~(14)C-棉酚在大鼠睾丸亚细胞组分中的定量分布及作用位点的研究

~(14)C-棉酚在大鼠睾丸五种亚细胞组分中,以线粒体中含量最高,放射活性较其他组分高2～3倍,差别显著。~(14)C-棉酚和~3H-哇巴因双标记实验也表明,双标记的放射活性高峰均集中于线粒体,其次为细胞膜。这二种细胞组分的~(14)C和~3H放射活性均分别较其他组分高,差异显著。这有力地支持线粒体蛋白质容易与解偶联物质结合的论点,并为线粒体是棉酚的敏感靶子细胞器以及棉酚通过干扰线粒体功能而中断精子发生过程的假说提供了直接证据。     

不同旋光异构体棉酚对睾丸支持细胞的影响

研究不同旋光异构体棉酚对体外培养大鼠睾丸中支持细胞的影响。观察到不同旋光异构体棉酚均能引起支持细胞形态产生变化,细胞器中以线粒体变化最明显,表现为SDH活性减弱,有些酶粒变粗,电镜下看到线粒体肿胀,嵴排列不规则,甚至断裂或消失。细胞受损伤程度按( )<(±)<(-)棉酚程序。上述变化与口服棉酚大鼠睾丸中支持细胞变化相似。     

14C—棉酚在大鼠睾丸亚细胞组份中定位分希的初步观察(简报)

我们进一步分析~(14)C-棉酚在睾丸生精细胞亚细胞组份内的定位分布。~(14)C标记在棉酚的甲酰位,比放射性为12.70微居里/毫克。于第1、4日分别给健康雄性大鼠灌服~(14)C-棉酚50微居里/389毫克并于第7、9、11日杀死取材,分别测定五种亚细胞组份的~(14)C-棉酚分布和蛋白质含量(见下表)。     

棉酚对体外人肥大前列腺成纤维细胞的作用

棉酚对体外人肥大前列腺成纤维细胞的生长、ＤＮＡ合成及形态学的作用结果表明：棉酚可以明显地抑制细胞的生长，且抑制作用与时间－剂量相关；用＾３Ｈ－胸腺嘧啶掺入法测定细胞的ＤＮＡ合成，结果也相同；细胞超微结构的改变主要为细胞质空泡化，内质网、线粒体的损害和核固缩，其中线粒体对棉酚最为敏感，损害最明显。作者还对棉酚抑制体外人肥大前列腺成纤维细胞增殖的作用机理及棉酚用于治疗前列腺肥大症的可能性进行了初步的探     

棉酚对体外人肥大前列腺成纤维细胞的作用

棉酚对体外人肥大前列腺成纤维细胞的生长、ＤＮＡ合成及形态学的作用结果表明：棉酚可以明显地抑制细胞的生长，且抑制作用与时间－剂量相关：用３Ｈ－胸腺嘧啶掺入法测定细胞的ＤＮＡ合成，结果也相同：细胞超微结构的改变主要为细胞质空泡化，内质网、线粒体的损害和核固缩，其中线粒体对棉酚最为敏感，损害最明显。作者还对棉酚抑制体外人肥大前列腺成纤维细胞增殖的作用机理及棉酚用于治疗前列腺肥大症的可能性进行了初步的探讨。     

棉酚及其衍生物抗肿瘤机制的研究进展

棉酚具有多种药理活性,近年来其抗肿瘤作用越来越受到重视。棉酚的抗肿瘤机制尚未完全明确,通过体外和动物实验及一些初步的临床试验证实,棉酚的抗肿瘤机制有线粒体途径、调控细胞的周期蛋白、抑制Bcl-2蛋白的过度表达。亦有研究表明棉酚可以通过使高甲基化的抑癌基因去甲基化达到抗肿瘤作用。     

醋酸棉酚对人体精子的影响——精子的细胞学、细胞化学及电镜的观察

精子计数与细胞学分析结果表明,口服棉酚四周后畸形率增高者不多,而八周后在精子数目剧减的同时,涂片内脱落生精细胞明显增多,反映了棉酚作用部位主要为精子发生过程中的变态期精子细胞和中、晚期精母细胞。服用棉酚后可引起精子中段琥珀酸脱氢酶活性减弱及线粒体超微结构的损伤,表明棉酚对精子能源代谢有一定抑制作用,但对精子顶体溶     

棉酚对人子宫肌瘤及子宫壁平滑肌细胞超微结构的影响

棉酚治疗某些妇科疾患的疗效已经肯定。子宫肌瘤合并月经量增多患者经棉酚治疗后肌瘤明显缩小,其机理尚无报道。本文电镜观察棉酚对子宫肌瘤和子宫壁平滑肌细胞超微结构均有影响,服用棉酚治疗后,肌细胞核周间隙加宽;线粒体肿胀;粗面内质网扩张和胞质内出现脂滴。通过这种改变进一步探讨棉酚的作用机理。     

~(14)C—醋酸棉酚在大鼠体内代谢的研究

(一)大鼠内分布、定位的整体及组织放射自显影的动态观察(摘要)以~(14)C 标记的醋酸棉酚喂饲成年雄性大鼠,一次口服组的剂量为94微居里/35毫克/动物;累加服药(每日连续口服)组为4.45微居里/日/动物。分别于服药后不同时期取材制成整体及组织放射自显片。追踪标记棉酚在体内各脏器和组织中的吸收、分布和累积的定位变化动态。相应的组织切片用 H·E 染色,作细胞病理观察。结果摘述如下:     

左旋、右旋和消旋棉酚对HeLa细胞杀伤作用的比较

以左、右及消旋棉酚处理HeLa细胞,发现只有左旋与消旋棉酚具有细胞杀伤作用;左旋棉酚的有效用量为消旋棉酚的一半,提示棉酚的抗肿瘤作用在于左旋光学异构体。     

棉酚对大鼠支持细胞蛋白质合成的影响

本文以同位素放射自显影方法测定了棉酚对大鼠支持细胞(sertoli cell)蛋白质合成过程中亮氨酸参入活动的影响。实验组及对照组各有大鼠20及10只,实验组取醋酸棉酚(30mg/kg/d)以混悬液灌服,服药第 4及 6周各取实验及对照10及 5只,断头处死并取睾丸分离培养支持细胞,对照组培养液内分别加入棉酚0、2、5、8μg/ml,取培养96小时已成单层的各组细胞(以不加棉酚组为对照),分别测定各组细胞~(14)C-亮氨酸放射自显影结果。结     

棉酚对大鼠睾丸线粒体氧化磷酸化影响的研究

用Warburg测压法和Clark氧电极法观察了棉酚对大鼠睾丸线粒体呼吸及氧化磷酸化的影响,表明棉酚能抑制正常大鼠睾丸线粒体的呼吸及氧化磷酸化作用,是一种解偶联剂。大鼠日服6、10和15毫克醋酸棉酚,连续21天,睾丸线粒体的P/O值比对照组均有显著下降。文中讨论了棉酚的解偶联作用及其在线粒体的作用位点问题。     

男用口服避孕药棉酚临床试用中精液脱落细胞的研究(摘要)

有关醋酸棉酚抑制实验动物精子发生和作为男用避孕药进行临床试验研究已有过不少报告。已知棉酚可破坏大鼠的精子及精子细胞,临床健康人每日服20毫克醋酸棉酚,连服50天可使精子数降到400万/每毫升以下。毒付作用不明显,避孕效果可靠。但棉酚对人睾丸曲细精管生精上皮的作用过程、环节及破坏程度是否也和大鼠一样,尚未进行过细致的研究。本研究的目的是试图通过对服药后人精液中脱落细胞的动态观察,分析     

棉酚抗生育作用机理、体内分布、代谢及毒性毒理的研究(摘要)

棉酚是我国首创的抗精子药物。本研究对大鼠、雄猴及临床志愿服药者采用细胞生物学、生物化学、电镜及同位素示踪定位、定量等方法,在棉酚抗生育作用机     

(±)、(+)、(-)棉酚对大鼠离体睾丸间质细胞作用的研究

采用CPBA和RIA方法观察(±),(+),(-)棉酚对大鼠离体睾丸间质细胞的作用,结果表明:(±)和(-)棉酚可明显抑制间质细胞的AC活性,(-)棉酚抑制作用明显大于(±)棉酚;两者均能明显降低间质细胞cAMP、PGE和睾丸酮的含量,降低cAMP/cGMP,PGE/PGF的比值。(+)棉酚仅在高浓度时才可抑制间质细胞的AC活性及降低cAMP含量,而对PGE,睾丸酮的含量及cAMP/cGMP,PGE/PGF比值的影响则无显著性意义。     

左旋棉酚通过细胞自噬下调Namalwa细胞中B淋巴细胞刺激因子的表达

目的探讨左旋棉酚[(-)-gossypol]下调Namalwa细胞中B淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulator,BLyS)的可能机制。方法采用CCK8、台盼蓝活细胞染色检测左旋棉酚在体外对Namalwa细胞的生长抑制作用,吖啶橙(acridine orange,AO)染色观察经左旋棉酚处理后细胞自噬的形态特征,Western blot检测细胞中BLyS和自噬蛋白微管蛋白轻链3(LC3)的表达情况。结果左旋棉酚对Namalwa细胞有明显的增殖抑制作用,并且具有时间和剂量依赖性;AO染色后细胞内可观察到明显的细胞自噬小体;Western blot结果显示,左旋棉酚可下调Namalwa细胞中BLyS的表达,并上调LC3Ⅱ蛋白的表达;自噬特异性抑制剂3-methyladenine(3-MA)可显著抑制左旋棉酚对BLyS的下调与LC3Ⅱ的上调作用。结论左旋棉酚可能通过诱导细胞自噬来下调B淋巴细胞中BLyS的表达,从而抑制细胞生长。     

醋酸棉酚诱导鼠前列腺癌细胞凋亡的研究

目的研究醋酸棉酚对鼠前列腺癌RM-1细胞的抑制作用和诱导凋亡作用，探讨其作用机制。方法将不同浓度的醋酸棉酚作用于鼠前列腺癌RM-1细胞，利用MTT法检测其有效作用浓度，分别采用电子显微镜及流式细胞仪观察和检测RM-1细胞凋亡和bax蛋白表达情况，RT-PCR检测mRNA表达水平变化。结果MTT法测得其IC50值为34.56mg／L，浓度为30mg／L的醋酸棉酚具有诱导鼠前列腺癌RM-1细胞凋亡的作用，且随药物作用时间的延长，凋亡率逐渐增加，同时bax蛋白表达也逐渐增加；RT-PCR显示bax-mRNA水平逐渐升高。结论醋酸棉酚能诱导鼠前列腺癌细胞凋亡，其作用机制之一是上调bax-mRNA水平、增加bax蛋白表达，且具有时间依赖性。     

醋酸棉酚诱导膀胱癌T24细胞凋亡的研究

目的　研究棉酚对膀胱癌T2 4 细胞的抑制作用和诱导凋亡作用 ,探讨其作用机制。方法　将不同浓度的醋酸棉酚作用于人T2 4 膀胱癌细胞 ,利用MTT法检测其有效作用浓度、瑞氏染色、流式细胞仪 ,观察T2 4 细胞的凋亡情况。结果　MTT法测得其IC50 值为 12 6.3 μmol·L-1,浓度为 5 0～ 3 0 0 μmol·L-1的棉酚具有诱导T2 4 细胞凋亡的作用 ,随着药物作用时间的延长凋亡率增加。结论　棉酚抗癌作用机制之一是诱导人T2 4 膀胱癌细胞凋亡     

醋酸棉酚对大鼠肾脏的影响

棉酚在临床上引起低血钾的原因是肾性失钾,但其作用于肾脏的哪个环节还不清楚,作者就此问题进行探索. 体外实验表明.醋酸棉酚(GAA)可引起肾微粒体超氧自由基(O_2~-)生成.GAA浓度小于0.1mmol/L时,O_2~-的生成量与药物浓度呈明显的剂量反应关系;而GAA浓度大于0.1mmol/L时,O_2~-的生成量趋于平稳,呈饱和现象.GAA可与肾线粒体、细胞膜和微粒体发生不可逆结合,其结合率占总放射量的     

左旋棉酚通过ERK通路诱导Daudi细胞发生自噬及意义

目的 探讨左旋棉酚诱导淋巴瘤Daudi细胞发生自噬可能机制及对细胞存活率的影响.方法 采用CCK-8法检测左旋棉酚在体外对Daudi细胞增殖抑制作用的影响;采用台盼蓝排斥实验检测不同处理对细胞存活率的影响;Western blot检测细胞中自噬相关蛋白LC3、ERK和磷酸化ERK的表达情况;AO染色观察经左旋棉酚处理后Daudi细胞酸性小体的变化情况.结果 左旋棉酚能剂量依赖性地抑制Daudi细胞的增殖和促进细胞死亡;AO染色后经左旋棉酚处理的细胞内可观察到大量的酸性小体形成;Western blot显示左旋棉酚能显著上调自噬相关蛋白LC3Ⅱ的表达及增强磷酸化ERK的水平,抑制ERK的磷酸化能下调LC3Ⅱ的表达;ERK抑制剂U0126及自噬抑制剂CQ和3-MA均能显著增强左旋棉酚的杀细胞效力.结论 左旋棉酚可能通过ERK通路诱导Daudi细胞发生自噬,抑制ERK介导的自噬能够显著增强左旋棉酚的抗瘤效应.