携带人可溶性TRAIL基因的重组腺病毒在肺癌细胞中的转染效率及表达特性研究

目的研究重组腺病毒感染肺腺癌细胞A549的转染效率及重组腺病毒介导的人可溶性肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(hTRAIL95-281)基因的体外表达。方法用不同感染滴度(MOI)(0-10 000 VP/cell)的重组腺病毒Ad-CMV-EGFP转染A549细胞后48 h收集细胞,经流式细胞仪检测其转染效率,并在共聚焦荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达;用MOI为5 000 VP/cell的Ad-CMV-EGFP感染肿瘤细胞后不同时间(24 h、48 h、72 h和96 h)收集细胞,经流式细胞仪检测其转染效率;用重组腺病毒Ad-CMV-hTRAIL95-281感染293T细胞后不同时间收集培养物用ELISA方法检测上清中的TRAIL表达。结果重组腺病毒载体对A549细胞的转染效率和绿色荧光蛋白表达在一定范围内随着MOI的增加而增高,MOI为5 000 VP/cell时转染效率达峰值,MOI为10 000 VP/cell时转染效率反而降低。重组腺病毒转染A549细胞后72 h内转染效率随时间的变化而增高,峰值为98%,96 h有所降低(P0.05)。转染重组腺病毒Ad-CMV-hTRAIL95-281的293T细胞在转染后24 h表达量最高(P0.001),达到131.45 pg/ml,48 h时TRAIL蛋白表达量明显降低(P0.01),72小时也有继续降低的趋势。结论重组腺病毒在适宜的MOI值下,在A549细胞中96小时内均有较高的转染效率,且重组腺病毒介导的可溶性hTRAIL基因在体外能够有效表达。     

辐射诱导表达载体pEgr-hTRAIL的构建及其对肿瘤细胞的体外诱导凋亡作用

目的：构建携带人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（hTRAIL）基因的辐射诱导表达载体pEgr-hTRAIL,并研究其在人肺腺癌细胞株A549中的表达及促凋亡作用。 方法：采用常规分子生物学方法构建表达质粒pEgr-hTRAIL,体外通过脂质体转染A549细胞,经G418筛选稳定转染细胞A549-shTRAIL,利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测目的基因的表达,采用Annexin-V-FITC凋亡检测试剂盒检测细胞早期凋亡。 结果：经限制性内切酶酶切鉴定pEgr-hTRAIL表达质粒构建正确;稳定转染细胞A549-shTRAIL的hTRAIL mRNA表达量明显增加;稳定转染细胞A549-shTRAIL的凋亡细胞百分数明显增加,是A549细胞的1.8倍（P<0.05）。 结论：成功构建pEgr-hTRAIL表达质粒,体外稳定转染细胞A549-shTRAIL具有明显诱导凋亡作用。     

260例军警校录取生个性化LASIK疗效分析

目的：探讨报考军警校高中毕业生近视眼应用个性化LASIK手术的疗效。方法：对260例行LASIK手术的高中青年近视采用个性化手术方案设计。结果：260例接受个体化LASIK手术的高中生术后视力均达到或超过1.0。结论：对报考军警校青年学生近视患者,实施个性化LASIK手术方案设计,成功达到或超过1.0的预矫视力标准,对维持术后一段时间内修复最佳矫正视力。预防或减少屈光回退也是较理想的。     

LASIK前后NCT眼压值的简易校正法

目的：探讨LASIK前后非接触眼压计测量值的校正方法。方法：分别用超声角膜测厚仪和NCT眼压计测量469例近视患者角膜中央厚度和眼压,LASIK术前眼压以CCT固定值来校正,以术后眼压-术后第7天眼压＋术前眼压≤21mmHg（1mm Hg=0．133kPa）为标准来校正术后眼压。结果：469例近视患者CCT在445～618μm,眼压8．0～21．7mmHg,眼压随CCT增加而增高。结论：CCT是影响眼压测量的重要因素,本法为LASIK前后NCT眼压值校正最简单而实用的一种方法。     

经阴道子宫黏膜下肌瘤切除术患者的围术期护理

<正>子宫黏膜下肌瘤是常见的妇科良性肿瘤,以往对子宫黏膜下肌瘤行子宫切除术,手术创伤大,腹部留下切口疤痕,对年轻患者,丧失了生育能力,在生理和心理上具有严重的失落感,是一种严重的心理创伤。2006年1月～2008年12月我院共行经阴道子宫黏膜下肌瘤切除术46例,保留了子宫,手术     

阿普唑仑与安定不同途径对酒依赖所致失眠的疗效观察

失眠是酒依赖病人戒断期间经常伴有的症状 ,也是酒依赖患者戒断后复饮的重要因素之一。临床上用于改善失眠症状的药物很多 ,对酒依赖患者最常用的是阿普唑仑与安定 ,但因为酒依赖病人转变为药物依赖的可能性很高 ,这些药物只宜少量 ,短期使用 ,并短时间内逐步减量到停止为止。本文对 43例有失眠症状的酒依赖病人和4例震颤谵妄病人应用阿普唑仑与安定不同途径治疗 ,对其效能与不良反应等内容进行了观察。一、对象和方法(一 )对象选择本院戒酒科 1 999年 1 1月～ 2 0 0 0年 1月住院病人中有失眠症状的病人 43例 ,全部男性 ,年龄 3 0～ 45岁 ,…     

pEgr-IFNγ重组质粒辐射诱导表达及其抑瘤作用的实验研究

目的 探讨pEgr-IFNγ重组质粒在接种B16黑色素瘤小鼠体内的辐射诱导表达及其抑瘤效应。方法 小鼠肿瘤局部注射脂质体包裹的重组质粒pEgr-IFNγ后36h，接受不同剂量X射线照射，观察各组小鼠照射后不同时间肿瘤生长速率和平均存活时间，照射后第3天用RT-PCR法检测瘤内IFNγ转录水平，照射后第l，3和5天用ELISA法检测小鼠血清中IFNγ含量。结果 照射后第3天重组质粒 20Gy组瘤内IFNγ转录水平明显高于重组质粒组；照射后第l，3天血清中IFNγ含量明显高于重组质粒组和对照组；照射后第9-15天，4次(质粒 5Gy)组小鼠肿瘤生长速率明显低于重组质粒 20Gy组，且平均生存时间明显延长。结论 多次基因-较小剂量放射治疗的抑瘤效应优于单次基因．较大剂量放射治疗；基因-放射治疗组可能通过诱导瘤内IFNγ表达增强，使血液中IFNγ浓度升高，从而提高荷瘤机体免疫功能和抗肿瘤能力。     

PGE1对缺氧缺血新生大鼠脑组织中SOD、MDA的影响

目的：探讨前列腺素E1(PGE1)，丹参对缺氧缺血新生大鼠脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)，丙二醛(MDA)的影响。方法：选用7日龄wistar大鼠，制备HIE模型后皮下、腹腔内注射PGE1及丹参。在缺氧缺血后48h处死，取颈动脉结扎侧大脑皮质，制作脑组织匀浆，监测脑组织中SOD、MDA的水平，并与正常组，HIE组及生理盐水组的测定值比较。结果：HIE组脑组织中SOD活性低，MDA水平高，同正常组对比有显著性差异(P0．05)，PGE1、丹参治疗组SOD活性高，MDA水平低，同HIE组及生理盐水组比有显著性差异(P0．05)。两药合用组脑组织中SOD水平高，MDA水平低于两药单用组，有显著性差异(P0．05)。结论：PGE可促进缺氧缺血后脑组织中SOD水平的升高，降低MDA水平，对HIE有防治作用。     

pEgr-hPTEN稳定转染联合辐射诱导人胶质瘤SHG-44细胞凋亡及Bcl-2表达下调

目的 探讨辐射诱导表达载体pEgr-hPTEN体外稳定转染人胶质瘤SHG-44细胞后联合X射线照射，诱导细胞凋亡的作用及凋亡相关蛋白Bcl-2表达的变化。方法 以脂质体介导携有外源野生型PTEN基因的辐射诱导表达载体pEgr-hPTEN，体外转染SHG-44细胞，筛选稳定转染的细胞克隆并扩增培养；应用电子显微镜、流式细胞仪等方法，检测稳定转染联合X射线照射对胶质瘤细胞超微结构、细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达等特性的影响。结果 稳定转染细胞超微结构有明显的退行性改变，可见核内染色质趋边的类似早期凋亡的改变；稳定转染联合X射线照射可诱导肿瘤细胞凋亡，5Gy以内随吸收剂量的增加，早期凋亡细胞百分数明显增加，稳定转染不同剂量照射组早期凋亡细胞百分数分别为稳定转染0Gy假照组的1．5—2．3倍、为未转染照射组的1．9—4．4倍、为未转染0Gy假照组的3．4—5．1倍；同时稳定转染细胞Bcl-2蛋白表达则呈剂量依赖性下降。结论 体外PTEN基因转染联合X射线照射可诱导肿瘤细胞凋亡明显增多，Bcl-2蛋白表达下调，具有显著的肿瘤抑制作用。     

小儿非肾性血尿与血管紧张素转换酶基因多态性相关性研究

目的探讨儿童非肾性血尿与血管紧张素转换酶基因多态性的关系。方法用PCR方法检测了2004年1~12月长春市儿童医院泌尿内科51例非肾性血尿患儿ACE基因,并分析ACE基因多态性与非肾性血尿临床表现的相关性。结果非肾性血尿患儿ACE-DD基因频率为0.25,ACE-II基因频率为0.59,ACE-DI基因频率为0.16,非肾性血尿患儿ACE基因多态性与正常对照组存在明显差异;ACE-II基因型与非肾性血尿的遗传易感性相关联,OR=2.77。结论ACE-II基因可能是发生非肾性血尿的危险因子。检测儿童ACE基因,对于早期发现和及时防治儿童非肾性血尿有重要意义。