层粘连蛋白受体的研究进展

层粘连蛋白受体的研究进展苏玲，周柔丽层粘连蛋白受体（ｌａｍｉｎｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＬＮ－Ｒ）是存在于细胞表面的跨膜糖蛋白，它广泛存在于肿瘤细胞及某些附着于基膜的正常细胞表面。由于ＬＮ－Ｒ与基膜中的层粘连蛋白（ｌａｍｉｎｉｎ，ＬＮ）的相互作用与恶性肿...     

LHS cDNA的部分克隆及其表达对肝癌细胞行为的影响

目的:克隆在肝癌组织中低表达的差异显示片段L2的基因cDNA序列,并初步探讨其在肝癌发生、发展过程中的作用.方法:将L2在GenBank中拼接后,分析其序列结构,并构建正义真核表达质粒,转染BEL-7402肝癌细胞后,对转染细胞增殖、粘附、迁移和侵袭等指标进行测定.结果:克隆得到一条1 005 bp的cDNA,其5′端712 bp与人Liprinβ1 cDNA 5′端调控序列和外显子1,2,3序列同源(100%),而3′端293 bp与Liprinβ1基因内含子4同源(100%).其间有一个510 bp开放阅读框架,起始密码位置与Liprinβ1基因相同,推断的蛋白产物除C端13个氨基酸残基外,其余均与Liprinβ1同源.此cDNA暂命名为LHS (Liprinβ1-homologous sequence).LHS cDNA正义转染BEL-7402肝癌细胞系,对于细胞的增殖活性和侵袭能力无明显影响,但可降低肝癌细胞在层粘连蛋白上的粘附和迁移能力.结论:LHS表达下调可能在肝癌的转移过程中起重要作用.     

The cellular and molecular mechanism of laminin-glycopeptides on anti-metastasis

Ｌａｍｉｎｉｎ(ＬＮ)ｉｓａｍａｊｏｒｎｏｎｃｏｌｌａｇｅｎｏｕｓｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｉｎｂａｓｅｍｅｎｔｍｅｍｂｒａｎｅｓＩｔｈａｓｂｅｅｎｒｅｐｏｒｔｅｄｔｈａｔＬＮｃｏｕｌｄａｆｆｅｃｔａｎｕｍｂｅｒｏｆｂｉｏｌｏｇｉｃｂｅｈａｖｉｏｒｓｏｆｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌｓｍｅｄｉａｔｅｄｂｙｔｈｅＬＮｒｅｃｅｐｔｏｒｓ1　ＩｔｉｓｋｎｏｗｎｔｈａｔｔｈｅＮｌｉｎｋｅｄｃｏｍｐｌｅｘｔｙｐｅｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｃｈａｉｎｓｏｎＬＮａｒｅｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｔｈｅｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎａｎ…     

整合素α6β1增强人肝癌细胞侵袭性机制的探讨

目的 研究层粘连蛋白受体α６β１整合素在人肝癌细胞侵行为中的作用。方法 采用ｄｏｍｉｎａｎｔ ｎｅｇａｔｉｖｅ策略，以无功能的α６β４－ＴＲ代替细胞表面α６β１受体，从而消除了人肝癌细胞Ｂｅｌ－７０４２ α６β１受体的功能。用划痕法和Ｂｏｒｄｅｎ小室法分别检测细胞的迁移和侵袭，明胶酶谱分析法检测细胞基质金属蛋白ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｖｔｅｉｎａｓｅｓ，ＭＭＰａ）的分泌。结果 消除α６β     

血清凝集肿瘤细胞活性检测对恶性肿瘤诊断的意义

目的:探讨人血清凝集肿瘤细胞活性检测在恶性肿瘤临床诊断及预后的意义.方法:采用体外细胞凝集实验,通过半定量计算肿瘤细胞凝集率测定血清的活性.结果:正常人、良性肿瘤患者及恶性实体瘤患者的血清均不同程度地诱导高转移潜能人鼻咽癌细胞(CNE-2L2)凝集,凝集率分别为28.2±8.3%、33.7±9.1%和68.3±10.8%.血清凝集肿瘤细胞活性检测在恶性肿瘤诊断上的阳性率为94.2%,特异性为93.7%,准确性为94.0%.结论:研究结果提示人血清凝集肿瘤细胞活性可能是一潜在的广谱恶性肿瘤标志,在恶性肿瘤的临床诊断、病情控制及预后上具有重要应用价值和广阔的应前前景.     

纤粘连蛋白介导的平滑肌细胞粘附迁移与粘着斑激酶的磷酸化

目的　探讨纤粘连蛋白介导的血管平滑肌细胞粘附和迁移与粘着斑激酶 (focaladhesionkinase ,FAK)的磷酸化的关系。方法　不同浓度的纤粘连蛋白 (fibronectin ,FN)刺激培养的血管平滑肌细胞 (smoothmusclecells,SMCs) ,观察细胞粘附反应 ,统计铺展比率。免疫沉淀和Wsternblot分别检测FAK及FAK磷酸化的表达量。利用改良的BoydenChamber测SMCs迁移。结果　FN有效地促进了SMC粘附 ,其铺展比率、迁移细胞数均显著高于对照 (P <0 0 5 ) ,且随FN浓度递增而增加。其中 2 0、40、6 0 μg ml组分别为 (75 6± 6 5 ) %、(80 9± 5 4) %和 (82 4± 7 9) % ,无组间差异 ,但均高于 5 μg ml的 (2 0 8± 3 2 ) %和 10 μg ml组的 (32 8± 4 7) % ,各组迁移细胞数也从 16 8± 3 6 HFP 2 0 0×增加到48 9± 6 1 HFP 2 0 0×。不同浓度FN作用后均有FAK的表达 ,FN10 μg ml即可致FAK磷酸化。表明FN介导SMCs粘附和迁移时伴有显著的FAK活化。结论　FN诱导平滑肌细胞粘附和迁移可能是通过FAK介导的 ,对其活性进行调控将有助于抑制血管损伤后内膜平滑肌细胞的迁移。     

猪骨形态发生蛋白的分离与初步纯化

骨形态发生蛋白(BMP)为诱导中胚层未分化间充质细胞向成骨细胞方向分化的诱导因子。本实验以猪皮质骨为材料,通过6mol/L脲抽提、分步沉淀、羟基磷灰石层析、凝胶过滤和制备电泳等方法纯化BMP,并通过将BMP植入小鼠骨骼肌诱导成骨测定活性。结果表明,猪BMP的表观分子量小于26000,可能为酸性蛋白质。     

THE CHARACTERISTICS OF LAMININ RECEPTOR ISOLATED FROM MURINE LUNG LEWIS CARCINOMA

Laminin receptor(LN-R, Mr=70,000) isolated from murine Lewis lung carcinoma was shown to be a single band on SDS-PAGE (Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide gel electrophoresis) after reduction. The present study Indicates that LN-R was a kind of glycoproteins by periodic add Schiff staining. It's pI was 4. 93. LN-R preperation was associated with phospholipid and neutral glycolipid by TLC (thin layer chromatography) or HPTLC (high performance thin layer chromtography) of chloroform-methanol extracts of LN-R, respectively, but without acidic glycolipid. Binding of LN-R with its ligand, Lamlnin, depended on the presence of Ca , Mg . LN-R may bind to actin.     

苯丙酮尿症患者病情控制前后血清氨基酸含量比较

目的:观察经治疗病情得到控制的苯丙酮尿症患者血清中支链氨基酸与芳香族氨基酸的变化,及与正常人群的区别。方法:实验于2005-12在北京大学医学部基础医学院细胞生物学系完成。选择山西省妇幼保健院提供的10例苯丙酮尿症患者为实验对象。年龄8个月～10岁,均为男性。根据新生儿疾病筛查方法,婴儿出生72h取足跟部血,发现血液苯丙氨酸浓度>120μmol/L时,诊断为苯丙酮尿症。均无并发症和其他基础疾病。由院方告之家长同意后取血。体质量均正常。治疗根据患者不同年龄,分别采用国产低(无)苯丙氨酸蛋白质、低(无)苯丙氨酸配方奶粉、低(无)苯丙氨酸的特殊营养食品,来控制苯丙氨酸的摄入量。于治疗前后进行血清氨基酸测定。结果:10例患者的测试数据均进入结果分析。10例患者治疗后病情得到控制的患者其苯丙氨酸水平较治疗前下降,未达到正常值但在理想范围之内,酪氨酸正常或上升,支链氨基酸与芳香族氨基酸的比值高于治疗前,但仍低于正常值[苯丙氨酸:正常值:(0.07±0.00)mmol/L,治疗前:(1.56±1.51)mmol/L,治疗后:(0.09±0.16)mmol/L;酪氨酸:正常值:(0.06±0.02)mmol/L,治疗前:(0.22±0.06)mmol/L,治疗后:(0.08±0.04)mmol/L;支、芳比值:正常值:>3.00±0.06,治疗前:0.47±0.21,治疗后:1.44±0.24,治疗后与治疗前比较,P<0.05]。结论:经治疗后的苯丙酮尿症患者血清氨基酸水平有明显改变。提示氨基酸代谢异常征,当其做为病因的主要氨基酸达到理想水平后,其余氨基酸的比例与正常值的比较,是否是此类疾病所特有的,与其他疾患的关联性以及其临床意义,应需进一步研究。