农杆菌介导的DREB1A基因转化多花黑麦草及其转化体系的优化

采用携带卡那霉素抗性基因nptII和GUS基因的ubiquitin启动子驱动的表达载体pBI121／DREB1A的根癌农杆菌AGL1, 对多花黑麦草幼胚来源的胚性愈伤组织进行了遗传转化,并优化了各种影响因素。胚性愈伤组织经根癌农杆菌感染和共培养后,用50mg／L巴龙霉素筛选抗性愈伤组织,待抗性愈伤组织在IB分化培养基上分化成苗后用25mg／L卡那霉素进一步筛选再生植株, 获得了部分抗性植株。抗性植株的总DNA用DREB1A基因的特异引物进行PCR检测,转化频率为2.14％,PCR-Southern blot进一步验证了转化植株基因组中含有该外源基因。各种影响转化效率因素的优化实验表明,当转化时菌液浓度的OD600为2.0、侵染时间为1h、共培养时间为2d、共培养温度为21℃及在共培养期间使用乙酰丁香酮等,均可明显提高转化频率。     

狭叶柴胡甲醇提取物的气相色谱-质谱分析

对狭叶柴胡全草经甲醇浸泡，超声波震荡提取后用气相色谱-质谱联用技术进行化学成分的分离鉴定，结合计算机检索技术，鉴定它们的结构，应用色谱峰面积归一法测定各组分的相对百分含量。结果：共分离出33个色谱峰，鉴定了其中的29个组分，占总含量的97．3％。其中主要组分核黄素18．3％，5-甲基-2，4-哌嗪二酮为12．2893％，8-烯环-16-碳酸酯为11．947％，环氧丙烯醚为5．8394％，5-羟甲基-呋喃甲醛为5．5726％等。     

川西獐牙菜甲醇提取物的气相色谱-质谱分析

研究川西獐牙菜甲醇提取物的成分组成．川西獐牙菜全草经甲醇浸泡，超声波震荡提取后用气相色谱．质谱联用技术进行化学成分的分离鉴定，结合计算机检索技术，鉴定它们的结构，应用色谱峰面积归-法测定各组分的质量百分含数．共分离出34个色谱峰，鉴定了其中的26个组分，占总含量的9r7．3％．主要组分为2，6，10，15，19，23-六甲基-2，6，10，14，18，22-二十四烷六烯27．2％，棕榈酸14．6％，十八烷基三烯12．1％，油酸6．2％，香豆酮5．4％等．分析鉴定结果可作为川西獐牙菜藏药材的初步定性依据．     

普通小麦与高冰草不对称体细胞杂种F2代：Ⅰ表型与性状 …

普通小麦济南１７７原生质体和经紫外线照射的高冰草原生质体用ＰＥＧ法诱导融合,形成杂种植株,但未能正常结实。杂种植株经子房诱导产生可育Ｆ０代;将Ｆ０代产生的４粒种子播种后产生Ｆ１代植株,对由其产生的Ｆ２代４个株系进行田间观察和室内考种。分析表明,Ｆ２代植株的表现型及产量性状均明显优于亲本小麦。田间穗行,株系表型稳定,具有抗寒、茎杆硬、抗倒伏等优良性状。在分蘖数、单株粒重衣千粒重等产量性状上亦有明显优     

玉米愈伤组织的扫描电镜观察

用扫描电镜观察了玉米愈伤组织在继代周期中的变化及其胚状体发生过程。结果表明,愈伤组织的胚性与表面结构有明显关系。继代半年和一年半的胚性愈伤组织表面结构无显著差异,均可产生大量正常和畸形胚状体。正常胚状体可通过类似合子胚的分化或不规则发育过程而成熟。畸形胚形态多样,其中多数盾片异常。根据观察认为,胚状体一般是多细胞起源的。     

小麦与高冰草体细胞杂种F_2代Ⅱ.同工酶和蛋白质分析

比较了小麦与高冰草杂种Ｆ２代不同穗行和株系的部分植株与亲本进行酯酶同工酶及可溶性蛋白质,分析高冰草遗传物质在杂种后代的遗传和表达,结果证明高冰草遗传物质在杂种中稳定存在并正常表达．粗蛋白含量的测定表明,杂种Ｆ１及Ｆ２代蛋白质含量为１７．４９％～２０．１８％,介于亲本小麦（１５．１４％）与高冰草（２５．５８％）之间．氨基酸分析发现,杂种Ｆ２代种子的几种必需氨基酸,包括缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、组氨酸和精氨酸,显著高于普通小麦．     

玉米再生植株的性状和染色体变异

继代培养6～8个月的玉米自交系黄早4愈伤组织产生的植株,其形态特征和生长发育出现多种变异。平均株高、叶片数和茎粗低于对照(实生苗).多数植株生育期变短,生殖器官发育异常,结实率低,单株结籽数少.一些植株的株型、叶序或花丝颜色等性状也发生变化.根尖细胞染色体分析表明,再生植株中,二倍体、混倍体和非整倍体的频率分别为84.25％、9.45％和6.36％,有25.2％的植株出现明显的染色体结构变异。     

祁连龙胆愈伤组织和再生植株的生长及其两种药效成分分析

通过不同激素组合的培养基筛选出祁连龙胆（Gentiana Przewalskii Maxim.）的快速生长细胞系并获得再生植株. 采用反相高效液相色谱法测定愈伤组织及其再生植株中獐牙菜苦甙（Swertiamarin）、龙胆苦甙(Gentiopicroside)的含量. 结果表明：(1）祁连龙胆愈伤组织在不同培养基上诱导率和生长速度不同，在MS+2?mg/L 2,4 D +1?mg/L 6 BA +6?mg/L GA的培养基上诱导率最高，达78.0％. 在MS+3?mg/L 2,4 D +0.5?mg/L KT的培养基上生长最快，增殖倍数达到7.18； (2）祁连龙胆愈伤组织及其再生植株有效成分及含量与原植株相比均有差别，其中，愈伤组织含有0.265%的龙胆苦甙，低于原植株(4.225%)，再生植株含有0.279%的獐牙菜苦甙和1.579%的龙胆苦甙，前者高于原植株（0.260％），但后者略有下降. 按生长速度推算，愈伤组织及其再生植株积累的药效成分含量明显高于原植株，值得进一步开发利用.     

普通小麦与玉米的体细胞杂交再生完整植株

从小麦济南177制备得到两种原生质体，一种来源于具有一定分化能力的愈伤组织但其分裂能力较低；一种来源于生长迅速的悬浮细胞但不能分化，将二种原生质体混合，共同作为受体与经过紫外线（UV）照射的玉米（Zea mays L)原生质体在PEG诱导下融合，培养后获得再生克隆并进一步分化为植株，而它们单独与玉米原生质体融合均不能再生植株，通过染色体、同工酶及5SrDNA分析及生长习性分析证明再生植株均为体细胞杂种。     

胡萝卜与川西獐牙菜不对称体细胞杂交

川西獐牙菜(Swertia musstii Franch)原生质体经260μw／cm^2紫外线照射30s、1min、2min、3rain后，与胡萝卜(Daucus carota L.var.sative DC)原生质体在PEG诱导下融合．融合再生的110个单细胞克隆形态学、染色体、同功酶分析表明，35个含有酯酶及／或过氧化物酶同工酶的双亲特征带，部分杂种产生新带，染色体数目多为16-18，确证它们为体细胞杂种．