槲皮素通过TGF β1/Smad3信号通路改善慢性心衰大鼠心肌纤维化

目的观察槲皮素对慢性心力衰竭大鼠心功能的改善作用,探讨TGF β1/Smad3信号通路在其中的作用机制。方法 SD大鼠45只,采用随机数字表法将大鼠随机分为假手术组(Sham组)、心力衰竭模型组(CHF组)和槲皮素干预组(Qu组);采用腹主动脉缩窄法建立压力负荷型慢性心力衰竭大鼠模型,Qu组予以槲皮素100mg/kg灌胃,余组予以等量生理盐水,连续给药8w,超声心动图观察各组大鼠心脏结构参数,HE染色、Masson染色观察各组大鼠心脏组织病理学变化,Western blot、qPCR法检测心脏组织中TGF β1/Smad3信号通路相关因子collagen I、collagenIII、TGF-β1、smad3、p-smad3表达情况。结果槲皮素可以改善心衰大鼠心功能,大鼠LVDD、LVDS明显降低,LVEF、LVFS明显升高,Qu组大鼠心肌细胞肿胀明显改善,排列较规则,结构较完整,仅见少量炎性细胞浸润及胶原纤维蛋白沉积,纤维化程度明显减轻。同时,槲皮素可下调心衰大鼠心脏心脏组织中TGF-β1、Smad3、p-smad3、collagen I、collagen III表达水平。结论槲皮素明显改善慢性心力衰竭大鼠的心功能,减轻大鼠心室重构及心肌细胞损伤,与调控TGF β1/Smad3信号通路相关。     

表没食子儿茶素没食子酸酯通过TLR4/Myd88信号通路改善失血性休克大鼠肺脏损伤

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin gallate,EGCG)对失血性休克大鼠炎症反应的抑制作用,探讨TLR4/Myd88信号通路的作用机制。方法 SD大鼠30只,随机分为假手术组(Sham)、失血性休克(Hematogenic shock,HS)组、EGCG治疗组;HS和EGCG组大鼠均采用35%放血法建立HS模型,EGCG组于HS发生后腹腔注射EGCG(50mg/Kg)。HS发生4h后处死各组大鼠,HE染色观察肺组织病理学变化,ELISA检测炎性因子TNF-α、IL-6、IL-10浓度变化,Western blot及qPCR检测TLR4/Myd88信号通路相关蛋白表达情况。结果大鼠HS组,肺组织损伤严重,病理学可见肺间隔增宽,肺泡萎陷,大量炎性细胞浸润,肺功能损伤严重,动脉血气分析提示PaCO_2明显升高,PaO_2明显降低,血清炎性因子TNF-α、IL-6水平升高,IL-10水平降低; EGCG干预后,大鼠肺组织病理学形态和肺功能明显得到改善,TNF-α、IL-6,PaCO_2水平明显降低,IL-10、PaO_2水平明显升高,EGCG下调肺组织中TLR4、Myd88、NF-κB水平表达。结论 EGCG明显改善HS大鼠肺功能及肺组织损伤,与调控TLR4/Myd88信号通路抑制大鼠炎性反应相关。     

薯蓣皂苷抑制ERK/p38MAPK信号通路减轻过敏性哮喘小鼠炎症反应

目的探讨薯蓣皂苷对过敏性哮喘小鼠炎症反应的影响及对ERK/p38MAPK信号通路的调控作用。方法 SPF级BALB/c小鼠40只,随机分为对照组、过敏性哮喘模型组、薯蓣皂苷组与地塞米松组,每组10只。利用卵白蛋白致敏联合雾化激发法建立小鼠过敏性哮喘模型。HE染色观察肺组织炎症细胞浸润情况;ELISA检测小鼠血清中OVA特异性免疫球蛋白和小鼠肺泡灌洗液中炎性因子表达;Western blot检测各组小鼠肺组织MAPK信号通路相关蛋白ERK1/2、p38 MAPK、JNK、p-ERK1/2、p-p38 MAPK及p-JNK蛋白表达。结果薯蓣皂苷降低过敏性小鼠肺组织炎性浸润,降低血清中OVA特异性IgE含量(P0.05),降低BALF中炎性因子IL-4、IL-5及IL-13,促进IFN-的表达水平(P0.05),抑制哮喘小鼠肺组织p-ERK1/2,p-p38 MAPK及p-JNK蛋白的表达水平(P0.05)。结论薯蓣皂苷抑制过敏性哮喘小鼠炎症反应,与MAPK信号通路相关。     

淋球菌肽聚糖乙酰化对大肠杆菌溶解性转糖酶A酶切作用的影响

背景:有研究表明大肠杆菌(E.coil)肽聚糖乙酰化抑制溶解性转糖酶的酶切活性,但对淋球菌胞壁质乙酰化对该类酶的影响未见报道.目的:观察淋球菌的肽聚糖乙酰化对革兰阴性菌溶解性转糖酶家族二的酶切效果的影响.方法:运用同源重组方法敲除淋球菌的肽聚糖乙酰化基因A和B(△pacAB),制备3H标记的野生株和突变株的肽聚糖.应用分子克隆和蛋白表达纯化技术获得溶解性转糖酶A,体外测定溶解性转糖酶A对淋球菌和突变株(△pacAB)的肽聚糖酶切效果和最适酶切温度.结果与结论:溶解性转糖酶A经克隆、表达和纯化得到浓度为26.12 g/mL蛋白;氚代葡糖胺标记并纯化得到氚代淋球菌肽聚糖多聚体;溶解性转糖酶A对40%乙酰化的淋球菌FA19肽聚糖酶切效果仅为9.71%,但对去乙酰化的突变株肽聚肽的酶切效果达93.45%;溶解性转糖酶对淋球菌肽聚糖酶的最佳酶反应温度为30℃.结果提示,淋球菌的肽聚糖乙酰化抑制溶解性转糖酶蛋白的切割活性,淋球菌可能通过胞壁酸乙酰化抑制溶解性转糖酶A引起的自溶的发生.     

淋球菌肽聚糖乙酰化对大肠杆菌溶解性转糖酶A酶切作用的影响**☆

背景：有研究表明大肠杆菌(E.coli)肽聚糖乙酰化抑制溶解性转糖酶的酶切活性,但对淋球菌胞壁质乙酰化对该类酶的影响未见有报道。 目的：观察淋球菌的肽聚糖乙酰化对革兰阴性菌溶解性转糖酶家族二的酶切效果的影响。 方法：运用同源重组方法敲除淋球菌的肽聚糖乙酰化基因A和B(∆pacAB),制备3H标记的野生株和突变株的肽聚糖。应用分子克隆和蛋白表达纯化技术获得大肠杆菌溶解性转糖酶A,体外测定溶解性转糖酶A对淋球菌和突变株(∆pacAB)的肽聚糖酶切效果和最适酶切温度。 结果与结论：溶解性转糖酶A经克隆、表达和纯化得到浓度为26.12 g/mL蛋白;氚代葡糖胺标记并纯化得到氚代淋球菌肽聚糖多聚体;溶解性转糖酶A对40%乙酰化的淋球菌FA19肽聚糖酶切效果仅为9.71%,但对去乙酰化的突变株肽聚肽的酶切效果达93.45%;溶解性转糖酶对淋球菌肽聚糖酶的最佳酶反应温度为30 ℃。结果提示,淋球菌的肽聚糖乙酰化抑制溶解性转糖酶蛋白的切割活性,淋球菌可能通过胞壁酸乙酰化抑制溶解性转糖酶A引起的自溶的发生。 关键词：淋球菌;肽聚糖;肽聚糖乙酰化基因;溶解性转糖酶A;组织构建     

食管鳞状细胞癌HPV 16/18型感染与p53表达的相关性研究

目的 探讨人乳头状瘤病毒（HPV）16/18型在食管鳞状细胞癌中的感染情况及其与p53的关系。方法 采用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）检测56例食管鳞状细胞癌手术切除组织（鳞癌组）和24名健康者正常食管组织（对照组）中HPV l6/18 E6、E7基因的表达,并根据其判断HPV感染情况;采用免疫组化SP法检测p53蛋白的表达水平。 结果 鳞癌组HPV感染率和p53蛋白阳性表达率均高于对照组（44.6% vs 12.5%,χ²=7.630,P=0.006;41.1% vs 4.2%,χ²=10.896,P<0.001）。在食管鳞癌组织中,HPV 16/18感染与病理分级、TNM分期和淋巴结转移有关（P<0.05）;且HPV16/18感染与p53蛋白表达呈正相关（r=0.565,P<0.001）。Kaplan-Meier生存分析结果显示,HPV感染阳性、p53表达阳性患者中位OS均小于HPV感染阴性、p53表达阴性者（21个月 vs 39个月,χ²=4.306,P=0.038;17个月 vs 41个月,^χ2=5.868, P=0.015）。控制相关的潜在混杂因素后,Cox回归模型显示HPV感染（HR=1.834,95%CI：1.010~3.330,P=0.046）和p53阳性表达（HR=2.189,95%CI：1.182~4.054, P=0.013）均可增加食管鳞状细胞癌患者的死亡风险。结论 食管鳞状细胞癌中HPV感染和p53阳性表达均较高,可能共同促进食管鳞状细胞癌的发生、发展并影响其预后。     

生酮饮食对裸鼠人结肠癌皮下瘤生长的影响

目的 构建结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,观察生酮饮食(KD)对移植瘤生长的影响.方法 选取10只雄性SPF裸鼠,对其予以皮下接种HCT116结肠癌细胞构建裸鼠结肠癌移植瘤模型,接种当天将裸鼠随机分为正常饮食组(对照组)及KD饮食组(KD组),每组5只,成瘤前两组均自由进食,成瘤5 mm开始对照组自由进食标准饲料,KD组进食...     

苓桂术甘汤通过TLR4/Myd88通路改善心衰大鼠心功能

目的探讨苓桂术甘汤对心力衰竭大鼠心功能的影响及可能机制。方法 30只SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、心力衰竭模型组(CHF)、苓桂术甘汤治疗组(LGZG),每组10只;CHF和LGZG组大鼠均采用腹主动脉缩窄法建立压力负荷型慢性心力衰竭大鼠模型,LGZG组予苓桂竹甘汤制剂治疗,超声心动图观察各组大鼠心脏结构参数,HE染色、Masson染色观察各组大鼠心脏组织病理变化,ELISA方法检测各组大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-10;Western blot和qPCR方法检测各组大鼠心脏组织中TLR4/Myd88信号通路的蛋白表达。结果与Sham组相比,CHF组大鼠心功能显著降低,心室重构明显,病理学可见心肌细胞明显肿胀,排列紊乱,有大量炎性细胞浸润,血清TNF-α和IL-6水平升高,IL-10降低(P0.05)。给予苓桂术甘汤处理后,心功能与心室重构明显改善,心肌细胞损伤减少,血清TNF-α和IL-6水平明显降低,IL-10明显升高(P0.05),下调心脏组织TLR4、Myd88、NF-κB的表达水平(P0.05)。结论苓桂术甘汤抑制心力衰竭大鼠炎症反应,改善心功能,与调控TLR4/Myd88通路相关。     

艾司西酞普兰对APP/PS1小鼠海马神经元突触功能及对BDNF-TrkB-CREB信号通路的影响

目的探讨艾司西酞普兰对APP/PS-1小鼠海马神经元突触功能及与BDNF-TrkB-CREB信号通路的关系。方法将7月龄APP/PS-1转基因小鼠随机分为模型组及艾司西酞普兰组,每组10只;另取10只同龄C57BL/6小鼠作为阴性对照组。给予10 mg/kg艾司西酞普兰灌胃治疗,连续8周,每天一次;对照组及模型组给予等体积生理盐水。Morris水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力;尼式染色检测各组小鼠海马DG区尼氏体变化;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠海马区乙酰胆碱酯酶(AChE)及胆碱乙酰转移酶(ChAT);Western blot检测小鼠海马区SYN、PSD95、GAP43、BDNF、TrkB、p-TrkB、CREB及p-CREB蛋白表达。结果艾司西酞普兰组改善APP/PS-1小鼠认知功能,小鼠逃避潜伏期减少,穿越平台次数增加,在目标象限停留时间延长,小鼠海马DG区神经元排列整齐且尼氏体数量增加,下调AChE,上调ChAT表达,且能增加SYN、PSD95及GAP43蛋白表达;此外,艾司西酞普兰还能显著增加小鼠海马区BDNF、p-TrkB及p-CREB蛋白表达,与模型组相比,差异有统计学意义(P0.05)。结论艾司西酞普兰改善小鼠海马神经元突触功能,提高APP/PS-1小鼠的学习记忆能力,可能与调控BDNF-TrkBCREB信号通路相关蛋白表达有关。     

白藜芦醇对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及可能机制

目的 观察白藜芦醇对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及能机制.方法 36只SD大鼠随机分为对照组(control组)、糖尿病肾病模型组(DN组)和白藜芦醇治疗组(Res组),每组12只,采用高脂饮食联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型.于造模成功后第8周,ELISA法检测各组大鼠尿液中24 h尿蛋白(24hTUP)水平以及肾组织中超过氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;生化分析仪检测各组大鼠血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)、白蛋白丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量;TUNEL染色观察肾组织细胞凋亡情况;Western blot检测肾组织中PI3K、Akt及p-Akt的表达.结果 给予白藜芦醇治疗后,糖尿病肾病大鼠血清中Scr、BUN及24 h TUP含量显著降低(P＜0.05);SOD活性升高,MDA含量降低(P＜0.05);肾脏细胞凋亡数量减少(P＜0.05);肾组织中PI3K与p-Akt的表达显著升高(P＜0.05),Akt的表达无显著差异(P＞0.05).结论 白藜芦醇能够减轻糖尿病大鼠肾功能损伤,抑制氧化应激反应,通过调控PI3K/Akt信号通路抑制细胞凋亡.