长QT综合征KCNQ1基因G983A突变体的构建、体外转录与表达

目的构建先天性长QT综合征KCNQ1基因G983A突变体,并研究其在非洲爪蟾卵母细胞上的表达。方法首先进行定点诱变,构建含KCNQ1G983A突变点的原核表达载体pSP64-KCNQ1（G983A）,并对pSP64-KCNQ1（G983A）进行纯化和线性化,然后应用SP6RNA体外转录试剂盒进行转录,并回收和鉴定转录的cRNAs。制备非洲爪蟾卵母细胞,经显微注射仪将KCNQ1（G983A）cRNAs注射至卵母细胞中,2d后采用双电极电压钳记录卵母细胞膜的电流。结果成功地构建pSP64-KCNQ1（G983A）突变体,经转录获得KCNQ1（G983A）cRNAs,并在爪蟾卵母细胞上表达。结论KCNQ1基因（G983A）突变体的成功构建及表达,为进一步探讨长QT综合征的发病机制奠定了基础。     

Identification of a new lamin A/C mutation in a chinese family affected with atrioventricular block as the prominent phenotype

Even though mutations in LMNA have been reported in patients with typical dilated cardio-myopathy(DCM)and atrioventricular block(AVB)previously,the purpose of this study was to disclose this novel genetic abnormality in one Chinese family with the atypical phenotype of progressive AVB followed by DCM with normal QRS interval.Genome-wide linkage analysis mapped the AVB gene in this family to a marker at chromosome 1q21.2,where the LMNA gene was located.Direct DNA sequence analysis revealed a heterozygous G t...     

青春期起病的系统性红斑狼疮患者的临床特点分析

目的探讨青春期起病的系统性红斑狼疮(SLE)患者的病情特点。方法对98例青春期起病的SLE患者和372例成人SLE患者的临床特点进行了比较。观察指标包括疾病累及的器官数目、SLE疾病活动指数(SLEDAI)积分、病情的转归和病死率等。结果青春期起病的SLE患者占全部SLE患者的20．85%。青春期起病的患者比成人患者疾病累及的器官数目多、SLEDAI积分高、难治性SLE多、病死率高。结论青春期起病的SLE患者并非少见,这一部分患者病情变化快、病死率高,应予以高度重视。     

一进行性肌营养不良中国家系相关基因Dystrophin的突变的检测

目的 对进行性肌营养不良(duchenne muscular dystrophy,DMD)中国家系致病基因Dystrophin基因多态位点及突变位点的研究.方法 收集进行性肌营养不良家系临床资料,采用聚合酶链反应及直接测序法对此家系进行Dystrophin基因突变检测,同时对150名家系外健康对照者的该位点进行限制性核酸内切酶(restriction endonuclease)分析.结果 在进行性肌营养不良家系中发现了一个纯合变异,即Dystrophin基因21号外显子上发现一个错义变异(A2851G),导致代表天冬氨酸的882位密码子变化为甘氨酸(D882G),通过测序及限制性核酸内切酶(RELP)等方法,其家系中有6名(包括先证者)均有此位点的改变.结论 在中国人进行性肌营养不良患者的Dystrophin基因上发现了一个尚未报道的错义多态位点.     

单核苷酸多态性与自身免疫性疾病相关性的研究进展

自身免疫性疾病的发生是遗传和环境因素共同作用的结果,在遗传学研究中,HL4基因被认为对自身免疫性疾病的易感性影响最大,而连锁分析发现多个非HLA区域也与自身免疫性疾病的发生相关,而且单核苷酸多态性与疾病的相关性是近年来研究的热点,这不仅为我们进一步了解这类复杂疾病的发病机制提供了线索,而且有可能会有利于发现新的防御及干预措施.本文综述了PTPN22、IL-23R、STAT4、CD226几个热点非HLA基因的单核苷酸多态性与自身免疫性疾病易感性的研究进展.     

关节腔内注射Rh TNFR:Fc治疗炎性关节病的难治性膝关节滑膜炎的研究

目的:探讨对于炎性关节病患者的难治性膝关节滑膜炎采用注射用重组人肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(Rh TNFR:Fc)关节腔内注射的有效性和安全性.方法:对32例患有难治性膝关节滑膜炎的炎性关节痛患者进行膝关节腔内注射Rh TNFR:Fc,另20例患者作为对照组膝关节腔内注射相同剂量生理盐水.对注射前及注射后48 h、1周及2周后的临床资料进行分析,包括目标关节总体状况VAS评分、关节疼痛VAS评分、膝关节周径、B超捡查所见膝关节滑膜平均厚度、C反应蛋白、血沉.结果:在注射48 h、1周及2周后,患者的目标关节总体状况VAS评分、关节疼痛VAS评分均有明显降低(P＜0.01),1周及2周后膝关节周径有明显缩小(P＜0.05,P＜0.01),B超检查所见膝关节滑膜平均厚度在1周及2周后也有减低(P＜0.01).C反应蛋白、血沉在48 h到1周后没有明显变化,在2周后有明显降低(P＜0.05).对照组上述指标无明显变化.本研究中32例患者未发现明显不良反应.结论:关节腔内注射Rh TNFR:Fc治疗炎性关节病患者的难治性膝关节滑膜炎效果较好,短期治疗安全性较高.     

氯沙坦对肾性高血压左室肥厚大鼠心肌血管紧张素Ⅱ及原癌基因c-jun mRNA表达的影响

目的 :研究氯沙坦对肾性高血压心肌肥厚大鼠心肌血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )及左室原癌基因c junmRNA表达的影响 ,探讨AngⅡ 1型受体 (AT1R)拮抗剂逆转左室重构的可能机制。方法 :30只 10周龄的Wistar大鼠 ,体重 190～ 2 2 0g,采用两肾一夹制造肾性高血压模型 ,造模成功后随机分为三组 :假手术组、氯沙坦组和非治疗组 ,每组 10只。治疗 8周后 ,处死动物 ,采用原位杂交方法检测左心室原癌基因c junmRNA的表达 ,并用图像分析仪做半定量分析 ,用放射免疫法测定心肌组织AngⅡ的含量。结果 :经过 8周治疗后 ,氯沙坦组高血压心肌肥厚大鼠左心室原癌基因c junmRNA的表达明显低于非治疗组 (P <0 .0 1) ,心肌组织AngⅡ含量也明显低于非治疗组 (P <0 .0 5 )。结论 :AT1R拮抗剂氯沙坦能降低心肌组织的AngⅡ含量及大鼠肥厚左室原癌基因c junmR NA的表达 ,这可能是其预防和逆转左室重构的机制之一     

一个遗传性低钾周期性麻痹家系的CACNA1S基因突变研究

目的在中国人低钾周期性麻痹（hypokalemic periodic paralysis，HOKPP）家系中寻找HOKPP新的突变。方法分析了一个具有4代共46名家族成员的中国HOKPP家系。应用聚合酶链反应、连锁分析、DNA测序和限制性片段长度多态性分析技术研究了第1和第2代成员，以发现该家系可能的致病基因突变；然后用上述研究的结果检测第3和第4代成员，进一步验证结果并对正常成员作出患病的预测。结果对第1和第2代的连锁分析显示该家系的致病基因为CACNAIS基因，其LOD值为3．71；DNA测序显示1582位的核苷酸C被G所替代，为一种新的突变R528G；所有患病个体均带有此突变，而200名对照中没有此突变。检测第3和第4代成员R528G突变，发现所有患者和两名正常年轻女性携带此突变基因。结论发现了CACNAIS基因的一个R528G新突变，能导致中国人低钾周期性麻痹，其外显率可能存在性别差异，此突变将有助于低钾周期性麻痹的诊断和预测。     

胺碘酮对缺血性心肌病心力衰竭患者肿瘤坏死因子-α的影响

目的探讨胺碘酮对缺血性心肌病心力衰竭患者血清肿瘤坏死因子α(TNFα)及外周血单核细胞(PBMC)分泌TNFα的影响。方法缺血性心肌病心力衰竭患者41例随机分为对照组和胺碘酮治疗组,用放射免疫法测定治疗前后各组患者血清TNFα浓度;取患者静脉血并分离PBMC,分别加入胺碘酮和脂多糖等,使胺碘酮终浓度分别为0、0.1、1、10μmol/L进行培养,经24h孵化后取上清液,用放射免疫法测定培养上清液TNFα含量。结果在体外胺碘酮对缺血性心肌病心力衰竭患者PBMC分泌TNFα有抑制作用,并呈剂量依赖性;胺碘酮治疗后心力衰竭患者血清TNFα升高(P<0.05)。结论胺碘酮可使缺血性心肌病心力衰竭患者血清TNFα升高;在体外,胺碘酮能抑制心力衰竭患者PBMC分泌TNFα,这种作用可能与胺碘酮治疗心力衰竭的有益作用无关。     

中国一进行性肌营养不良家系相关致病基因Dystrophin突变检测结果分析

目的 探讨进行性肌营养不良（DMD）家系相关致病基因Dystrophin基因突变情况.方法 收集一个DMD家系的临床资料,采用聚合酶链反应及直接测序法对此家系成员进行Dystrophin基因突变检测,同时对140例家系外健康对照者的该基因位点进行限制性核酸内切酶分析（PELP）.结果 在DMD家系中先证者（DMD患者1例）发现了一个纯合变异基因,即Dystrophin基因59号外显子上发现一个错义变异（G9017A）,导致代表精氨酸的2937位密码子转变为为谷氨酰胺（R2937Q）.在健康对照者中未发现此位点的变异.结论 在一个中国DMD家系先证者的Dystrophin基因上发现了一个尚未报道的基因突变位点.