠睾丸线粒体的呼吸及氧化磷酸化作用,是一种解偶联剂。大鼠日服6、10和15毫克醋酸棉酚,连续21天,睾丸线粒体的P/O值比对照组均有显著下降。文中讨论了棉酚的解偶联作用及其在线粒体的作用位点问题。     

中国医学科学院1983年主要科研进展

现将1983年重点科研进展情况汇总如下: 一、计划生育的研究: (一)棉酚的研究 1.首次建立了用高压液相分离加电化学方法测定体液中微量棉酚的方法。还建立了~(125)Ⅰ棉酚一组氨酸、~(125)Ⅰ棉酚-白蛋白标记测定法,并获得了标记率和结合率的初步结果。     

~3H-TdR前标记法检测巨噬细胞细胞毒活性及其条件分析

本文介绍了以收集~3H-TdR前标记靶细胞为指标的检测巨噬细胞细胞毒活性的方法,并对其条件进行了分析。选用小鼠腹腔渗出性巨噬细胞,经24小时激活后,与~3H-TdR标记好的靶细胞共育24小时,收集细胞,测定细胞中残存放射量。从放射量(cpm)的减少来计算杀伤活性。实验表明,衣法结果准确、稳定、简便易行,而且无自发释放和~3H-TdR再利用问题。     

慢性胃炎与胃癌的细胞动力学研究

以氚-胸腺嘧啶核苷(~3H—TdR)体外参入慢性胃炎和胃癌牯膜,用放射自显影术测定细胞周期参数。 胃粘膜的标记率代表上皮细胞的增殖率,标记率随胃粘膜的病变不同而异,与病变部位无关。伴有肠化生的萎缩性胃炎与胃癌在高增殖率和增殖区向表面扩展这两方面部十分相似。 用体外双标记法测定细胞周期参数T_2和T_c。胃癌细胞群体的S期时间较萎缩性胃炎延长。癌旁组织的S期时间较萎缩性胃炎缩短。其意义有待进一步研究。     

附子理中汤对脾阳虚大鼠轴浆运输及腺苷酸转移酶活性的影响

目的 观察并讨论附子理中汤对脾阳虚大鼠轴浆运输及腺苷酸转移酶活性的影响.方法 Wistar大鼠50只分为对照组,模型组,附子理中汤低剂量组、中剂量组、高剂量组共5组,每组10只.在模型组基础上,低剂量组按5ml/kg灌胃给药,中剂量组按10ml/kg灌胃给药,高剂量组按20ml/kg灌胃给药,每天1次,连续4周.用辣根过氧化酶(HRP)标记示踪法检测轴浆运输能力,[3H]-ADP法检测线粒体腺苷酸转移酶(ANT)转运活性.结果 与对照组比较,模型组HRP标记细胞数及ANT活性均显著降低(P＜0.01);与模型组比较,中剂量组HRP标记细胞数及ANT活性均升高(P＜0.05),高剂量组HRP标记细胞数及ANT活性均显著升高(P＜0.01).结论 “脾主运”功能与能量代谢有关,附子理中汤可能通过调节能量代谢面恢复“脾阳健运”状态.     

棉酚对小鼠睾丸生精细胞凋亡影响的实验研究

目的　研究棉酚对小鼠睾丸生精细胞凋亡的影响。方法　选昆明种雄性小鼠 2 0只 ,随机分成对照组和服棉酚组 ,采用核固红—结晶紫染色法 ,对比观察小鼠睾丸生精细胞凋亡数目的变化。结果　服棉酚组小鼠睾丸生精细胞凋亡的数目 (3 0 .5 7± 3 .0 3 )较对照组 (6.3 8± 1 .41 )明显增多 (P <0 .0 1 )。结论　棉酚可促使小鼠睾丸生精细胞的凋亡数目增加 ,造成睾丸生精功能受损     

低剂量电离辐射诱导小鼠睾丸生精细胞线粒体结构、ATPase 活性及钙离子浓度的变化

目的：观察0.025~0.200 Gy X线低剂量电离辐射后3~24 h小鼠生精细胞线粒体结构、睾丸组织内ATPase和生精细胞钙离子浓度的变化,阐明线粒体结构与相关生物学功能改变在调控凋亡中的作用。方法：透射电镜检测小鼠睾丸生精细胞线粒体结构的改变;蛋白酶法检测ATPase活性的改变;以Fluo-3为探针,流式细胞术检测钙离子浓度（［Ca²⁺］i）的变化。结果：0.075 Gy照射后12 h,小鼠精原细胞与精母细胞线粒体肿胀、空泡化、嵴断裂;精子细胞核固缩,顶体囊泡结构模糊,核膜结构不清楚,线粒体空泡化。0.025~0.200 Gy照射后12 h,睾丸组织中Na⁺-K⁺-ATPase活性较0 Gy照射降低,其中0.050~0.200 Gy较0 Gy显著降低（P< 0.05）,Ca²⁺-ATPase活性均较0 Gy照射显著降低（P< 0.05）;生精细胞中［Ca²⁺］i也具有同样的剂量-效应关系,其中0.075 Gy照射后,较0 Gy显著降低（P< 0.05）。0.075 Gy照射后3~24 h,睾丸组织中Na⁺-K⁺-ATPase活性较0 h均显著降低（P< 0.05）;Ca²⁺-ATPase活性在3 h稍有升高后,6~24 h较0 h均显著降低（P< 0.05）;生精细胞中［Ca²⁺］i也具有相似的时程-效应关系。结论：低剂量电离辐射能够诱导小鼠睾丸生精细胞线粒体结构的改变;同时,其诱导ATPase活性和［Ca²⁺］i的变化具有剂量-效应与时程-效应规律性。