核转录因子-5在海水淹溺性肺水肿中的作用及机制

目的探讨核转录因子．5（NFAT5）在海水淹溺性肺水肿中表达的变化及作用。方法40只180～200gSD大鼠随机分为五组：对照组（NG）,海水灌注1h,2h,3h,4h组,每组8只大鼠。灌注组经气管插管灌注4ml／kg海水。不同时间点将大鼠处死,并将肺组织取出。计算肺湿干比（W／D）、伊文思蓝法检测肺通透指数（LPI）、逆转录-聚合酶链（RT—PCR）检测肺组织中NFAT-5及相关渗透压基因表达变化,同时进行病理形态学检查。结果肺组织病理形态学显示,海水灌注组肺组织出血,水肿,肺泡间隔明显增厚;灌注1h组的W／D值较对照组W／D值显著增高（P〈0．01）;灌注组肺通透指数显著高于对照组（P〈0．01）,W／D值,LPI随时间的增加而逐渐减轻。RT—PCR结果表明,海水淹溺后NFAT5及渗透压保护相关基因的mRNA表达迅速增高,4h后达到最高峰。结论在海水淹溺发生后,NFAT5表达显著增高,可进一步刺激有机渗透物质的增加,通过在高渗条件下维持细胞内外渗透压的平衡,减轻肺水肿,可能是治疗肺水肿的有效新途径。     

肺癌获得性多药耐药机制的研究进展

肺癌对人类健康的危害日益严重,从20世纪中叶开始,其发病率和病死率在全球范围内迅速增长,而患者的5年生存率却徘徊在10％左右。化疗是肺癌综合治疗的重要手段之一,然而近年来,多药耐药的不断出现严重限制了肺癌化疗效果的提高。多药耐药机制的研究有望为逆转耐药提供全新的思路。     

小鼠骨髓来源巨噬细胞体外培养及极化相关实验方法的建立

目的 建立小鼠骨髓来源巨噬细胞体外培养,并将其极化为M1和M2型巨噬细胞的方法.方法 获取小鼠骨髓细胞,以GM-CSF诱导其中单核细胞向巨噬细胞分化发育,并辅以LPS和IFN-γ以及IL-4刺激巨噬细胞分别向M1型和M2型分化.采用流式细胞术、实时定量PCR和ELISA的实验检测极化后细胞内以及细胞培养上清中的标志性细胞因子如IL-12、IL-10、Argl、Yml、MMR等的表达情况.结果 形态学观察发现骨髓获取的细胞经诱导分化后呈现巨噬细胞特征性的贴壁形态；流式细胞术行胞内染色表明,极化后的M1型与M2型巨噬细胞各自表达其特征性的细胞因子IL-12和Argl；实时定量PCR和ELISA分别检测所培养细胞胞内以及培养上清中的细胞因子,结果表明所刺激的M1型巨噬细胞高表达IL-12、iNOS、TNF-α等炎性因子,而M2型巨噬细胞表达MMR、Argl、Yml等标志因子.结论 建立了稳定的M1和M2型巨噬细胞体外培养体系.     

乙酰化白藜芦醇通过调节缝隙连接蛋白43表达减轻海水淹溺型急性肺损伤

目的观察海水淹溺肺损伤大鼠肺组织中缝隙连接蛋白43（Cx43）的表达变化及乙酰化白藜芦醇对其的干预作用。方法32只大鼠完全随机分为空白对照组、模型组、乙酰化白藜芦醇预处理组和乙酰化白藜芦醇组,每组8只。采用气管内滴注海水（4ml／kg）的方法制作海水淹溺型急性肺损伤大鼠模型,用ELISA法检测肺组织中TNF-仅和IL-10的含量,实时定量PCR及免疫组化的方法检测肺组织中Cx43的表达变化。结果吸人海水4h后,大鼠肺部损伤明显,TNF—α和IL-10的含量增高,Cx43在基因水平表达量增高,而蛋白水平表达降低;乙酰化白藜芦醇预处理明显减轻海水吸入导致的急性肺损伤,减少炎症因子分泌并且在基因水平和蛋白水平增加Cx43的表达。结论Cx43参与海水淹溺型急性肺损伤的发生与发展,乙酰化白藜芦醇能够通过增加Cx43的表达减轻肺损伤。