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目的研究全合成Jaspine B对人乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用,并探讨其对细胞DNA的损伤。方法酸性磷酸酶法(APA)检测细胞增殖,荧光显微镜、透射电镜(TEM)观察细胞形态结构,DNA琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段化,流式细胞技术检测凋亡率及线粒体膜电位(ΔΨm),Western blot检测凋亡相关蛋白表达,单细胞凝胶电泳(SCGE)检测DNA损伤。结果Jaspine B抑制细胞增殖,24、48、72h IC50分别为2.61、1.07、0.77μmol·L-1,其作用在一定范围内呈浓度和时间依赖性;细胞发生凋亡形态改变,生化特征上出现DNA梯状改变;1.50μmol·L-1及3.00μmol·L-1Jaspine B作用24h,早期凋亡细胞率分别为7.60%及15.48%,相应浓度作用48h,早期凋亡细胞率分别增至21.48%及23.60%;Jaspine B可引起ΔΨm明显下降、Cyt C水平增加,促使Caspase-3酶原剪切活化;Jaspine B作用24h,细胞出现明显DNA损伤。结论全合成Jaspine B对人乳腺癌MDA-MB-231细胞抑制增殖、诱导凋亡并诱发DNA损伤,凋亡经由依赖胱天蛋白酶的内在途径发生。 相似文献
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脂蟾毒配基通过线粒体途径诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡的研究 总被引:8,自引:1,他引:8
目的:探讨中药蟾酥主要成份之一脂蟾毒配基(Resihufogenin,RG)诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡的作用机制。方法:体外培养Bel-7402细胞.采用酸性磷酸酶法检测RG对细胞增殖抑制作用:吖啶橙荧光染色观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率及线粒体膜电位(△ψm)变化;Westem Blot检测与细胞调亡相关蛋白表达的变化。结果:RG显著抑制细胞增殖,其作用24、48、72h的IC50分别为3.8、1.8、1.2μmol/L;经10μmol/LRG处理24h后,癌细胞出现凋亡的形态变化,其凋亡率明显高于对照组细胞;RC引起△ψm下降,释放入胞质中的细胞色素c(cytochrome c,CytC)增多,促进caspase-3蛋白活化,抑制Bel-2蛋白表达。诱导细胞凋亡。结论:RG诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡.其诱导凋亡作用可能通过线粒体通路实现。 相似文献
3.
为了解巨噬细胞、T淋巴细胞在不同时期增生性瘢痕组织内的浸润及分布情况,探讨免疫细胞在增生性瘢痕发生、发展过程中的作用。利用巨噬细胞、T淋巴细胞的单克隆抗体对实验收集的不同时期增生性瘢痕组织(41例)进行免疫组织化学染色。结果在正常皮肤组织中,巨噬细胞、T淋巴细胞浸润很少;在增生性瘢痕组织中,巨噬细胞、T淋巴细胞浸润有明显的阶段性变化,1~3个月时期瘢痕组织中分布广泛、密度高,6个月以后细胞浸润逐渐减轻,在增生性瘢痕发展至12个月时期时组织内这两种免疫细胞的浸润较少。提示巨噬细胞、T淋巴细胞在瘢痕早期组织内的丰富浸润与瘢痕成纤维细胞增殖旺盛及细胞外间质过度沉积有着密切联系。 相似文献
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脂蟾毒配基对人胃癌BGC-823细胞系细胞生长的干预效应 总被引:14,自引:0,他引:14
目的:观察中药蟾酥主要成分之一——脂蟾毒配基对体外培养人胃癌BGC-823细胞系细胞生长的干预及其与细胞色素C和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活化的关系。
方法:实验于2004—09/2005—12在北京大学医学部细胞生物学系实验室完成。体外培养人胃癌BGC-823细胞系,脂蟾毒配基各组加入不同浓度的脂蟾毒配基(先用二甲基亚砜溶解,再经RPMI-1640培养液稀释至终浓度。细胞增殖及增殖抑制实验、细胞核形态观察及核DNA含量测定实验中脂蟾毒配基浓度分别为0.1,1,10μmol/L;细胞周期分布实验、细胞凋亡率实验、线粒体膜电位实验中脂蟾毒配基浓度分别为0,1,2.5,5μmol/L)。空白对照组加入RPMI-1640培养液。盐酸阿克拉霉素组加入5μmoL/L盐酸阿克拉霉素。采用酸性磷酸酶法检测细胞增殖抑制作用;细胞荧光分光光度仪观察细胞核形态及核DNA含量测定;流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率及其线粒体膜电位变化;Western blot检测与细胞凋亡相关基因蛋白表达的变化。
结果:①经0.1,1,10μmol/L脂蟾毒配基分别作用24,48,72h后,细胞生长显著抑制,脂蟾毒配基对癌细胞的生长抑制百分率与剂量、时间呈正相关,其IC50分别为3.9,2.0,1.5μmol/L。②随脂蟾毒配基作用浓度和时间的延长,癌细胞核荧光强度减弱,细胞核DNA含量明显降低。③0.1,1μmol/L脂螗毒配基作用24~48h后癌细胞阻滞在S期,5μmol/L脂蟾毒配基作用72h时,细胞阻滞在G2+M期;盐酸阿克拉霉素与癌细胞作用24~48h,细胞阻滞在S期,作用72h时细胞阻滞在G2+M期。④脂蟾毒配基作用后,细胞凋亡率明显高于对照组。⑤脂蟾毒配基引起细胞线粒体膜电位下降,释放人胞质中的细胞色素C增多,促进半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白活化,抑制Bel-2蚤白表达,诱导细胞凋亡。
结论:体外实验条件下,脂蟾毒配基抑制人胃癌BGC-823细胞生长并诱导细胞发生凋亡,其诱导凋亡作用机制与线粒体通路有关。 相似文献
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1/3LD_(50)剂量的三尖杉酯碱,高三尖杉酯碱和半合成三尖杉酯碱给药后都使G_1 期的P_(353)白血病细胞向 S期移行受到延迟,而引起G_1%增高,同时引起S%和 G_2 M%减少。48小时后基本恢复至对照水平。G_1 期进入S期的延迟可能与蛋白质合成受抑制有关。 相似文献
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双硒唑烷-1的动物体内抗肿瘤作用 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:检测新型有机硒化合物双硒唑烷-1(Eb)的动物体内抗肿瘤作用.方法:建立Lewis肺癌(1ewislung cancer,LLC)皮下移植瘤C57/BL鼠动物模型,选取25.0 mg/kg和12.5 mg/kg两个剂量的Eb作为实验组,以2.0 mg/kg剂量的顺铂(DDP)作为阳性对照,以溶剂5g/L羧甲基纤维素钠溶液为阴性对照,于接种肿瘤后第2天开始向C57/BL鼠腹腔连续注射药物7 d,探讨Eb对荷瘤鼠的存活期、肿瘤的生长速度、浸润级别、细胞形态、细胞周期和细胞凋亡的影响.结果:Eb能够明显抑制肿瘤生长和侵袭(高剂量Eb的肿瘤抑制率为80.31%),延长荷瘤鼠的存活期;形态学观察发现,给予Eb后肿瘤细胞核浓缩深染,分裂相细胞减少;流式细胞仪检测结果表明,Eb能够促进肿瘤细胞的凋亡.结论:新型有机硒化合物Eb在C57/BL小鼠体内能够明显抑制LLC的生长和侵袭,促进肿瘤细胞的凋亡,具有较强的抗肿瘤活性. 相似文献
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目的 探讨均匀双轴机械刺激对SD大鼠乳鼠成骨细胞环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达的影响。方法 设计了均匀双轴机械刺激模型,对成骨细胞给予不同时间(2,4和8h)和不同强度(20000 mierostrain,100000 mincrostrain,200000 microstraln)的机械刺激。利用免疫细胞化学和Western blot检测均匀双轴机械刺激对成骨细胞COX-2表达的影响。结果 免疫细胞化学显示COX-2表达主要位于胞质,在核周聚集明显,Western blot检测2h机械刺激无显著增多,4和8h机械刺激后COX-2的表达显著上调,但随刺激强度增加4h的表达逐渐增多,8h的逐渐降低,与免疫细胞化学结果一致。结论 均匀双轴机械刺激在一定时间和强度范围内能促进大鼠乳鼠成骨细胞COX-2的表达。 相似文献
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本文探讨顺铂多靶性抗癌药物对肝癌细胞核内微丝组装和DNA及染色质蛋白含量变化的影响。发现随顾铂作用时间的延长核内微丝逐渐解聚而减少,DNA和染色质蛋白的含量也均降低,最终必然抑制癌细胞的运动和恶性生长,顺铂是有效的抗癌药物,应深入研究其作用机理。 相似文献
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背景:国内外关于骨水泥浆料固化过程中对细胞影响及解决方案的研究报道甚少。
目的:观察β-磷酸三钙/磷酸钙骨水泥和壳聚糖微球/磷酸钙骨水泥浆料固化过程对成骨细胞的影响。
设计、时间及地点:对比观察,于2006-08/12在北京大学医学部细胞与生物研究室完成。
材料:自制2种可注射磷酸钙骨水泥:β-磷酸三钙/磷酸钙骨水泥和壳聚糖微球/磷酸钙骨水泥;小鼠成骨前体细胞株MC3T3-E1由日本RIKEN细胞库提供。
方法:将小鼠成骨前体细胞株MC3T3-E1分别接种于β-磷酸三钙/磷酸钙骨水泥和壳聚糖微球/磷酸钙骨水泥的固化块及浆料上,以细胞接种于24孔板作空白对照,用吖啶橙染色后在荧光显微镜下观察,对细胞进行计数分析。
主要观察指标:①细胞形态。②细胞计数。
结果:①荧光显微镜下可见黏附于材料块上活细胞的核呈亮绿色荧光,细胞形态完整,未见裂解。材料也吸收部分荧光,呈深绿色的背景。而在磷酸钙骨水泥浆料上仅有少数活细胞存留,明显少于β-磷酸三钙/磷酸钙骨水泥固化块组和空白对照组。②β-磷酸三钙/磷酸钙骨水泥和壳聚糖微球/磷酸钙骨水泥固化块与空白对照组相比,对MC3T3-E1细胞数无影响。两种材料浆料上的细胞数显著低于相应骨水泥固化块组和空白对照组(P < 0.01)。
结论:β-磷酸三钙/磷酸钙骨水泥和壳聚糖微球/磷酸钙骨水泥材料的浆料固化过程对MC3T3-E1细胞有不利影响,致使细胞数降低。 相似文献