苦参碱诱导RPMI8226细胞凋亡及其对Bcl-2、增殖细胞核抗原蛋白表达的影响

目的：研究苦参碱是否具有诱导RPMI8226细胞凋亡的生物学活性,探讨苦参碱对RPMI8226细胞Bcl-2及增殖细胞核抗原（PCNA）表达水平的影响及其作用的分子机制。方法：CCK-8法检测一定浓度的苦参碱对RPMI8226细胞的体外增殖抑制作用;AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡;PI单染色法检测细胞周期改变;同时应用流式细胞术检测Bcl-2及PCNA蛋白表达的变化。结果：苦参碱对RPMI8226细胞生长具有明显的抑制作用,呈量效和时效关系;苦参碱能诱导RPMI8226细胞凋亡,呈量效关系;细胞周期分析,G0/G1期细胞相对增多、S期相对减少、G2/M期无明显变化。苦参碱处理组RPMI8226细胞中Bcl-2及PCNA蛋白的表达跟未加药组相比阳性表达率均降低。结论：苦参碱对RPMI8226细胞生长具有明显抑制作用,其作用主要通过诱导RPMI8226细胞产生细胞周期阻滞和凋亡,降低PCNA的表达。苦参碱诱导RPMI8226细胞凋亡过程中,Bcl-2蛋白表达下调对调控细胞凋亡有重要作用。     

温州地区128例聋人致聋原因调查

目的探讨温州地区聋人的致聋原因。方法对温州地区128例感觉神经性聋人进行病因学调查,并同时行线粒体DNA突变检测。结果发现先天性聋32例(25.0%),药源性聋60例(46.9%),可能高热致聋8例(6.3%),手术或外伤致聋2例(1.6%),不明原因后天性聋26例(20.3%)。在所有128例聋人中mtDNA1555位点突变检出6例,占4.7%,其中在24例家族史病人中检出4例(16.7%)。结论提示药物致聋是耳聋的重要原因;严格掌握用药指征,建立筛选易感儿的有效实验方法,对降低发病率具有重要意义。     

苦瓜蛋白诱导K562细胞凋亡的实验研究

目的:研究苦瓜蛋白对诱导K562细胞凋亡相关基因P53和Bcl-2表达的影响。方法:采用CCK-8法检测苦瓜蛋白对K562细胞体外生长的影响;采用Giemsa染色和电镜观察细胞形态学变化;利用流式细胞仪,采用Anexinn-V法检测苦瓜蛋白诱导K562细胞凋亡的作用;采用流式细胞仪检测苦瓜蛋白对Bcl-2和突变型P53蛋白表达的影响。结果:K562细胞经苦瓜蛋白处理后,细胞生长受到明显抑制,光镜和电镜下见到典型的细胞凋亡形态学变化;Anexinn-V法检测到细胞凋亡,凋亡率随药物作用时间延长而升高,5μg/ml苦瓜蛋白诱导凋亡效果最明显;Bcl-2和突变型P53表达下降。结论:苦瓜蛋白能够诱导K562细胞凋亡,发生机理与其调控Bcl—2和突变型P53的表达有关。     

PI3K/AKT信号转导通路在宫颈癌中的表达及临床意义

目的 检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(P-AKT)、蛋白激酶B(AKT)在宫颈癌中的表达,进一步探讨其与宫颈癌发生、发展的关系.方法 应用蛋白免疫印迹技术检测66例宫颈标本(包括33例宫颈癌、23例宫颈上皮内瘤样病变、10例正常宫颈组织)PI3K、AKT、P-AKT表达情况,并结合临床资料分析其临床意义.结果 宫颈癌、宫颈上皮内瘤样病变、正常宫颈组织中PI3K表达量分别为1.3880±0.0435、0.5330±0.0939、0.2427±0.0888,三者比较差异有统计学意义;P-AKT/AKT分别为5.8702±0.0543、5.0755±0.0888、3.8353±0.0056,三者比较差异无统计学意义.宫颈鳞癌与宫颈腺癌和腺鳞癌的P-AKT/AKT分别为6.7823±0.7745和0.7621±0.0709,宫颈鳞癌P-AKT/AKT表达明显高于宫颈腺癌和腺鳞癌,差异有统计学意义.结论 PI3K过表达与宫颈癌的发生有一定的关系;P-AKT/AKT高表达与宫颈癌的病理类型有关.     

温州地区汉族人群G蛋白β3亚基C825T基因多态性与肥胖的相关性研究

目的研究温州地区汉族人群G蛋白β3亚基（GNB3）C825T等位基因多态性与超重及单纯性肥胖的相关性。方法超重及单纯性肥胖组为肥胖专科门诊中随机选取161例超重或单纯性肥胖患者，并于温州市中心血站随机选取313名体重正常健康献血者为对照组，PCR-RFLP检测基因型。结果（1）温州地区汉族人群GNB3 825T等位基因频率为0．428，与其他人种的基因频率显著不同。（2）超重及单纯性肥胖组的TT基因型携带者显著增加（P〈0．01），TT／CT导致肥胖的比数比（OR值）为2．9（95％可信区间1．8-4．7，P〈0．01）；TT／CC致肥胖的OR值为2．7（95％CI 1．5—4．7，P〈0．01）；TT基因型分布按体重指数（BMI，kg／m^2）分组后，正常体重（18≤BMI〈23）、超重（23≤BMI〈25）、Ⅰ度肥胖（25≤BMI〈30）和Ⅱ度肥胖（BMI≥30）4组均显著高于低体重（BMI〈18组，P〈0．05或P〈0．01）；Ⅰ度肥胖、Ⅱ度肥胖组高于正常体重组（均P〈0．05）；Ⅱ度肥胖组高于超重组（P〈0．01）。（3）同组男女间比较GNB3 C825T基因型和T等位基因频率分布差别无统计学意义。结论GNB3 C825T等位基因频率分布存在种族差异，温州地区汉族人群GNB3 825T等位基因频率为0．428，GNB3 825T等位基因与超重及单纯性肥胖呈正相关。GNB3 825T基因型可作为早期预测单纯性肥胖的遗传学指标之一。     

microRNAs：小分子在肿瘤中的重要作用

microRNAs是一类新型保守的微小非编码单链RNA,成熟的microRNAs通过与靶基因mRNA碱基形成不完全配对,引起mRNA降解及转录抑制。研究表明,microRNAs对细胞增殖、细胞分化和细胞凋亡具有重要的调控作用,microRNAs的表达异常与肿瘤的发生发展密切相关,肿瘤中既存在肿瘤抑制作用的microRNAs,也存在肿瘤促进作用的microRNAs。因此,microRNAs分子虽小,却在肿瘤发生、发展的过程中作用重大。     

苦瓜蛋白在K562/A02细胞生长抑制和凋亡中的作用及其机制研究

目的:研究苦瓜蛋白(momordin)诱导人慢性粒细胞白血病耐药细胞株K562/A02的凋亡及作用机制.方法:采用CCK-8法检测细胞生长抑制率,FCM法和细胞形态学检测细胞凋亡,FCM法检测P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)、p53、bcl-2和caspase-3蛋白表达水平,并运用caspase-8活性检测试剂盒检测caspase-8的活性.结果:苦瓜蛋白能抑制K562/A02耐药细胞的生长且呈剂量依赖关系,并能诱导细胞凋亡,能使P-gp、p53和bcl-2的表达下降,而使caspase-3和caspase-8活性增强.结论:苦瓜蛋白可逆转耐药细胞株K562/A02的细胞凋亡受抑性,主要机制可能与其下调p53、P-gp和bcl-2的表达以及提高caspase活性有关.     

核基质与肿瘤标记物

核基质蛋白参与染色质构成、DNA复制、转录及蛋白质翻译等一系列重要事件 ;核基质蛋白具有组织细胞特异性和肿瘤相关性。本文主要就核基质蛋白在肿瘤学上的应用作一综述。