鼻咽癌血清学检测方法的改进

目的 改进现有鼻咽癌血清学早期诊断方法,提高检测灵敏度.方法 用链霉亲和素.生物素放大免疫酶法与既有常规免疫酶法对鼻咽癌防治示范基地所取294份普查血清IgA/VCA,IgA/EA抗体进行血清学检测,并用SPSS统计软件对检测结果进行χ2检验和t检验.结果 共检测30岁以上294份普查人群血清,其中鼻咽癌患者血清106份,健康人血清188份.改进的链霉亲和素一生物素放大免疫酶法与既往已有的免疫酶法相比,血清IgA/VCA、IgA/EA抗体的检测阳性率增加;检测血清抗体的几何平均数明显提高.结论 改进方法可以提高血清学检测的灵敏度,同时保证了检测结果的特异性,提高了鼻咽癌的检出率,可以应用于鼻咽癌早期筛查工作.     

Nr-CWS对TC-1细胞致瘤作用的影响及抗女性下生殖道人乳头状瘤病毒感染的研究

目的探讨NvCWS对含HPV16型病毒基因的TC-1细胞荷瘤鼠肿瘤生长的影响及对女性下生殖道HPV感染的清除效果。方法SCID小鼠分别注射代．1细胞形成肿瘤模型后随机分成3组，分别注射生理盐水、60μg/ml和120μg/ml Nr-CWS，观察肿瘤生长的情况。临床选取45例单纯HPV感染者使用NvCWS1个月、3个月后再次检测HPV，分析NvCWS对生殖道HPV感染的清除效果。结果动物实验表明两组用药组的肿瘤体重明显低于对照组，抑瘤率分别为59．1％和84．2％：三组瘤重用秩和检验分析P〈0．05，差异有统计学意义；临床实验结果显示用药后3个月HPV检测转阴23例（51．1％），型别减少9例（20％），无效13例（28、9％）；治愈率与自然转阴率31％相比较，x^2检验P=0．005，差异有统计学意义。结论NvCWS对HPV16型病毒基因的TC-1细胞荷瘤鼠肿瘤有明显的抑制作用；且对临床女性下生殖道HPV感染有一定的清除作用。     

热毒净在体外对EB病毒抗原表达的抑制作用

传染性单核细胞增多症(IM)是儿童期常见EB病毒感染所致的传染性疾病,目前尚无理想的治疗方法。我院儿科长期以来应用中药热毒净(RDJ)治疗EB引起的小儿传染性单核细胞增多症,取得了较为满意的疗效[1,2]。本实验研究了热毒净对Raji细胞EB病毒早期抗原表达的影响,为热毒净的抗EB病     

Ad5F35-LMP2重组腺病毒修饰DC体内特异性抗瘤作用的研究

目的 了解含有EB病毒潜伏膜蛋白2的非复制型重组腺病毒（Ad5F35-LMP2）修饰的DC能否在体内抑制肿瘤细胞生长.方法 人外周血单个核细胞在细胞因子IL-4、GM-CSF和TNF-a诱导下生成树突状细胞.将人的外周血单个核细胞移植入实验组SCID小鼠体内2次,再分别经两次DC与Ad5F35-LMP2-DC免疫SCID小鼠,然后用1×10^6的CNE-2肿瘤细胞接种SCID小鼠皮下,观察肿瘤生长情况.结果 Ad5F35-LMP2-DC组肿瘤的潜伏期明显延长,对照组和DC组小鼠1周左右就出现了肿瘤,而Ad5F35-LMP2-DC组则直到2周左右才出现肿瘤;且肿瘤体积最小,重量最轻,与DC组比Ad5F35-LMP2-DC疫苗组的肿瘤抑制率为64.75%.结论 Ad5F35-LMP2重组腺病毒疫苗修饰的DC在体内可以有效的抑制NPC肿瘤细胞CNE-2生长.     

热毒净对鼻咽癌细胞株CNE2抑制作用的研究

目的:观察热毒净对表达EB病毒抗原的CNE₂细胞致瘤的影响及其细胞毒作用。方法:用MTT法测定热毒净对CNE₂细胞的细胞毒作用,抑瘤实验检测热毒净对CNE₂细胞致瘤的影响。结果:MTT法显示在低浓度下,热毒净对体外培养的CNE₂细胞生长没有明显的抑制作用,但在高浓度下,对细胞生长有抑制作用。热毒净在无细胞毒的浓度下,能抑制CNE₂细胞在SCID小鼠体内所致肿瘤的生长。浓度越高,热毒净对肿瘤生长的影响越明显。结论:热毒净能抑制CNE₂细胞在SCID小鼠体内的致瘤作用。     

过氧化物还原酶3在宫颈病变中的表达特点

目的 检测过氧化物还原酶3在宫颈病变中的表达特点,以进一步探讨宫颈癌发生、发展的作用机制.方法 用免疫组织化学染色方法检测过氧化物还原酶3在宫颈癌中的表达特点.另外用含有人乳头瘤病毒16亚型E6/E7基因的重组腺相关病毒转染宫颈上皮细胞,通过实时定量PCR和蛋白质印迹法检测转染前后过氧化物还原酶3表达水平的变化.结果 过氧化物还原酶3在宫颈癌中的表达显著高于正常宫颈组织.宫颈上皮细胞感染重组腺相关病毒前后过氧化物还原酶3的表达水平没有显著变化.结论 过氧化物还原酶3与高危型HPV感染以及宫颈上皮细胞的恶性转化没有直接关系.而是在官颈癌发病以后,由于肿瘤细胞内的活性氧族增多,导致过氧化物还原酶3的表达上调.     

筛选HIV-1 P24蛋白适配子的一种简便的SELEX方法

目的 快速筛选HIV-1 P24抗原适配子,并验证其特异性与亲和力.方法 利用聚碳酯材料PCR板包被P24抗原,在PCR板中运用SELEX技术进行适配子筛选.对多条适配子序列进行了一级结构及二级结构软件分析.酶联免疫法(ELISA)对筛选到的适配子进行亲和力及特异性验证.结果 确定用聚碳酯材料可以包被P24抗原,ELISA法检测抗原包被浓度与吸光度(A值)正相关;电泳显示适配子得到富集筛选;测序后软件分析表明多条适配子有共有序列,空间结构多样;用ELISA法,结合辣根过氧化物酶(HRP)标记链霉亲和素(SA)与生物素标记的适配子,对适配子与P24的亲和力进行验证,表明筛选到的适配子与P24抗原有特异性的高亲和力结合.结论 建立了一种简便的筛选HIV-1 P24抗原适配子的方法,筛选到特异性的高亲和力P24适配子.     

北京地区儿童EB病毒感染的血清学调查

目的 了解北京地区儿童EB病毒感染现状.方法 选取北京地区0～14岁儿童的血清589份,应用微润赛润ELISA classic EBV VCA IgG试剂盒,在波长405 nm下检测血清样品的吸光度值.参照试剂盒内专用的标准曲线和临界值判定血清样品EB病毒感染与否.根据专用公式计算EBV VCA IgG抗体活性.利用统计学软件SPSS 13.0分析比较北京城区和农村儿童EBV感染阳性百分率及EBV VCA IgG抗体强度.结果 血清学检测显示北京地区0～14岁儿童EBV感染阳性率为83.6%,其中城市为80.8%,农村为86.2%.EBV感染高峰集中在3岁之前为71%,其中城市为67.7%低于农村75.3%,6岁之前为82.5%.统计学分析比较城市和农村儿童不同年龄的EBV感染阳性百分率和EBV VCA IgG抗体活性具有显著差异.结论 北京城区儿童6岁之前EBV感染阳性百分率有所降低,部分儿童初次感染年龄向后推移.     

生物素——链霉亲和素放大免疫酶法在鼻咽癌血清学检测中的应用

[目的] 探讨生物素--链霉亲和素放大免疫酶法(BSA)应用于鼻咽癌(NPC)IgA/EA血清学早期筛查效果,提高鼻咽癌早期诊断效率.[方法] 免疫酶法(IE)检测广西鼻咽癌示范基地血清中IgA/VCA(针对EBV壳抗原VCA的IgA型抗体),IgAVCA阳性者再用IE法及生物素--链霉亲和素放大免疫酶法(BSA)分别检测血清IgA/EA(针对EBV早期抗原EA的IgA型抗体),以临床病理检查结果为确诊标准.t检验及X2检验统计分析改进前后两种方法在鼻咽癌血清学早期检测方面的差异.[结果] IE法检测IgA/VCA阳性血清388例,IE法检测IgA/EA阳性率3.6%(14例),BSA法检测IgA/EA阳性率12.9%(50例),BSA法检出阳性率显著高于IE法(X2=22.070,P<0.001).在两种方法检测的血清IgA/EA均阳性的样品中,IgA/EA检测滴度的几何平均值(GMT)分别为1:17.04和1:51.87,BSA法显著高于IE法(t=2.804,P<0.05).进一步的病理检测确诊鼻咽癌患者16例,BSA法提高了NPC检测灵敏度(X2=16_347,P<0.001).[结论] 用生物素--链霉亲和素放大免疫酶法(BSA)检测血清EBV相关抗体特异性较高,并且可以提高鼻咽癌血清学早期检测的灵敏度,为在基层开展更有效的流行病学筛查提供了可行的方法.