AG3340抑制大鼠C6胶质瘤细胞增殖的初步研究

目的 寻找一种既能抑制胶质瘤新生血管的形成,又能杀灭胶质瘤细胞的细胞因子,为临床肿瘤药物的筛选提供理论依据.方法 培养传代大鼠C6胶质瘤细胞株以每孔1×10~4个细胞铺96孔培养板,分组加入AG3340[金属蛋白酶(MMPs)非肽类抑制剂,终浓度分别为O ng/ml、50 ng/ml、100ng/ml、150ng/ml],培养48 h后,弃去培养液,每孔加入DMSO(二甲亚砜)150μl,振荡后用酶标仪570nm 测定吸光度值(A值).结果 (1)随着加入AG3340浓度增加,部分大鼠C6胶质瘤细胞便会出现变圆、离壁、浮起直至死亡的现象.(2)对照组OD(取相同倍数视野中心)值:0.1645±0.015;低浓度组OD值:0.1443±0.011;中浓度组OD值:0.1358±0.011;高浓度组OD值:0.1213±0.014.总体及各实验组间比较,均有统计学意义(总体F=46.67,P<0.01;各组间P<0.05).结论 AG3340对大鼠C6胶质瘤细胞增殖有明显的抑制作用,且与浓度呈一定相关性,随着浓度的增加其抑制作用逐渐增强.     

颈淋巴阻断加重SAH脑脊液对PC12细胞的损伤

目的探讨脑淋巴引流途径在蛛网膜下腔出血(SAH)后神经元损伤中的作用。方法建立兔SAH及脑淋巴引流阻滞(CLB)模型,于SAH模型建立后5d抽取脑脊液加入培养的PC12细胞中,随机将PC12细胞分为空白对照组、正常对照组(正常脑脊液)、SAH脑脊液组,SAH+CLB脑脊液组,分别于培养0.5、1、2、4h后,用比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放率,采用免疫荧光染色法激光共聚焦显微镜观察PC12细胞细胞骨架。结果与正常对照组比较,SAH脑脊液组PC12细胞LDH释放率增加;SAH+CLB脑脊液组LDH释放率明显高于SAH脑脊液组。正常脑脊液不引起PC12细胞细胞骨架改变,SAH脑脊液组及SAH+CLB脑脊液组PC12细胞胞质着色较弱,突起变短甚至回缩,胞核呈现凋亡特征,上述表现以SAH+CLB组更为明显。结论脑淋巴引流阻滞加重SAH脑脊液对PC12细胞的损伤,提示通过改善脑淋巴引流途径可减轻SAH继发性脑损伤。     

银杏叶提取物促进大鼠蛛网膜下腔出血后血红素氧合酶-1表达

目的探讨银杏叶提取物(EGb)对蛛网膜下腔出血(SAH)后脑组织血红素氧合酶-1(HO-1)表达的影响。方法实验采用健康Wistar大鼠,将动物随机分入非SAH组、SAH组、溶媒组、EGb1组(低剂量)、EGb2组(高剂量),EGb腹腔注射给予。非SAH组于枕大池注入0.3ml生理盐水;其余各组于枕大池注入自体动脉血溶血物0.3ml诱导SAH。将动物处死后取脑,用RT-PCR方法检测术后24h、72h皮层HO-1 mRNA,用免疫组化法检测术后72h海马HO-1蛋白的表达。结果在非SAH组大脑皮层未见HO-1 mR-NA表达;SAH组大鼠在诱导SAH后24h,大脑皮层HO-1 mRNA表达增加,72h进一步增加;在EGb1组和EGb2组,大脑皮层HO-1 mRNA表达更加明显,其中EGb2组的表达强度又高于EGb1组。非SAH组未见海马HO-1蛋白表达;SAH组在诱导SAH后72h海马可见HO-1蛋白明显表达;EGb1组和EGb2组海马HO-1阳性细胞和表达强度增加,以EGb2组更加明显。结论EGb对SAH后脑组织HO-1表达具有促进作用。     

高血压脑出血早期血肿扩大的相关因素分析

目的探讨高血压脑出血早期血肿扩大的发生率、发生时间、相关因素及其预后，以提高该病的诊疗水平，减少死亡率。方法回顾性分析2003.7-2006.7诊治的126例脑出血病人临床和CT资料。结果血肿扩大主要与血压增高的程度、凝血功能、出血部位及血肿形态有关，血肿扩大增加了病人的死亡率。结论对有血肿扩大可能的高血压脑出血病人，要严密观察病情变化，及时复查CT，尽早采取救治措施。     

不同钻孔部位治疗慢性硬膜下血肿比较性研究

目的比较不同钻孔部位对慢性硬膜下血肿的疗效。方法对72例慢性硬膜下血肿随机分成两组,一组在血肿的额极侧钻孔,另一组在血肿的最厚部位钻孔。术后比较两组的颅内积气和颅内血肿的发生率。结果额极侧钻孔组的颅内积气、颅内血肿、蛛网膜损伤的发生率比最厚部位钻孔组低。结论在血肿的额极侧钻孔治疗慢性硬膜下血肿并发症少。     

计算机三维塑形在钛网个体化修补颅骨缺损中的应用

目的探讨采用计算机三维塑形技术进行个体化颅骨缺损修补的临床应用价值。方法选择68例颅骨缺损病人,术前利用CT进行头颅扫描取得颅骨缺损部位二维数据,根据二维数据利用计算机三维塑形重建制作个体化钛网。术中将钛网根据解剖结构固定于缺损部位。结果68例患者中,全部患者切口一期愈合,2例出现皮下积液(经皮下穿刺抽液后消失),所有病例修补后头颅对称,外形良好基本恢复了原始状态。结论应用计算机三维塑形钛网修补颅骨缺损值得推广。     

大鼠脑胶质瘤模型构建

目的 探索建立切实可行的SD大鼠脑胶质瘤模型的方法。方法 实验于2005—03／05在泰山医学院基础研究所及天津神经外科研究所动物实验室完成。选择成年SD雄性大鼠20只，应用立体定向技术，于大鼠头部正中矢状线旁3mm，前囟前1mm处，利用微量注射器将100万个C6细胞（10μL）注入硬脑膜下5mm处。注射时间为5min，留针3min。术后1，2周对存活的大鼠行MRI检查。对术后2周检查肿瘤阳性的大鼠取脑组织做病理切片，对瘤组织进行苏木精-伊红染色观察。结果 17只大鼠进入结果分析。①17只大鼠2次MRI检查见肿瘤所在部位一致，但第二次检查时肿瘤体积更大。双侧长有肿瘤的大鼠有15只，单侧长有肿瘤的2只，总的肿瘤阳性率为100％。②经病理检查证实17只大鼠脑内肿瘤均为胶质瘤。结论 大鼠硬脑膜下注入100万个C6细胞能成功建立脑胶质瘤模型，成功率100％。     

大鼠脑胶质瘤模型构建

目的探索建立切实可行的SD大鼠脑胶质瘤模型的方法。方法实验于2005-03/05在泰山医学院基础研究所及天津神经外科研究所动物实验室完成。选择成年SD雄性大鼠20只,应用立体定向技术,于大鼠头部正中矢状线旁3mm,前囟前1mm处,利用微量注射器将100万个C6细胞(10μL)注入硬脑膜下5mm处。注射时间为5min,留针3min。术后1,2周对存活的大鼠行MRI检查。对术后2周检查肿瘤阳性的大鼠取脑组织做病理切片,对瘤组织进行苏木精-伊红染色观察。结果17只大鼠进入结果分析。①17只大鼠2次MRI检查见肿瘤所在部位一致,但第二次检查时肿瘤体积更大。双侧长有肿瘤的大鼠有15只,单侧长有肿瘤的2只,总的肿瘤阳性率为100%。②经病理检查证实17只大鼠脑内肿瘤均为胶质瘤。结论大鼠硬脑膜下注入100万个C6细胞能成功建立脑胶质瘤模型,成功率100%。     

腰大池引流在高血压脑出血并继发脑室内出血的应用与研究

目的着重探讨回顾持续腰大池引流在防治高血压脑出血并发症中的作用。方法选择我院神经外科2010年12月至2012年11月收治的高血压脑出血并破入脑室及单纯脑室内出血患者,并对患者分为两组,行腰大池引流患者为治疗组,未行腰大池引流患者为对照组;定期复查脑CT观察脑室系统状况;结果持续腰大池引流能降低脑室内出血患者发生脑积水的几率;对预防脑积水形成有显著疗效;结论持续腰大池引流不仅能降低脑室内出血继发脑积水的几率,并能在一定条件下代替侧脑室钻孔引流治疗,降低并发症。     

PF-4促进脑胶质瘤细胞Ca^2＋内流的实验观察

目的探讨血小板因子-4（platelet factor-4,PF-4）对脑胶质瘤细胞Ca^2＋内流的影响。方法脑胶质瘤细胞U251传代培养,分别加入浓度为0（对照组）、900 ng/ml、1200 ng/ml、1500 ng/ml的PF-4,继续培养24 h。利用LSCM测定经Fluo-3标记的脑胶质瘤细胞内Ca^2＋荧光强度。结果对照组脑胶质瘤细胞内Ca^2＋荧光强度为24.21±2.36;实验组脑胶质瘤细胞内Ca^2＋荧光强度分别为39.35±3.31,52.39±3.26,65.56±2.81。经单因素方差分析,各组间差异P〈0.05。结论PF-4对脑胶质瘤细胞Ca^2＋内流有明显的促进作用。