线粒体膜电位在三氧化二砷诱导K562细胞凋亡中的作用

目的探讨三氧化二砷(As2O3)诱导K562细胞凋亡的发生机制。方法分别以1、2、4、8、16μmol/LAs2O3诱导K562细胞凋亡,MTT法检测不同时间点细胞增殖抑制率,DNA Ladder法检测细胞凋亡,Annexin V/PI染色结合流式细胞术检测细胞凋亡率,Rhodamine123染色流式细胞术检测线粒体膜电位(ΔΨm)变化,ELISA法检测胞浆细胞色素C(CYTC)水平,分光光度法检测Caspase-3活性,流式细胞术检测Bcl-2和Bax表达。结果MTT结果显示As2O3能抑制K562细胞生长,且呈现时间剂量依赖性;4~16μmol/L的As2O3作用24h均可诱导K562细胞凋亡,同时伴有ΔΨm下降,胞浆内CYTC蛋白浓度及Caspase-3活性增高,胞浆Bcl-2/Bax值下降,且均呈剂量依赖性。结论As2O3诱导K562细胞凋亡可能是通过降低ΔΨm,激活线粒体凋亡途径实现的,Bcl-2/Bax值下降可能与其有关。     

三氧化二砷通过JNK信号通路诱导K562细胞凋亡

目的:探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路在三氧化二砷(As2O3)诱导K562细胞凋亡中的作用及机制。方法:体外培养K562细胞,用As2O3及特异性JNK抑制剂SP600125对K562细胞进行处理;倒置相差显微镜下观察细胞形态学变化;MTT法检测不同时间点细胞增殖抑制率;AnnexinV/PI染色结合流式细胞术检测细胞凋亡率;ELISA检测p-JNK蛋白表达的变化;流式细胞术检测突变型P53表达。结果:ELISA显示4μmol/LAs2O3作用48h后p-JNK蛋白表达增强,经SP600125预处理后,As2O3诱导的K562细胞p-JNK蛋白表达明显减弱(P<0.01),As2O3诱导的细胞增殖抑制率和细胞凋亡率均下降,与As2O3单作用组相比突变型P53表达增加(P<0.05)。结论:JNK信号转导通路在As2O3诱导K562细胞凋亡过程中发挥重要作用,是As2O3诱导K562细胞凋亡的主要途径之一。     

线粒体膜电位在三氧化二砷诱导 K562 细胞凋亡中的作用

目的 探讨三氧化二砷 (As2O3) 诱导 K562 细胞凋亡的发生机制。方法 分别以 1、2、4、8、16 μmol/L As2O3 诱导 K562 细胞凋亡,MTT法检测不同时间点细胞增殖抑制率,DNA Ladder 法检测细胞凋亡,Annexin V/PI 染色结合流式细胞术检测细胞凋亡率,Rhodamine 123 染色流式细胞术检测线粒体膜电位 (ΔΨm) 变化,ELISA 法检测胞浆细胞色素C (CYTC) 水平,分光光度法检测 Caspase-3 活性,流式细胞术检测 Bcl-2 和 Bax 表达。结果MTT结果显示 As2O3 能抑制 K562 细胞生长,且呈现时间剂量依赖性;4～16 μmol/L 的 As2O3 作用 24 h 均可诱导 K562 细胞凋亡,同时伴有ΔΨm下降,胞浆内 CYTC 蛋白浓度及 Caspase-3 活性增高,胞浆 Bcl-2/Bax 值下降,且均呈剂量依赖性。结论 As2O3 诱导 K562 细胞凋亡可能是通过降低ΔΨm,激活线粒体凋亡途径实现的,Bcl-2/Bax 值下降可能与其有关。     

苦瓜蛋白在K562/A02细胞生长抑制和凋亡中的作用及其机制研究

目的:研究苦瓜蛋白(momordin)诱导人慢性粒细胞白血病耐药细胞株K562/A02的凋亡及作用机制.方法:采用CCK-8法检测细胞生长抑制率,FCM法和细胞形态学检测细胞凋亡,FCM法检测P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)、p53、bcl-2和caspase-3蛋白表达水平,并运用caspase-8活性检测试剂盒检测caspase-8的活性.结果:苦瓜蛋白能抑制K562/A02耐药细胞的生长且呈剂量依赖关系,并能诱导细胞凋亡,能使P-gp、p53和bcl-2的表达下降,而使caspase-3和caspase-8活性增强.结论:苦瓜蛋白可逆转耐药细胞株K562/A02的细胞凋亡受抑性,主要机制可能与其下调p53、P-gp和bcl-2的表达以及提高caspase活性有关.     

安宁市老年人高血压检出率及其影响因素

  目的  了解安宁市老年人高血压的流行现状，并分析其影响因素。  方法  用多阶段比例分层随机抽样法于2019年9月至2020年1月，抽取安宁市 ≥ 60岁老年人9 709人，用问卷、体格及实验室检测的方法进行调查研究。  结果  共调查了老年人9 709例，年龄60～100岁，高血压检出率为28.82%（95%CI:27.92%～29.72%），低于全国 ≥ 60岁老年人高血压患病率（49%，P < 0.05）。女性人群高血压检出率高于男性人群，但正常高值和单纯性收缩期高血压（ISH）的检出率均低于男性；不同地区高血压检出率，差异有统计学意义（P < 0.05）。Logistic回归分析表明，糖尿病（OR = 1.338）、超重（OR = 1.481）、肥胖（OR = 2.032）、甘油三酯异常（OR = 1.177）、总胆固醇异常（OR = 1.361）的老年人患高血压的可能性较高（P < 0.05）。  结论   安宁市老年人高血压检出率低于全国水平，糖尿病、超重、肥胖、甘油三酯异常、总胆固醇异常为主要危险因素。     

苦瓜蛋白逆转K562／AO2细胞多药耐药性的研究

目的：研究非细胞毒性质量浓度苦瓜蛋白对耐阿霉素的人红白血病细胞株K562／AO2多药耐药性的逆转作用和促凋亡作用。方法：采用CCK-8法测定苦瓜蛋白的细胞毒性及其对K562／AO2细胞敏感性的影响,用流式细胞仪检测K562／AO2细胞经不同药物处理后细胞的凋亡情况。结果：苦瓜蛋白对K562／AO2细胞有一定的细胞毒作用,其非细胞毒性质量浓度为5μg／mL,非细胞毒性质量浓度苦瓜蛋白对K562／AO2细胞对阿霉素、长春新碱（VCR）和柔红霉素的耐药性都有部分逆转作用（分别为5．4、6．5和4．0倍）;5μg／mL苦瓜蛋白联合VCR诱导K562／AO2细胞凋亡,凋亡率为（19．38±1．06）％,而对照组为（1．64±0．27）％,单一苦瓜蛋白组为（3．79±0．82）％,单一VCR组为（9．83±0．98）％。结论：苦瓜蛋白能部分逆转人红白血病K562／AO2细胞对阿霉素、VCR和柔红霉素的耐药,一定剂量的苦瓜蛋白与VCR联合应用可增加肿瘤细胞凋亡率。     

ES探针荧光原位杂交法检测bcr/abl融合基因

目的探讨应用ES型bcr/abl探针(双色单融合)荧光原位杂交技术(FISH)在检测bcr/abl融合基因中的价值。方法慢性髓细胞性白血病(CML)初诊或复诊患者30例(骨髓标本43份),行普通染色体核型分析和ES型bcr/abl探针荧光原位杂交分析。结果 43份骨髓标本,6份未做骨髓培养,6份培养失败,在其余31份培养成功的标本中,找到Ph1染色体9份,另有1份标本多次检查都发现存在21p+染色体异常;43份骨髓都经FISH检测,13份标本发现bcr/abl融合基因。结论 ES型bcr/abl探针对CML初诊病例的bcr/abl融合基因有较高的检出率;对复发病例,不仅能辅助诊断CML,而且在监测白血病微小残留病灶、判断疾病的进展上均有较高的灵敏度。     

苦瓜蛋白抗肿瘤作用及其分子机制

目的 探讨苦瓜蛋白对荷瘤小鼠肿瘤生长的影响和荷瘤小鼠血清基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9的活性及变化以及细胞因子白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响.方法 将清洁级ICR雄性小鼠按体重随机分成5组,建立肝癌H22皮下移植瘤模型,分为模型组、苦瓜蛋白高、中、低剂量(100、50、25 mg/kg)组及环磷酰胺组(CTX,40 mg/kg),各组均ip给药,观察苦瓜蛋白对肿瘤生长的影响;分离血清,明胶酶谱法检测荷瘤小鼠血清基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9的活性及其变化,ELISA检测细胞因子IL-6及TNF-α表达.结果 苦瓜蛋白组与模型组相比,肿瘤质量明显减轻(P<0.01),小鼠体重也较模型组小鼠轻(P<0.01);苦瓜蛋白(100、50、25 mg/kg)组及CTX组抑瘤率分别为85.81%、66.89%、52.05%、65.10%;各苦瓜蛋白组与模型组相比,MMP-2、MMP-9的活性降低,酶原表达下调(P<0.01);细胞因子IL-6及TNF-α表达明显下调(P<0.01),上述作用与苦瓜蛋白剂量相关.结论 苦瓜蛋白具有较强的体内抗肿瘤活性;其抗肿瘤作用可能与苦瓜蛋白抑制MMPs的活性及表达,以及调节IL-6及TNF-α等细胞因子的表达水平有关.     

苦瓜蛋白对小鼠移植性肝癌H22肿瘤的抑制作用

目的：探讨苦瓜蛋白对荷瘤小鼠肿瘤生长和免疫器官的影响。方法：将清洁级ICR雄性小鼠按体重随机分成4组，建立肝癌H22皮下移植瘤模型，分为生理盐水对照组（con）、高剂量组（t3）、中剂量组（t2）和低剂量组（t1）。在普通饲料饲喂的基础上采用腹腔注射给药法分别予空白对照组给以生理盐水；高、中、低剂量组分别给以不同剂量苦瓜蛋白。观察其对肿瘤生长的影响；并观察其对肝、脾组织脏器指数的影响。结果：苦瓜蛋白干预组与对照组相比，低、中、高组抑瘤率分别为52．05％、66．89％及85．81％；与对照组比较，体重、瘤重等指标变化均具有统计学意义（P〈0．05）；肝、脾组织脏器指数变化等方面无统计学差异（P〉0．05）。结论：苦瓜蛋白对在体肿瘤的生长具有显著抑制作用，对荷瘤小鼠的肝脾等免疫器官无明显抑制作用。     

嗅鞘细胞的分离纯化及上清液中神经营养因子的测定

目的:创建理想的纯化嗅鞘细胞(OECs)的方法,并观察不同时间段OECs上清液中神经营养因子的含量,为选择OECs移植的最佳时机提供理论依据。方法:采用差速贴壁法结合免疫亲和吸附法纯化培养OECs,采用荧光染色法鉴定OECs并进行纯度测定;采用ELISA法检测培养上清液中神经生长因子(NGF),脑源性神经营养因子(BDNF)和胶质源性神经营养因子(GDNF)的水平。结果:通过上述方法,可以得到纯度85%以上的OECs,光镜下OECs突起细长,以典型的双极或三极细胞为主,背景有少量扁平的、折光性差的细胞存在;NGF、BDNF和GDNF在上清液中均有存在,其中NGF含量最高,NGF和BDNF含量随着培养时间延长逐渐升高,11 d达到高峰,GDNF仅在培养第11 d后检测到。结论:采用差速贴壁法结合免疫亲和吸附法可以获得较高纯度的OECs,培养11~14 d,OECs数量多且分泌旺盛,适合用于细胞移植。