二肽基肽酶4抑制剂抑制Wnt/β-catenin信号通路改善慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化

目的探讨二肽基肽酶4(DPP-4)抑制剂对慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响及与Wnt/β-catenin信号通路的关系。方法将50只SPF级SD大鼠,体重(200±20)g,随机分为对照组(Control group)、模型组(Model group)、二肽基肽酶4抑制剂组(DPP-4 inhibitor group)、氯化锂组(LiCl group)及氯化锂+DPP-4组(LiCl+DPP-4 inhibitor group),每组10只。利用腹腔注射阿霉素(2.5 mg/kg)的方法构建慢性心力衰竭大鼠模型。利用超声检测各组大鼠心功能;HE及Masson染色检测各组大鼠心脏病理学改变;Western blot检测各组大鼠心脏组织中TGF-β1,α-SMA, GSK-3β,p-GSK-3β及β-catenin蛋白的表达。结果与模型组相比,DPP-4inhibitor组大鼠心功能显著改善,心脏组织病理损伤及心肌纤维化减轻,心脏组织中TGF-β1和α-SMA蛋白表达明显减少,p-GSK-3β及β-catenin蛋白表达也显著降低(P0.05);LiCl加重慢性心力衰竭大鼠模型的心脏功能、病理损伤及心肌纤维化程度,增加TGF-β1和α-SMA蛋白表达,并显著增加p-GSK-3β及β-catenin蛋白表达;但是DPP-4抑制剂能够减轻甚至部分逆转LiCl对慢性心力衰竭大鼠的影响。结论二肽基肽酶4抑制剂改善慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化,与抑制Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达相关。     

苓桂术甘汤通过TLR4/Myd88通路改善心衰大鼠心功能

目的探讨苓桂术甘汤对心力衰竭大鼠心功能的影响及可能机制。方法 30只SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、心力衰竭模型组(CHF)、苓桂术甘汤治疗组(LGZG),每组10只;CHF和LGZG组大鼠均采用腹主动脉缩窄法建立压力负荷型慢性心力衰竭大鼠模型,LGZG组予苓桂竹甘汤制剂治疗,超声心动图观察各组大鼠心脏结构参数,HE染色、Masson染色观察各组大鼠心脏组织病理变化,ELISA方法检测各组大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-10;Western blot和qPCR方法检测各组大鼠心脏组织中TLR4/Myd88信号通路的蛋白表达。结果与Sham组相比,CHF组大鼠心功能显著降低,心室重构明显,病理学可见心肌细胞明显肿胀,排列紊乱,有大量炎性细胞浸润,血清TNF-α和IL-6水平升高,IL-10降低(P0.05)。给予苓桂术甘汤处理后,心功能与心室重构明显改善,心肌细胞损伤减少,血清TNF-α和IL-6水平明显降低,IL-10明显升高(P0.05),下调心脏组织TLR4、Myd88、NF-κB的表达水平(P0.05)。结论苓桂术甘汤抑制心力衰竭大鼠炎症反应,改善心功能,与调控TLR4/Myd88通路相关。     

肾康注射液通过TGF β1/Smad3信号通路抑制失血性休克大鼠肾损伤

目的探讨肾康注射液对失血性休克大鼠肾功能保护作用,初步探讨其作用机制。方法 SD大鼠45只,随机分为假手术组(Sham组)、失血性休克模型组(HS组)及肾康注射液治疗组(SK组),采用股动脉放血法建立失血性休克大鼠模型,HS组自体血液回输复苏,SK组予以腹腔注射肾康注射液,各组于HS发生后4h处死大鼠,观察各组大鼠血清中肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)浓度变化,HE、Masson染色观察肾脏组织病理学变化,Western blot检测各组大鼠肾脏组织中TGF-β1、smad3、p-smad3蛋白表达。结果 HS组大鼠肾功能损伤严重,血清中SCr、BUN浓度明显升高,病理学可见肾小球上皮细胞空泡变性,结构破坏严重,界线不清,大量炎性细胞浸润及胶原蛋白沉积,肾脏纤维化程度较高。经肾康注射液干预后,SK组肾功能明显减轻,血清中SCr、BUN浓度明显降低,病理学观察到肾小球上皮细胞结构完整,界线清楚,细胞排列基本有序,仅可见少量胶原蛋白沉积,纤维化程度较轻,同时,肾脏组织中TGF-β1、smad3、p-smad3蛋白表达明显受到抑制。结论肾康注射液改善失血性休克大鼠肾功能损伤,抑制肾脏纤维化,与其下调TGF-β1、smad3、p-smad3蛋白表达,调控TGFβ1/Smad3信号通路相关。     

TGF-β1及其信号蛋白Smad3对大鼠心肌细胞肥大的作用

目的：探讨转化生长因子β1（transforming growth factor,TGF-β1）及其信号蛋白Smad3在诱导大鼠心肌细胞肥大中的作用。 方法： 培养新生大鼠心肌细胞，流式细胞仪检测心肌细胞总蛋白含量，RT-PCR法检测胚胎抗原ANF mRNA（atrial natriuretic factor）及Smad3 mRNA的表达，Western blotting检测Smad3蛋白的表达。 结果： 不同浓度TGF-β1均能明显增加心肌细胞总蛋白含量和ANF mRNA的表达, Smad3基因反义寡核苷酸能抑制TGF-β1诱导的心肌细胞肥大，TGF-β1诱导肥大的心肌细胞内信号蛋白Smad3表达的增加。 结论： TGF-β1及其信号蛋白Smad3可能参与诱导大鼠心肌细胞肥大的病理过程。     

肝纤维化大鼠转化生长因子β1／Smad蛋白的动态表达及意义

目的探讨转化生长因子TGF—β1／Smad信号通路在实验性肝纤维化发生中的作用。方法50只健康雄性SD大鼠分为2组：正常组和模型组,模型组大鼠利用40％CCl4油剂诱导形成肝纤维化模型,于6周及9周观测肝标本的病理,免疫组化法检测肝组织TGF—β1／Smad蛋白表达。结果①肝组织病理：与正常组比较,模型组大鼠肝组织都有不同程度的炎症和纤维化产生。模型组纤维化程度较正常对照组明显,差异有统计学意义（P〈0．05）;②TGF—β1／Smad基因蛋白：免疫组织化学检测显示,与正常对照组相比,模型组大鼠肝脏中TGF—β1、转化生长因子βI型受体（TβR—I）、Smad2、3、Smad,蛋白表达均显著增强（P〈0．01）,模型组大鼠肝脏TGF—β1、TβR-I、Smad。和Smad,之间存在正相关关系（P〈0．05或0．01）;模型组大鼠肝脏纤维化分级与TGF—β1、TβR—I、Smad2/3和Smad,之间存在正相关关系（P〈0．05或0．01）。结论肝组织TGF—β1／Smad蛋白表达水平与肝纤维化程度相关,TGF-β1／Smad信号的增强可能促进了肝纤维化的进展。     

米屈肼对心衰大鼠心肌细胞凋亡和心脏射血功能的影响及可能机制

目的 探讨米屈肼(THP)是否通过调控沉默信息调节因子2相关酶1(Sirt1)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路抑制充血性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及改善心脏射血功能。方法 将60只清洁级SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、米屈肼组以及卡托普利组，每组15只。建模成功后，超声心动图检测各组大鼠心功能；HE染色观察各组大鼠心脏组织结构；TUNEL法检测各组大鼠心肌凋亡；Western blot与RT-PCR方法检测各组大鼠心肌组织内Sirt1、NF-κB蛋白与mRNA的表达；酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清IL-6、TNF-α水平。结果 米屈肼能够上调心力衰竭模型大鼠心脏EF、FS水平、减轻心肌细胞水肿与炎性细胞浸润程度、降低心肌细胞凋亡指数、血清IL-6以及TNF-α水平。米屈肼能够上调心力衰竭模型大鼠心肌组织Sirt1蛋白与mRNA的表达水平，下调NF-κB蛋白与mRNA的表达水平。结论 米屈肼可能通过上调SIRT1/NF-κB信号通路抑制充血性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡、改善心脏射血功能。     

肝纤维化大鼠转化生长因子β1/Smad蛋白的动态表达及意义

目的 探讨转化生长因子TGF-β1/Smad信号通路在实验性肝纤维化发生中的作用.方法 50只健康雄性SD大鼠分为2组:正常组和模型组,模型组大鼠利用40％ CCl4油剂诱导形成肝纤维化模型,于6周及9周观测肝标本的病理,免疫组化法检测肝组织TGF-β1/Smad蛋白表达.结果 ①肝组织病理:与正常组比较,模型组大鼠肝组织都有不同程度的炎症和纤维化产生.模型组纤维化程度较正常对照组明显,差异有统计学意义(P＜0.05);②TGF-β1/Smad基因蛋白:免疫组织化学检测显示,与正常对照组相比,模型组大鼠肝脏中TGF-β1、转化生长因子βⅠ型受体(TβR-Ⅰ)、Smad2/3、Smad7蛋白表达均显著增强(P＜0.01),模型组大鼠肝脏TGF-β1、TβR-Ⅰ、Smad2/3和Smad7之间存在正相关关系(P ＜0.05或0.01);模型组大鼠肝脏纤维化分级与TGF-β1、TβR-Ⅰ、Smad2/3和Smad7之间存在正相关关系(P＜0.05或0.01).结论 肝组织TGF-β1/Smad蛋白表达水平与肝纤维化程度相关,TGF-β1/Smad信号的增强可能促进了肝纤维化的进展.     

盐酸法舒地尔对大鼠AMI后心室重构的保护作用研究

目的:利用Sprague-Dawley(SD)大鼠AMI模型评价Rho激酶抑制剂法舒地尔对心梗后心室重构的改善作用及其相关机制。方法:通过结扎左前降支冠脉法制备大鼠急性心梗(AMI)模型40只,随机分为AMI组,法舒地尔低、中、高剂量治疗组和卡维地洛治疗组,另设假手术组。连续给药4周后,进行超声心动图检测心功能指标,同时留取大鼠心肌组织标本检测Rho激酶、TGF-β1、Bax、Bcl-2、MMP-9表达和Smad2/Smad3信号通路的激活状态。结果:(1)超声心动图检测显示:与AMI组比较,法舒地尔3个治疗组对AMI后心室重构均有明显抑制作用,以中剂量组最佳。(2)与AMI组比较,治疗组Rho激酶和TGF-β1的m RNA水平、Bax和MMP-9蛋白表达水平明显降低,Bcl-2水平升高,Smad2/Smad3信号通路激活程度明显降低(P0.05)。结论:法舒地尔可抑制大鼠心梗后的心室重构。     

α-硫辛酸对糖尿病大鼠肾脏miR-21和Smad7表达及纤维化的影响

目的:观察α-硫辛酸(ALA)对糖尿病(DM)大鼠肾脏的保护作用,并探讨其作用机制。方法:将SD大鼠分为正常对照(NC)组、DM组和ALA组,给药6周后处死大鼠测定相应生化指标和肾脏指数。HE和Masson染色观察肾组织的形态结构变化; Western blot检测大鼠肾组织中转化生长因子β1 (TGF-β1)、p-Smad2/3、Smad7、collagen I和collagen III的蛋白表达水平; RT-qPCR检测肾组织微小RNA-21 (miR-21)的表达。结果:与NC组相比,DM组大鼠肾重/体重、血葡萄糖(BG)、血总胆固醇、血甘油三酯和24 h尿蛋白均显著增高,肾脏病理学检查显示出现肾纤维化改变,Smad7蛋白水平显著降低,TGF-β1、p-Smad2/3、collagen I和collagen III显著增高,miR-21水平亦显著升高(P 0. 05); ALA治疗后,DM大鼠除了BG无明显变化外,其余生化指标和肾脏指数均明显低于DM组,肾脏病理学检查显示肾纤维化病变明显得到改善,Smad7蛋白较DM组显著升高,TGF-β1、p-Smad2/3、collagen I和collagen III较DM组显著降低,miR-21水平较DM组显著降低(P 0. 05)。结论:ALA可抑制DM大鼠肾脏纤维化的发生发展,其机制可能是通过抑制TGF-β1和miR-21表达而上调Smad7蛋白的表达水平,使细胞外基质沉积减少。     

曲尼司特对CsA慢性肾毒性大鼠TGF-β/Smad通路的影响

目的 探讨不同剂量曲尼司特(TNL)对环孢素A(CsA)慢性肾毒性大鼠肾脏彻TGF-β/Smad通路的的影响.方法 雄性SD大鼠34只,随机分成正常对照组、模型组、TNL低剂量治疗组、TNL中剂量治疗组、TNL高剂量治疗组、安博维治疗组.采用低盐饮食加CsA 20 mg/(kg·d)灌胃的方法建立环孢素A慢性肾毒性大鼠模型.用RT-PCR和免疫组织化学检测不同剂量TNL对大鼠肾脏TGF-β1、Snad3、Smad7的影响.结果 TNL能下调CsA慢性肾毒性大鼠肾组织中TGF-β1、Smad3的mRNA水平及在肾脏的表达,上调Smad7的mRNA水平及在肾脏的表达.结论在CsA慢性肾毒性大鼠模型中,TNL可能通过调节TGF-β/Smad通路而发挥抗纤维化的作用,从而减缓CsA慢性肾毒性的进展.     

大鼠心肌肥厚过程中信号蛋白Smad3的变化

为研究SMAD信号通路在大鼠心肌肥厚中的作用 ,结扎大鼠腹主动脉复制心肌肥厚模型 ,在不同时间点检测左心室重量指数 (leftvertricularmassindex,LVMI) ,RT -PCR法检测肥大心肌组织中胚胎抗原心房利钠因子 (atrialna triureticfactor,ANF)的mRNA表达、转化生长因子β1(transforminggrowthfactor β1,TGF β1)及Smad3的mRNA表达 ,West ernblotting检测Smad3的蛋白表达。结果术后 3天LVMI开始上升并持续至 4周 ,肥大心肌组织中ANF、TGF β1、Smad3的mRNA表达水平以及Smad3的蛋白表达术后 3天开始上升 ,持续至 4周 ,术后 2周为表达高峰 (P <0 0 1)。提示信号蛋白Smad3参与了腹主动脉结扎诱导的大鼠心肌肥厚病理过程     

结缔组织生长因子增加TGFβ活化成肌纤维细胞的作用

探讨结缔组织生长因子 (CTGF)对转化生长因子 β1(TGFβ1)诱导成肌纤维细胞的影响及其与Smad信号通路的关系。细胞免疫组化检测成纤维细胞表型转化。Western免疫印迹法检测细胞α 平滑肌肌动蛋白 (α-SMA)及磷酸化Smad2的水平 ,免疫共沉淀检测Smad2 / 3与Smad4复合物的水平 ,提取核蛋白后再用Western免疫印迹法检测Smad2在细胞核内的聚积。结果显示CTGF不能使细胞表达α-SMA ,TGFβ1显著促进α- SMA表达 (p <0.0 1) ,CTGF加TGFβ1共同刺激又明显高于TGFβ1(p <0. 0 5 )。TGFβ1可明显诱导Smad2磷酸化、Smad2 / 3,4复合物形成以及Smad2在细胞核内的聚集 ,CTGF加TGFβ1联合刺激与TGFβ1相比没有明显变化。提示CTGF可以增强TGFβ1诱导的成肌纤维细胞生成 ,但CTGF的这种作用不依赖加强TGFβ1诱发的Smad信号传导     

淫羊藿-女贞子提取物对骨质疏松大鼠模型TGF-β/Smads通路的影响

目的探讨淫羊藿-女贞子其有效成分提取对糖皮激素性骨质疏松大鼠模型转化生长因子(TGF-β1)/Smads通路的影响。方法选取SPF级雄性大鼠60只,随机分为正常组、骨质疏松组与淫羊藿-女贞子提取物组,每组各20只。造模8周后,观察各组大鼠的体重,取股骨部位称其干重、湿重及煅烧后灰重,并计算称重后的比值。应用免疫荧光检测大鼠股骨TGF-β1、Smad2/3/4和Smad7蛋白的表达情况。结果骨质疏松组大鼠骨量、体重及,TGF-β1,Smad2/3、Smad4蛋白的表达均显著降低,Smad7明显升高;与模型组相比,淫羊蕾-女贞子提取物组大鼠的骨量及体重均明显增加,股骨TGF-β1、Smad2/3、Smad4蛋白显著升高,Smad7明显降低(P0.01)。结论淫羊藿-女贞子提取物降低大鼠骨质疏松的发生与激活TGF-β/Smads通路相关。     

慢性盆腔炎模型大鼠中miR-224-3P及TGF-β/Smads信号通路 相关分子的表达水平与子宫组织炎症相关性*

目的：探究miR-224-3P 及转化生长因子-β（TGF-β）/Smads 信号通路相关分子在慢性盆腔炎模型大鼠子 宫组织中的表达水平及其与子宫组织炎症的相关性。方法： 将大鼠分为对照组和实验组,实验组通过机械损伤及 接种混合菌构建大鼠慢性盆腔炎模型,H-E 染色检测大鼠子宫组织病理特性,ELISA 检测大鼠外周血肿瘤坏死因 子α（TNF-α）、核因子κB（NF-κB）水平的变化,qPCR 检测子宫组织miR-224-3P、TGF-β 和Smad3 mRNA 表达 水平,并进行相关性分析,免疫印迹检测子宫组织TNF-α,NF-κB,TGF-β 和Smad3 蛋白表达水平。结果：H-E 染色结果表明,与对照组相比,实验组大鼠出现明显慢性盆腔炎变化。ELISA 结果表明外周血 TNF-α、NF-κB水 平显著高于对照组。qPCR 结果显示,实验组miR-224-3P 显著上调, TGF-β 和Smad3 mRNA 显著上调,且miR- 224-3P 与TGF-β 和Smad3 mRNA 呈正相关。免疫印迹结果表明实验组子宫组织TGF-β、Smad3 和p-Smad3 蛋白 表达水平显著升高。结论： 慢性盆腔炎模型大鼠子宫组织中miR-224-3P 表达与TGF-β、Smad3 呈显著正相关, 可能与转化生长因子-β/Smad3 信号通路的磷酸化相关。     

芒果苷对心肌梗死后慢性心衰大鼠的保护作用及对Nrf2/HO-1信号通路的影响

目的 探讨芒果苷对心肌梗死后慢性心衰大鼠炎症反应和氧化应激的影响及对Nrf-2/HO-1信号通路的影响。方法 50只大鼠随机分为假手术组（sham)、心肌梗死后慢性心衰大鼠模型组(MI)、芒果苷低剂量组（MFL）、芒果苷中剂量组（MFM）及芒果苷高剂量组（MFH）,每组10只。采用结扎大鼠冠状动脉导致急性心肌梗死制备慢性心衰大鼠模型,利用超声检测各组大鼠心功能;HE染色检测心肌组织病理学改变;ELISA检测血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β（IL-1β）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平;免疫荧光检测心肌组织ROS水平;检测大鼠心肌组织中超过氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量;Western blot检测Nrf-2/HO-1信号通路相关蛋白Nrf-2及HO-1表达情况。结果 芒果苷中、高剂量组大鼠心功能明显改善;心肌组织结构改善;IL-6、IL-1β及TNF-α水平降低;ROS水平降低,SOD活性明显升高,而MDA含量显著降低;同时,Nrf-2及HO-1蛋白表达进一步增加（P<0.05）。结论 芒果苷能够降低心肌梗死后慢性心衰大鼠炎症反应及氧化应激,可能与激活Nrf-2/HO-1信号通路有关。     

佐剂性关节炎大鼠心肺功能损伤与NF-κBp65/TNF-α、TGF-β1/Smads信号通路激活的相关性研究

目的研究佐剂关节炎(AA)大鼠心肺功能变化与NF-κBp65/TNF-α、TGF-β1/Smad通路的关系。方法将30只大鼠随机均分为正常对照(NC)组和模型对照(MC)组,向MC组大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂0.1 ml致炎,复制成AA模型。致炎19 d后,观察大鼠足跖肿胀度、关节炎指数(AI),采用超声诊断仪检测大鼠心功能、小动物肺功能仪检测肺功能变化,免疫印迹法检测大鼠心肺NF-κBp65、TNF-α、TGF-β1、Smad2、Smad4、Smad7蛋白表达。结果与正常组比较,AA大鼠足趾肿胀,AI升高,心肺功能参数降低,心肺组织NF-κBp65、TNF-α、TGF-β1、Smad2、Smad4蛋白表达升高,Smad7降低(P0.01或P0.05);相关性分析显示,AA大鼠心肺功能参数与NF-κBp65/TNF-α、TGF-β1/Smad通路存在关联。结论 AA大鼠心肺功能损伤可能与NF-κBp65/TNF-α、TGF-β1/Smad通路过度激活有关。     

AGEs对肾小管上皮细胞转分化、1型胶原合成及smad信号通路的影响

目的:观察终末期糖基化终产物(AGEs)对正常大鼠近端肾小管上皮细胞（NRK52E ）转分化、collagenⅠ合成及Smads信号通路的影响。 方法:应用自制的AGEs（AGE-BSA）刺激NRK52E细胞，采用免疫细胞化学方法检测pmad2/3核表达情况；ELISA方法检测细胞培养上清TGF-β₁的浓度；RT-PCR检测TGF-β₁、Smad2、Smad3和Smad7 mRNA的表达；Western印迹检测α-平滑肌肌动蛋白（SMA）、E-钙粘着糖蛋白（cadherin）和1型胶原（collagenⅠ）蛋白的表达。 结果: AGE-BSA刺激15 min后pSmad2/3核表达明显增加，于30 min（68%）和24 h（76%）出现两个高峰，与刺激前及时间匹配的BSA对照组比较均有显著差异（P<0.05）；AGE-BSA以时间依赖方式上调TGF-β₁、Smad2、Smad3和Smad7 mRNA的表达；NRK52E细胞α-SMA和collagenⅠ蛋白表达高于对照组（P<0.01），E-cadherin蛋白表达低于对照组（P<0.01），细胞上清液TGF-β₁的浓度高于对照组（P<0.01）。 结论:AGEs可诱导肾小管上皮细胞Smads信号通路活化，促进肾小管上皮细胞转分化和细胞外基质collagenⅠ的合成。     

CXXC5 对心房颤动大鼠心肌纤维化的影响及机制

目的:探讨锌指蛋白5(CXXC5)在心房颤动大鼠心肌纤维化中的表达及其对心肌纤维化的影响及可能机制。方法:将40只大鼠分为对照组(正常大鼠组)、空白对照组(心房颤动模型大鼠组)、阴性对照组(心房颤动大鼠尾静脉注射阴性对照病毒组)和过表达CXXC5组(心房颤动大鼠尾静脉注射过表达CXXC5病毒),每组10只。空白对照组、阴性对照组和过表达CXXC5组大鼠建立心房颤动心肌纤维化模型(腹部皮下注射异丙肾上腺素建立心房颤动心肌纤维化模型)。伊红-苏木素(HE)染色和Masson染色观察心肌组织形态学变化,并测定胶原容积分数(CVF);采用荧光定量聚合酶链反应(qPCR)测定心肌组织中Ⅰ型胶原、CXXC5、转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad7 mRNA水平;采用Western blot法测定大鼠心肌组织中Ⅰ型胶原、CXXC5、TGF-β1、Smad7蛋白水平。结果:HE染色和Masson染色显示:对照组大鼠心肌组织形态学正常;空白对照组和阴性对照组大鼠心肌细胞排列紊乱,间质胶原纤维增多,心肌纤维化严重;过表达CXXC5组大鼠心肌细胞排列稍紊乱,心肌纤维化较轻;模型组大鼠CVF明显高于对照组(P0.05)。与对照组相比,其他3组大鼠CVF升高(P0.05),CXXC5、Smad7 mRNA和蛋白水平升高(P0.05),Ⅰ型胶原、TGF-β1 mRNA和蛋白水平降低(P0.05);与空白对照组和阴性对照组相比,过表达CXXC5组大鼠CVF降低(P0.05),心肌组织中CXXC5、Smad7 mRNA和蛋白水平升高(P0.05),Ⅰ型胶原、TGF-β1 mRNA和蛋白水平降低(P0.05);空白对照组和阴性对照组大鼠心肌组织中Ⅰ型胶原、CXXC5、TGF-β1、Smad7 mRNA和蛋白水平差异无统计学意义(P0.05)。结论:心房颤动心肌纤维化大鼠心肌组织CXXC5水平降低,TGF-β1/Smad7信号通路激活;过表达CXXC5可通过抑制TGF-β1/Smad7信号通路抑制心房颤动大鼠心肌纤维化。     

外源性硫化氢对2 型糖尿病大鼠心肌纤维化及TGF-β1 / Smads 信号通路的影响

目的:观察外源性硫化氢(H_2S)对2型糖尿病(T2DM)大鼠心肌间质纤维化和TGF-β1/Smads信号通路的影响,探究H_2S对2型糖尿病大鼠心肌纤维化的作用及机制。方法:给予47只雄性SD大鼠高糖高脂饮食饲养4周并腹腔注射40 mg/kg链尿佐菌素(STZ)构建T2DM模型。腹腔注射后3 d和5 d采尾静脉血测血糖,血糖≥16.7 mmol/L提示糖尿病大鼠模型构建成功。选取糖尿病大鼠20只,正常大鼠20只,随机分组为:正常对照组(Control组)、硫氢化钠对照组(NaHS组)、糖尿病组(DM组)、糖尿病+硫氢化钠组(DM+NaHS组),每组10只。予以DM+NaHS组和NaHS组大鼠腹腔注射NaHS溶液100μmol/(kg·d),予以Control组和DM组腹腔注射等量生理盐水,持续12周。12周后,留取大鼠血清,检测空腹血糖(FBG);应用超声心动图测量各组大鼠左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)、左室短轴缩短率(LVFS)、左心室射血分数(LVEF)和E/A ratio;采用Masson染色法评估心肌间质纤维化程度和使用Image-Pro Plus 6.0软件测定心肌间质胶原容积分数(CVF);应用Western blot检测心肌TGF-β1、Smad7、p-Smad2/3蛋白和Ⅰ型胶原蛋白表达水平。结果:与Control组相比,DM组大鼠FBG明显升高,心脏收缩与舒张功能恶化,心肌间质胶原纤维显著增加,CVF明显增加,TGF-β1、p-Smad2/3和心肌Ⅰ型胶原蛋白表达水平明显上调,Smad7蛋白明显下调(P0.05);与DM组相比,DM+NaHS组大鼠血糖水平明显降低,心脏收缩与舒张功能改善,心肌间质胶原纤维明显减少,CVF明显减少,心肌组织TGF-β1、p-Smad2/3、心肌Ⅰ型胶原蛋白表达明显下调,Smad7蛋白明显上调(均P0.05)。结论:外源性H_2S对2型糖尿病大鼠心脏具有保护作用,其机制可能是与通过调控TGF-β1/Smads信号通路、改善糖尿病大鼠心肌纤维化有关。     

卵泡刺激素调节大鼠卵巢颗粒细胞中Smad2/Smad3蛋白的表达及磷酸化

目的:研究卵泡刺激素(FSH)对大鼠卵巢颗粒细胞中Smad2/Smad3蛋白的调节。方法:21dSD雌鼠,腹腔注射孕马血清20IU,对颗粒细胞进行原代培养,用转化生长因子β受体Ⅱ(TβRⅡ)抗体中和卵巢颗粒细胞表面TβRⅡ,以阻断TGFβ/Smads信号通路,再以不同浓度的FSH对细胞进行不同时间的处理,免疫印迹法检测TGFβ信号通路中TβRⅡ、Smad2/Smad3及P-Smad2/P-Smad3蛋白的表达。结果:TβRⅡ、Smad2/Smad3、P-Smad2/P-Smad3蛋白的表达量与FSH的作用呈时间依赖性显著增强;TGFβ/Smads信号通路被阻断后再用FSH处理,Smad2/Smad3、P-Smad2/P-Smad3蛋白的表达量没有明显变化;细胞表面TβRⅡ恢复后,Smad2/Smad3、P-Smad2/P-Smad3蛋白的表达量有少量增加。结论:FSH刺激大鼠卵巢颗粒细胞中Smad2/Smad3的表达和磷酸化;FSH对Smad2/Smad3的激活作用在相当程度上依赖于TβRⅡ。