活性氧与男性不育相关研究进展

在生殖系统内,活性氧主要由精子自身和精液中的白细胞产生,活性氧在低浓度时可以调节正常精子功能,而过量活性氧会引起氧化应激反应,影响精子膜功能、精子运动能力和DNA完整性,是男性不育的重要原因。因此,如何清除过量活性氧、进行抗氧化治疗是男性不育研究的重要课题。     

微信平台下医学细胞生物学教学改革与发展研究

微信的广泛使用开启了大数据时代的新篇章,医学细胞生物学作为临床医学专业的一门重要基础课程,具有知识更新快、课程内容多而零散等特点。在此背景下,我们充分利用微信的互动功能来挖掘其在教学中的作用,将课程内容与各种学习资源上传微信平台辅助传统细胞生物学教学,学生随时随地学习,打破教与学的时空限制。微信教学辅助平台可让学生达到课前预习、课中互动、课后复习,学生充分利用碎片化时间学习,教师与学生可以有效互动,提高了学生学习的主动性和自觉性,符合当代大学生学习模式,是传统教学模式的有效补充,是互联网+时代背景下细胞生物学课程学习的良好方式,提升了教学效果,在此过程中教师的教学能力也得到提升,如何更有效组织学生进行微信平台学习是我们今后需要努力的方向。     

瑞香狼毒对健康人体外外周血淋巴细胞微核率的影响

目的：初步探讨瑞香狼毒对健康年轻人体外外周血淋巴细胞内染色体畸变的影响效应。方法在外周血培养过程中加入不同剂量的瑞香狼毒水煎液,显微镜下检测微核率的变化,通过x2检验作统计学分析。结果瑞香狼毒终浓度为2.5、5、10mg/mL实验组的微核出现率分别是1.63‰、5.13‰和7.25‰,对照组微核率为1.50‰,第1个低剂量实验组微核率与对照组比较无统计学差异（P＞0.05）。后两个中剂量和高剂量实验组微核率显著高于对照组,并具有统计学差异（P＜0.01）。结论超过一定剂量的瑞香狼毒水煎液可能对健康人体外外周血淋巴细胞遗传物质有不同程度的毒性作用。     

男性不育症患者精子DNA完整性与精液分析参数相关性研究

目的 探讨男性不育症患者精子DNA完整性与精液参数间的相关性.方法 已有生育男性健康者50例(对照组);男性不育症患者100例(不育组),根据精子常规参数检测结果分为参数正常不育组及参数异常不育组.采用计算机辅助精液分析系统分析精液常规和运动参数,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP末端标记法检测精子DNA碎片化指数(DFI).结果 参数正常不育组和参数异常男性不育组精子DFI均高于对照组(P＜0.05),参数异常不育组精子DFI高于参数正常不育组(P＜0.05);不育组精子DFI与精子密度、正常形态率、活动率、存活率、a级和b级精子活力及精子运动参数(直线速度、曲线速度、平均路径速度和侧摆幅度)呈不同程度负相关(P＜0.05),与c级和d级精子活力呈正相关(P＜0.05),与精子直线性、前向性、摆动性和鞭打频率无相关性(P>0.05).结论 精子DFI是可用于评估精液质量和男性生育能力的理想指标.     

Survivin反义RNA/HSP70双基因转染对HepG2细胞的影响

目的:探讨survivin反义RNA/HSP70双基因转染对肝癌细胞系HepG2的影响.方法:将已成功获得的双基因载体(pIRES2-ECFP-survivin反义RNA/HSP70)用脂质体介导转染肝癌细胞系HepG2,转染72小时,收集各组细胞,利用倒置荧光显微镜观察转染后的细胞,通过RT-PCR、western-blot检测转染后细胞中survivin mRNA、survivin蛋白及HSP70蛋白表达的变化.结果:转染双基因载体与转染空载体的肝癌细胞系HepG2于倒置荧光显微镜下可见绿色荧光;转染双基因载体的HepG2细胞与转染空载体的HepG2细胞和未转染的HepG2细胞相比,survivin mRNA和survivin蛋白表达水平降低,而HSP70蛋白表达升高.结论:Survivin反义RNA与HSP70双基因转染成功;survivin反义RNA能干扰HepG2内源survivin的表达,HSP70能上调HepG2细胞HSP70蛋白的表达.     

Survivin反义RNA/HSP70双基因表达载体的构建及鉴定

目的：构建Survivin反义RNA/HSP70双基因表达载体,为后期转染肿瘤细胞,抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡以及激发机体有效的特异性抗肿瘤免疫应答提供重要的实验材料。方法：应用RT-PCR从Jurkat细胞中获得Survivin cDNA片段,反向插入pIRES2-DsRed2质粒载体中,经酶切和测序鉴定所构建的Survivin反义RNA表达载体是否成功;应用RT-PCR从HepG2细胞中获得的HSP70 cDNA片段,定向插入到pIRES2-DsRed2质粒载体中;经菌落PCR、酶切和测序鉴定所构建的HSP70表达载体是否正确。结果：经酶切和测序鉴定证明Survivin反义RNA表达载体已成功构建;经菌落PCR、限制性酶切和测序鉴定证明HSP70表达载体已成功构建。结论：本实验已成功构建了Survivin反义RNA/HSP70双基因表达载体,为进一步研究提供了实验基础。     

CDK2干扰RNA对人肝癌细胞HepG_2细胞周期和增殖的影响

目的:探讨CDK2 siRNA对人肝癌细胞株HepG2细胞CDK2 mRNA表达及其对HepG2细胞周期和增殖的影响.方法:利用脂质体转染法将特异性的携带绿色荧光蛋白的CDK2干扰RNA的重组质粒PGenesil-1-CDK2导入HepG2细胞,同时设立阴性对照空载体转染组PGenesil-1-HK.G418筛选稳定表达细胞株扩增培养.并用倒置荧光显微镜观察转染细胞的绿色荧光蛋白.反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和流式细胞术(FCM),分别检测转染后的HepG2细胞CDK2 mRNA和细胞周期的变化,噻唑蓝(MTT)法检测癌细胞生长增殖率.结果:经1mo的G418筛选得到稳定表达细胞株,与阴性对照组及空白对照组相比,转染组CDK2 mRNA 水平明显下降,细胞周期明显改变,细胞从G1期到S期发生阻滞.结论:RNA干扰技术可明显抑制CDK2基因的表达,引起 HepG2细胞周期阻滞及肿瘤细胞生长抑制作用,为CDK2介导的肿瘤基因沉默疗法提供实验依据.     

瑞香狼毒对健康人体外外周血淋巴细胞微核率的影响

目的初步探讨瑞香狼毒对健康年轻人体外外周血淋巴细胞内染色体畸变的影响效应。方法在外周血培养过程中加入不同剂量的瑞香狼毒水煎液,显微镜下检测微核率的变化,通过x2检验作统计学分析。结果瑞香狼毒终浓度为2.5、5、10mg/mL实验组的微核出现率分别是1.63‰、5.13‰和7.25‰,对照组微核率为1.50‰,第1个低剂量实验组微核率与对照组比较无统计学差异(P0.05)。后两个中剂量和高剂量实验组微核率显著高于对照组,并具有统计学差异(P0.01)。结论超过一定剂量的瑞香狼毒水煎液可能对健康人体外外周血淋巴细胞遗传物质有不同程度的毒性作用。     

HIF-1α与MMP-8妊娠高血压病患者胎盘中表达相关性研究

目的 检测胎盘组织中缺氧诱导因子-1和基质金属蛋白酶-8的表达,探讨其与妊娠期高血压疾病发病的关系.方法 用荧光定量PCR法检测20例妊娠期高血压疾病患者及20例正常妊娠者胎盘组织中HIF-1α和MMP-8的表达.结果 随妊娠期高血压疾病病情的加重HIF-1α的表达有上升趋势,MMP-8的表达有下降趋势.结论 妊娠期高血压疾病患者胎盘组织HIF-1 α的表达明显上升,MMP-8的表达明显减少,表明HIF-1α、MMP-8与妊娠期高血压疾病的发生有密切关系.