乙酰化白藜芦醇通过调节缝隙连接蛋白43表达减轻海水淹溺型急性肺损伤

目的观察海水淹溺肺损伤大鼠肺组织中缝隙连接蛋白43（Cx43）的表达变化及乙酰化白藜芦醇对其的干预作用。方法32只大鼠完全随机分为空白对照组、模型组、乙酰化白藜芦醇预处理组和乙酰化白藜芦醇组,每组8只。采用气管内滴注海水（4ml／kg）的方法制作海水淹溺型急性肺损伤大鼠模型,用ELISA法检测肺组织中TNF-仅和IL-10的含量,实时定量PCR及免疫组化的方法检测肺组织中Cx43的表达变化。结果吸人海水4h后,大鼠肺部损伤明显,TNF—α和IL-10的含量增高,Cx43在基因水平表达量增高,而蛋白水平表达降低;乙酰化白藜芦醇预处理明显减轻海水吸入导致的急性肺损伤,减少炎症因子分泌并且在基因水平和蛋白水平增加Cx43的表达。结论Cx43参与海水淹溺型急性肺损伤的发生与发展,乙酰化白藜芦醇能够通过增加Cx43的表达减轻肺损伤。     

地塞米松调节claudin-4减轻海水淹溺性肺水肿的机制研究

目的探讨地塞米松对海水淹溺性肺水肿的保护作用及其分子机制。方法采用气管内滴注海水的方法复制海水淹溺性肺损伤的大鼠模型,测定肺水肿的指标及肺组织中claudin-4、核转录因子-κB(NF-κB)、p38蛋白水平的表达;培养A549细胞,分别应用NF-κB抑制剂、p38抑制剂、糖皮质激素受体(GR)阻断剂(RU486)研究地塞米松改善海水淹溺性肺水肿的分子机制。结果吸入海水后肺水肿形成,海水可活化NF-κB及p38,同时下调claudin-4,地塞米松可缓解上述改变;应用PDC抑制NF-κB活化,并采用SB203580抑制p38活化可缓解海水诱导的claudin-4下调和单层细胞通透性的增高,应用RU486阻断GR后,地塞米松上调claudin-4的作用则大大降低。结论地塞米松可抑制海水诱导的NF-κB活化,缓解NF-κB活化介导的claudin-4表达下调及肺通透性增高,从而减轻海水淹溺性肺水肿。     

地塞米松对淡水淹溺型兔肺损伤血清NO的影响

目的观察淡水淹溺型兔肺损伤中NO的变化及地塞米松的干预作用。方法将21只大白兔随机分为空白对照组、淡水淹溺组、地塞米松治疗组。气管淡水灌注后于0、0.5、1、2、3、6 h抽血观察PaO2、PaCO2和NO变化,试验终点测定肺组织中丙二醛（MDA）、一氧化氮合酶（NOS）、超氧化物歧化酶（SOD）的含量变化。光镜下观察肺组织。结果淡水灌注后动物PaO2、PaCO2低,血清NO增高（P〈0.01）。肺组织中NOS、MDA含量增高（P〈0.01）,SOD降低（P〈0.05）。病理学显示淡水淹溺后出现肺间质、肺泡水肿及肺泡腔内炎性细胞浸润。地塞米松可减轻肺损伤。结论淡水淹溺可升高兔血清中NO;地塞米松可减轻淹溺后肺损伤。     

海水淹溺性肺损伤中肺水肿发生机制的研究进展

海水淹溺后,除少数因喉头、气管反射性痉挛引起急性窒息外,导致死亡的主要原因是海水淹溺性肺水肿.海水淹溺性肺水肿的发生机制有海水高渗性的损伤作用、肺泡中液体吸收障碍、炎症介质以及活性氧物质的影响、神经体液因素影响等.     

蛇床子素在家兔心肺联合移植中对供肺的保护作用

目的研究蛇床子素在家兔心肺联合移植中对供肺的保护作用及其作用机制。方法将16只健康家兔随机分为两组,对照组肺以改良低钾右旋糖酐（LPD）液灌注并保存，实验组则将蛇床子素加入改良LPD液灌注并保存，在4℃条件下保存12h后再灌注1h，测定肺组织的湿干重比（W／D）；测定肺组织中髓过氧化物酶（MPO）的活性、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）的含量、核转录因子-kB（NF-kB）的表达以及细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的表达；并观察肺组织病理结构的变化。结果再灌注后，实验组的W／D、MPO的活性、MDA含量及NF-kB和ICAM-1的表达低于对照组（P〈0．01），而实验组肺组织中的SOD含量较对照组增高（P〈0．05），肺组织损伤的病理变化程度较对照组轻。结论蛇床子素能减轻肺缺血再灌注损伤，对供肺具有一定的保护作用。     

RL联合PTX对重度失血性休克大鼠肺缺血再灌注损伤的影响

目的探讨乳酸钠林格液（RL）联合己酮可可碱（PTX）复苏对重度失血性休克大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法将48只健康雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、RL组及RL＋PTX组各12只,后三组均采用改良Wigger′s法制备重度失血性休克模型,模型制备成功后RL组予3倍失血量的RL复苏;RL＋FTX组复苏方案同RL组,但复苏液中加入PTX;对照组仅行麻醉。分别于休克前、复苏前及复苏后1、2,4h检测四组呼吸指数（RI）;复苏后4h检测肺通透指数、肺湿干质量比（W／D）,观察肺组织病理学变化并进行肺损伤评分,测定肺组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和IL-8水平。结果与对照组比较,其余三组啼损伤评分、肺W／D、肺通透指数均显著升高,尤以RL组和RL＋FIX组为著（P均〈0．05）;与RL组比较,RL／PTX组RI、肺通透指数、肺W／D显著降低,肺组织病理学变化显著减轻,肺损伤评分显著减少,肺组织MMP-2、IL-8水平显著降低（P均〈O．05）。结论 RL联合FTX复苏可显著减轻重度失血性休克大鼠肺缺血再灌注损伤,可能机制为抑制肺组织内IL-8和MMP-2生成而减轻炎性反应。     

参附注射液抑制兔再灌注肺组织NF-kB表达的实验研究

目的初步探讨参附注射液改善兔肺保存效果及可能的作用机制。方法16只健康家兔随机分为两组,对照组肺加入棉子糖（30mmol／L）的改良低钾右旋糖酐（LPD）液灌注及保存,实验组则将参附注射液（40mg／L）加入改良LPD液灌注及保存。在4℃保存12h后再灌注1h,测定动脉血氧分压（PaO2）、肺组织的干湿比（W／D）、肺组织中髓过氧化物酶（MPO）活性、NF—KB的表达并观察肺组织病理结构的变化。结果再灌注15min后,两组的Pa02逐渐降低,但实验组PaO2的降低程度明显低于对照组（P〈0．01）;再灌注后,实验组的W／D和MPO也明显低于对照组（P〈0．01）,肺组织NF-kB的表达也明显低于对照组（P〈0．01）,肺组织病理变化较对照组轻。结论参附注射液可抑制再灌注肺组织中NF—kB的表达,减轻肺缺血再灌注损伤,改善肺功能,对兔肺具有保护作用。     

海水淹溺性肺水肿的药物治疗进展

海水淹溺性肺水肿和海水型呼吸窘迫综合征是海水淹溺后导致死亡的主要因为,因此尽快纠正肺水肿是治疗淹溺成功的关键.目前治疗上除机械通气、高压氧得到普遍认同外,规范的药物治疗仍在进一步研究中.此文就淹溺性肺水肿的药物治疗研究进展方面作一综述.     

凯时注射液对无心跳兔供体肺缺血再灌注损伤的影响

目的研究凯时注射液对无心跳兔肺缺血再灌注损伤的影响,并探讨其可能的作用机制。方法将24只健康新西兰大白兔随机平均分为三组,肝素化后处死,对照组立即予以LPD液灌注及保存,实验组1在处死后1h予LPD液灌注及保存,实验组2将凯时注射液（20ug／L）加入LPD液灌注及保存,两实验组在4℃保存5h后再灌注1h,对照组保存6h后灌注1h;测定经肺氧合后动脉血氧分压值（PaO2）和肺气道峰压值（PawP）,于再灌注结束后取右上肺组织,测其湿重（W）与干重（D）、计算湿／干重比（W／D）、ELISA法检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量,免疫组化法检测核因子-κB及ICAM-1的表达．并用光学显微镜和透射电子显微镜观察再灌注后肺组织结构的病理变化。结果再灌注45min后,实验组1的PaO2降低最明显、PawP升高最显著,实验组2及对照组的PaO2降低程度及PawP的升高程度均低于实验组1（P〈0．01）;实验组1的（SOD）明显低于对照组及实验组2,实验组1的（MDA）降低程度明显高于实验组2及对照组,实验组1的肺组织（W／D）、NF—κB及ICAM-1的表达高于对照组及实验组2（P〈0．01）,肺组织的病理变化实验组1最重。结论凯时注射液能减轻无心跳兔肺缺血／再灌注损伤,改善肺功能,具有肺保护功能。     

地塞米松对急性肺损伤大鼠信号转导细胞外信号调节激酶的影响

目的观察地塞米松对急性肺损伤(ALI)大鼠细胞信号转导中细胞外信号调节激酶(ERK)表达的影响,从而为临床治疗提供理论依据。方法健康雄性SD大鼠随机分为脂多糖(LPS)模型组(静脉注射5.0mg/kgLPS)、LPS+地塞米松低、中、高(0.2mg/kg、1.0mg/kg、5.0mg/kg)3个剂量组和对照组,每组5只,4h时测定动脉血气,肺湿/干(W/D)比值,Bradford法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)和血浆中蛋白浓度并计算肺通透指数(LPI=BALF蛋白含量/血浆蛋白含量),Westernblot法检测不同剂量地塞米松对p-ERK蛋白表达的影响;另取大鼠,在注射LPS后1h、4h、8h、12h和0h(对照组:注射生理盐水)5个时相点(每个时相点5只)分别用Westernblot法检测地塞米松对p-ERK蛋白表达的影响。结果 LPS模型组大鼠动脉血气各项指标、肺W/D比值、LPI及肺组织p-ERK表达显著高于对照组(P0.05或P0.01)。地塞米松中、高剂量组能显著降低LPS诱导的ALI大鼠动脉血气分析、肺W/D比值、LPI(P0.05或P0.01),同时还能显著抑制LPS诱导的ALI大鼠肺组织p-ERK蛋白表达(P0.05);地塞米松在注射LPS后4h时能显著抑制p-ERK的蛋白表达。结论地塞米松抑制LPS诱导的ALI大鼠肺组织通透性增加和ERK的表达,可能这种通过抑制ERK活化的作用,对ALI的预后有益。     

地塞米松通过加强自噬和抑制凋亡减轻海水吸入型肺损伤

目的 探讨海水吸入型肺损伤中自噬过程,以及地塞米松对其干预作用.方法 40只大鼠完全随机分为正常对照组、1、3、6、12 h海水处理组,每组8只.采用气管内滴注海水（3ml/kg）的方法制作海水吸入型急性肺损伤大鼠模型,观察病理变化,检测肺组织湿干比,western blot检测beclin-1的表达变化.体外实验A549细胞分为正常对照组、12 h海水组、地塞米松＋12 h海水组、3-MA＋ 12 h海水组,采用western blot检测beclin-1和bax的表达变化.结果 海水吸入后,大鼠肺部严重损伤,水肿明显,beclin-1随损伤时间延长表达量增加,在海水处理后12 h达到高峰.体外实验中海水刺激增加了beclin-1和bax的表达,然而与海水组相比,地塞米松预处理增加了beclin-1的表达,同时使bax的表达下降.3-MA预处理则效果相反.结论 自噬参与了海水吸入型肺损伤的修复过程,地塞米松能够通过加强自噬并且抑制凋亡减轻肺损伤.     

普拉格雷对海水吸入型急性肺损伤的作用分析

目的探讨海水吸入型急性肺损伤中血小板与中性粒细胞的黏附情况,以及普拉格雷对其的干预作用。 方法SD大鼠随机分为海水吸入1、2 h两个大组,组内随机分为空白对照组、海水处理组、溶剂处理组与普拉格雷处理组,每组8只大鼠。海水处理组在大鼠气管内灌注海水,溶剂处理组和普拉格雷处理组在海水处理之前4 h分别给予羟甲基纤维素钠溶液(CMC-Na)和普拉格雷灌胃处理。分别进行各组的病理切片HE染色,检测各组肺组织湿干比、血浆中炎症因子浓度,流式细胞术下检测血小板活化率以及与中性粒细胞的黏附情况,并进行肺泡灌洗液蛋白浓度测定以及髓过氧化物酶(MPO)活性测定。 结果与正常对照组比较,气管内滴入海水后大鼠肺部组织出现明显炎症和水肿,HE染色显示其组织结构紊乱,肺泡间质充血水肿,并有大量炎症细胞浸润,肺泡间隔明显增厚,ELISA法测得全身炎症因子,如TNF-α、IL-1β以及TXB2的表达增高,血小板与中性粒细胞黏附率显著增加,肺泡灌洗液蛋白定量以及MPO活性增加,并且海水吸入2 h较1 h各项指标增高更为显著。普拉格雷干预可显著减轻海水导致的肺组织损伤,减轻肺组织结构紊乱与炎症细胞浸润,减少炎症因子TNF-α、IL-1β以及TXB2的释放,并且抑制血小板的活化以及与中性粒细胞的黏附。 结论海水吸入型急性肺损伤中血小板与中性粒细胞的黏附率明显升高,普拉格雷可能通过降低此指标对肺损伤产生保护作用。     

肺腺癌细胞系H114的建立

目的建立国人男性肺腺癌细胞系,为肺癌的防治研究提供理想的体外实验模型。方法以经组织学和／或细胞学确诊的标本进行原代培养,通过光镜观察、细胞苏木精．伊红（HE）染色、细胞生长曲线、异体移植实验及组织HE染色等对其进行分析鉴定,建立细胞系。结果细胞经液氮罐或-80℃低温冰箱反复冻存复苏后仍保持良好的增殖活性,复苏细胞经0．4％胎盘蓝染色,活细胞比率均保持在85％以上。在整个168h的观察时间里,肺腺癌H114细胞始终处于持续增殖状态,可见潜伏期和指数生长期,由于本细胞系传代次数较少,生长活跃,7d还没出现平顶期和退化衰亡期;体外培养细胞生长稳定,细胞形态学及浸润性生长结果表明该细胞系符合恶性细胞特性,裸鼠接种成功致瘤,瘤细胞形态与原患者的病理切片相似,命名为H114细胞系。结论该细胞系符合建系标准,是一株新建的人肺腺癌细胞系。     

肺泡表面活性物质相关蛋白A在慢性心源性肺水肿大鼠肺组织中的表达

目的观察慢性心源性肺水肿大鼠肺组织病理形态学改变,研究其肺泡表面活性物质相关蛋白A及肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1、IL-6的表达,阐述它们在慢性心源性肺水肿发病机制中的作用。方法 14只自发性高血压大鼠高脂饮食饲养1年,建立慢性心源性肺水肿模型,14只血压正常大鼠以正常饮食饲养1年,为正常对照组,分别以免疫组织化学染色检测各组大鼠肺组织中SP-A的表达。RT-PCR法检测各组大鼠肺组织SP-A mRNA的表达,ELISA法检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1、IL-6的水平。结果试验组肺组织中SP-A mRNA的表达较对照组明显上调(P<0.05),肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1、IL-6水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。SP-A mRNA表达与支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1、IL-6的水平呈显著正相关(r=0.612、r=0.702、r=0.824,P<0.05)。结论慢性心源性肺水肿大鼠的肺组织中SP-A mRNA的表达较对照组明显上调,且与支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1、IL-6的水平呈显著正相关。SP-A及TNF-α、IL-1、IL-6均与慢性心源性肺水肿的发生发展过程密切相关,但因果关系不明。     

脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织AQP-1、AQP-5表达变化及意义

目的探讨脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白1（AQP-1）、AQP-5表达变化及意义。方法成年雄性SD大鼠60只,随机分为空白对照组、假手术组、模型组,每组20只。模型组采用盲肠结扎穿孔法复制脓毒症急性肺损伤模型,假手术组腹部探查取出盲肠后还纳腹腔,空白对照组不做手术处理。在造模后3、6、12、24h,每组各取出5只大鼠,处死后取肺组织,采用实时荧光定量PCR和Westernblot法检测肺组织AQP-1、AQP-5mRNA和蛋白。结果模型组造模后6h光镜下可见肺泡壁增厚、毛细血管充血、肺间质肺泡水肿、灶性出血,12h时上述改变最明显;空白对照组和假手术组肺组织无明显病理变化。模型组造模后6、12、24h时AQP1、AQP5mRNA及蛋白表达较同时点假手术组、空白对照组均降低（P均〈O．01）;iS模后6、12、24b时AQPl、AQP5mRNA及蛋白表达较同组3h均降低（P均〈0．01）。结论AQP．1、AQP．5表达降低在大鼠脓毒症急性肺损伤过程中可能发挥重要作用。     

人脐带间充质干细胞对ALI治疗作用的研究

目的探讨输入人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUMscs）对脂多糖（LPS）诱导的大鼠ALI的治疗作用。方法将30只Wistar大鼠随机分为3组：正常对照组、ALI模型组和HUMSCs移植组,每组10只。健康大鼠LPS气管滴入方法建立ALI模型,尾静脉输入HUMSCs。输入7h后,处死各组大鼠,取肺组织行病理学观察,测定肺湿／干重比（W／D）,ELISA法测定肺组织匀浆中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和IL-1β的含量。结果肺组织病理学显示：ALI模型组大鼠肺组织呈现典型的炎症病理变化,包括肺泡充血、水肿、出血,肺泡腔和血管壁中性粒细胞浸润,肺泡壁增厚等肺损伤性病变;HUMSCs移植组大鼠肺组织损伤程度明显减轻。与正常对照组比较,ALI模型组W／D、TNF-α和IL-1β含量明显升高（P〈0．05）。与Au模型组比较,HUMSCs移植组W／D、TNF-α和IL-1β含量明显降低（P〈0．05）。结论输入HUMSCs能减轻ALI,并能降低肺W／D和肺组织TNF-α及IL-1β含量。     

1,25-二羟维生素D3调节NF-κB通路对减轻海水吸入型急性肺损伤的作用

目的 探讨海水吸入型肺损伤大鼠肺组织中核因子-κB（NF-κB）通路的变化以及1,25-二羟维生素D3对其干预作用.方法 32只大鼠完全随机分为空白对照组、海水处理组、VitD3预处理组和地塞米松处理组,每组8只.采用气管内滴注海水（3 ml/kg）的方法制作海水吸入型急性肺损伤大鼠模型,观察肺部病理变化,用ELISA法检测肺组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白介素-1β（IL-1β）的含量,Western blot检测磷酸化NF-κB的表达变化,免疫荧光观察A549细胞NF-κB核转移情况.结果 海水吸入4h后,大鼠肺部损伤明显,TNF-α和IL-1β的含量增高,NF-κB磷酸化以及核转移增多;1,25-二羟维生素D3预处理显著减轻了海水吸入导致的急性肺损伤,减少了炎症因子的释放,并且抑制了NF-κB磷酸化以及核转移.结论 NF-κB通路参与了海水吸入型肺损伤的发生发展,1,25-二.羟维生素D3能够通过抑制NF-κB信号通路减轻肺损伤.     

地塞米松早期干预对犬胸部开放伤海水浸泡所致急性肺损伤的治疗作用及机制探讨

目的：探讨地塞米松对海水浸泡胸部开放伤所致致急性肺损伤（ ALI）的治疗作用及其机制。方法取健康成年杂交犬16只制备海水浸泡胸部开放伤ALI模型,随机分为对照组及治疗组各8只。治疗组于海水浸泡30 min后静脉注射地塞米松1 mg/kg,对照组静脉注射等量生理盐水。动态观察伤后动脉血气指标（ PaO2、PaO2/FiO2）,支气管肺泡灌洗液（ BALF）、血清中体内肺表面活性蛋白A和B（ SP-A、SP-B）含量变化及血管外肺水含量指数（ EVL-WI）、肺微血管通透性（ ELI ）变化。结果伤后4 h治疗组PaO2、PaO2/FiO2显著高于对照组（ P均＜0．05）,EVL-WI、ELI均低于对照组（P均＜0．05）,SP-A、SP-B含量在BALF中高于对照组而在血清中低于对照组（ P均＜0．05）。结论地塞米松能改善胸部开放伤后海水浸泡致ALI犬的缺氧及减轻肺水肿,其机制可能为提高肺内SP-A、SP-B含量。     

芥子气肺损伤细胞凋亡与氧化应激的实验研究

目的建立大鼠芥子气（sulfur mustard,SM）肺损伤的动物模型,探讨SM致大鼠ALI的细胞凋亡和氧化应激情况。方法选取雄性大鼠72只,随机分为SM组（32只）、丙二醇对照组（32只）和正常对照组（8只）。SM组气管内注入稀释的SM（2mg／kg,0．1ml）,丙二醇对照组气管内注人丙二醇0．1ml,正常对照组不做任何处理。通过电镜、免疫组化、BALF观察SM诱导细胞凋亡和氧化应激。结果SM组：①BALF中乳酸脱氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶水平6h达高峰;②Ⅰ型肺泡细胞膜局部缺失,Ⅱ型肺泡细胞表面微绒毛断裂缺失,两者均有线粒体嵴模糊,粗面内质网表面附着的核糖体脱离;③肺泡间隔细胞凋亡明显增多。丙二醇对照组与正常对照组相同。结论细胞凋亡和氧化应激是SM（2mg／kg）诱导大鼠ALI机制的两大特征。     

缺血后处理对大鼠肺缺血-再灌注损伤中肺表面活性蛋白A及动脉血气的影响

目的研究缺血后处理对于肺缺血一再灌注损伤的保护作用。方法60只雄性sD大鼠随机分为2个模型制作组,每个模型制作组30只随机分为5组：假手术组（S）、缺血一再灌注（I／R）45min组和120min组,以及缺血后处理（IPO）45min组和120min组。用免疫组化法测定肺组织中肺表面活性蛋白A（sP—A）的表达水平,动脉血行动脉血气分析,测定肺组织的通透性（^125Ⅰ标记牛血清白蛋白的漏出量表示）,光镜及电镜下观察肺组织的病理形态变化。结果IPO组与I／R组相比较,SP—A表达水平明显升高（P〈O．01）,血气分析结果明显改善,肺组织的通透性明显降低（尸〈0．01）,肺组织损伤减轻。结论缺血后处理可以减轻肺缺血一再灌注损伤,主要表现为肺组织氧合的改善,尤其是减轻组织水肿和减少Ⅱ型肺泡上皮细胞及肺泡表面活性物质的破坏。