小麦与高冰草原生质体融合及再生能力的恢复

以普通小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍ）济南１７７悬浮细胞来源的原生质体与高冰草（Ａｇｒｏｐｙｒｏｎｅｌｏｎｇａｔｕｍ）愈伤组织来源的原生质体用ＰＥＧ法诱导融合．由于来源材料的长期继代，小麦原生质体的再生能力已很低；高冰草原生质体不能分裂；而融合产物却能高频率的分化出完整植株．融合再生植株的表型类似高冰草，染色体数目和同工酶谱亦然．但它们早期发育的模式与小麦相似．     

BYDV CP基因转化小麦原生质体及转基因植株再生

用原生质体融合技术与ＰＥＧ介导的直接转基因方法相结合，使高频率分裂的小麦济南１７７悬浮细胞系原生质体与具有分化能力的小麦济南１７７胚性意伤组织原生质体融合，形成具有分裂和分化能力的融合细胞；同时，利用ＰＥＧ对原生质体的直接转基因作用，将带有抗病毒基因（ＢＹＤＶＣＹｇｅｎｅ）的质粒Ｐｐｐ１５与带有抗性选择标记基因的质粒严ＰＢｌＡｃｔＳＮ导入融合细胞中．经抗性筛选获得抗潮霉素（Ｈｍ）的阳性克隆并再生植株．对再生植株作ＰＣＲ检测表明，ＣＰ基因已整合到转化植株的基因组中并稳定表达．     

小麦与高冰草原生质体融合及再生能力的恢复

以普通小麦济南１７７悬浮细胞来源的原生质体与高冰草愈伤组织来源的原生质体用ＰＥＧ诱导融合，由于来源材料的长期继代，小麦原生质体的再生能力已很低；高冰草原生质体不能分裂；而融俣产物却能高频率的分化出完整植株。     

BYDVCP基因转化小麦原生质体及转基因植株再生

用原生质体融合技术与ＰＥＧ介导的直接转基因方法相结合，使高频率分裂的小麦济南１７７悬浮细胞系原生质体与具有分化能力的小麦济南１７７胚性愈伤组织原生质体融合，形成具有分裂和分化能力的融合细胞；同时，利用ＰＥＧ对原生质体的直接转基因作用，将带有抗病基因的质粒Ｐ＾ｐｐ１５与带有抗性选择标记基因的质粒Ｐ＾ＢｌＡｅｔＳＮ导入融合细胞中。经抗性筛选获得抗潮霉素的阳性克隆并再生植株。对再生植株作ＰＣＲ检测表明，     

大肠杆菌和枯草芽胞杆菌的原生质体融合

本文对大肠杆菌（Escherichia coli）和枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis）的原生质体融合进行了研究，获得了融合菌原生质体的再生，根据两种菌的形态和利用淀粉的能力上存在的明显差异，对融合菌的原生质体进行筛选，实验结果表明，融合细胞具有降解淀粉的能力，但不形成芽胞。     

转抗虫融合基因(cry1Ac3-cpti)玉米(Zeamays L.)植株的获得及其抗虫性分析

将苏云金杆菌家族中的cry1Ac3基因与豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(cpti)融合成融合基因，构建cry1Ac3-cpti融合基因植物表达载体，表达Bt-CpTI抗虫融合蛋白．用基因枪转化技术将cry1Ac3-cpti融合基因分别导入玉米优良自交系E28及340的胚性愈伤组织中，轰击后的愈伤组织经筛选剂3次筛选，获得可育的再生植株．经PCR及Southernblot分子检测，证实所获得的再生植株为转基因植株．抗虫性分析结果表明，部分转基因玉米植株对玉米螟虫有较强的抗性．将苏云金杆菌家族中的cry1Ac3基因与豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(cpti)融合成融合基因，构建cry1Ac3-cpti融合基因植物表达载体，表达Bt-CpTI抗虫融合蛋白．用基因枪转化技术将cry1Ac3-cpti融合基因分别导入玉米优良自交系E28及340的胚性愈伤组织中，轰击后的愈伤组织经筛选剂3次筛选，获得可育的再生植株．经PCR及Southernblot分子检测，证实所获得的再生植株为转基因植株．抗虫性分析结果表明，部分转基因玉米植株对玉米螟虫有较强的抗性．     

木本植物原生质体培养与融合研究进展

为了全面了解模板植物原生质体培养和融合的现状，找出原生质体培养的规律，概述了原生质体的分离、培养及再生植株的条件和影响因素，介绍了国内外原生质体培养和融合及无性系变异筛选及遗传转化的研究动态。     

转抗虫融合基因(cry1Ac3-cpti)玉米(Zea mays L.)植株的获得及其抗虫性分析

将苏云金杆菌家族中的cry1Ac3基因与豇豆胰蛋白酶抑制剂基因（cpti)融合成融合基因，构建cry1Ac3-cpti融合基因植物表达载体，表达Bt-CpTI抗虫融合蛋白。用基因枪转化技术将cry1Ac3-cpti融合基因分别导入玉米优良自交系E28及340的胚性愈伤组织中，轰击后的愈伤组织经筛选剂3次筛选，获得可育的再生植株。经PCR及Southern blot分子检测，证实所获得的再生植株为转基因植株。抗虫性分析结果表明，部分转基因玉米植株对玉米螟衣较强的抗性。     

药用植物石防风与柴胡不对称体细胞杂交的初步研究

经狭叶柴胡悬浮细胞系分离的原生质体用强度为２６０μＷ／ｃｍ＾２紫外线照射０，１，２，３ｍｉｎ后，与石防风原生质体在ＰＥＧ诱导下融合，对融合再生的５６个单细胞克隆进行杂种形态学、染色体、同功酶分析表明，其中中的３４个为体细胞杂种细胞系。５个杂种愈伤组织（不对称融合产物）在培养１２个月时再生出完整小植株。     

东乡野生稻原生质体再生小植株

由东乡野生稻的细胞悬浮培养物游离原生质体，采用改良的ＲＹ－２培养基以琼脂糖珠包埋培养，能产生细胞分裂。预分化实验表明：ＡＢＡ能有效地提高原生体愈伤组织的再生能力。最后成功地诱导出原生质体再生植株。     

大蕉胚性培养物及其原生质体再生植株的染色体分析

 采用看护培养法对大蕉胚性细胞悬浮系（Embryogenic cell suspensions, ECS）来源的原生质体进行培养,并研究了不同品种的看护细胞对原生质体培养的影响,以及大蕉ECS及其原生质体再生植株的染色体数目。结果发现,采用贡蕉ECS作为看护细胞时,大蕉原生质体培养15 d后细胞分裂频率达到8.5%,培养30 d后细胞团形成率为0.35%;而以大蕉ECS作为看护细胞时,全部原生质体褐化,不能正常发育。染色体检测结果表明,大蕉ECS的染色体数目不稳定,除含有正常的三倍体染色体数目的细胞（2n=3x=33）外,还出现大量染色体数目异常的细胞。其中绝大部分细胞含有多倍和非整倍的染色体数目,仅14.5%的细胞含正常三倍体染色体数目;但通过ECS原生质体培养获得的再生植株具有正常的三倍体染色体数目（2n=3x=33）。     

Genetic transformation of calli from maize and regeneration of herbicide-resistant plantlets

The herbicide-resistant geneals ofArabidopsis thaliana has been transferred into embryonic calli of maize by microprojectile bombardment. We have obtained chlorsulfuron-resistant calli and regenerated plantlets through selection by herbicide chlorsulfuron. The results of PCR analysis and Southern blotting indicate that geneals has been transferred into some plantlets. The test of spraying chlorsulfuron indicated that the transgenic plantlets had favorable herbicide-resistant trait. The purpose of the research was to obtain chlorsulfuron-resistant transgenic maize and hope that this kind of high efficient herbicide could be widely used in rotation soil of wheat and maize. In addition, through spraying herbicide, we could eliminate the hybrid plants and thereby increase the purity of F1 seeds.     

Hybrid plant regeneration from interfamilial somatic hybridization between grapevine (vitia vinifera L.) and Red Thorowax (Bupleurum scorzonerifolium willd)

The protoplasts of Red Thorowax ( Bupleurum scorzonerifolium) irradiated by ultraviolet light (UV) at an intensity of 260μW/cm2 for 0, 1,2 and 3 min respectively were fused with that of grapevine ( Vitia vinifera). The regenerated 19 clones, every one derived from a single fused cell, were identified as hybrids by phenotype, isozyme, chromosome and 5S rDNA spacer region analysis. The results reveal that all of them are somatic hybrids. 11 hybrid calli including asymmetric and symmetric products regenerated somatic embryos and young leaves after 5 months of culture, of which 4 hybrid cell lines derived from asymmetric fusion regenerated plants with roots after 8-10 months of culture. Inspection of chromosome showed that regeneration of whole plant was related to the decrease of chromosome number. Identification of 5S rDNA spacer region of the plants confirmed that they were interfamilial hybrid plants.     

玉米与其近缘野生种杂交后代的组织培养

繁茂大刍草（Zea luxurians）和二倍体多年生类玉米（Zea diploperennis）是栽培玉米的野生近缘种，其抗逆性强，染色体数目也与玉米相等（2n=20），是玉米重要的种质资源。本工作通过远缘杂交、回交等技术将野生种染色体引入到玉米骨干自交系中，然后限幼胚诱导胚性愈伤组织并再生出大批植株；研究了基因型和培养基激素组合对胚性愈伤组织诱导、继代和植株再生的影响，以及体细胞再生植株的利用价值。     

食用菌原生质体融合研究

以具有黑色分生孢子与抗N_aN_3遗传标记的鲍鱼菇原生质体,经碘乙酰胺灭活后与佛罗里达侧耳、Cr02原生质体融合,已取得种间融合子。同时,以佛罗里达侧耳与香菇Cr02采用碘乙酰胺双灭法,取得属间融合子,并经酯酶同工酶酶谱分析证实。     

Establishment of a genetic transformation system for maize inbred P9-10

It was found that the supplement of 10 -4 mol/L AgNO3 in N6 medium enhanced the induction of type Ⅰ embryogenic calli from immature embryos of maize inbred P9-10. After high-osmotic treatment, the induced calli was taken as transformation recipient to be bombarded with plasmid pMG6 carrying synthetic Bt gene by PDS-1000/He genegun. A total of 14 resistant calli were obtained after screening subsequently on the mediums with gradually increasing selective pressure. 10 plants were regenerated from the resistant calli on 3 different induction media, and 8 out of the 10 regenerated plants were confirmed to be integrated with Bt gene by PCR and Southern blotting analysis. Results of ELISA showed that the Bt-protein content in the leaves of the transgenic plants varied between 20-200 ng/g fresh weight.     

香菇菌丝原生质体制备及融合条件的研究

讨论不同菌龄、酶解时间、酶解温度、渗透压稳定剂对香菇原生质体产率的影响。结果表明 ,香菇菌丝制备原生质体时最适菌龄为 6天 ,酶解时间为 3h ,酶解温度为 34℃ ,渗透压稳定剂用 0 .6mol/L甘露醇为最佳。在此基础上 ,以 35 %的PEG为融合诱导剂进行香菇B0 1、L2 6种间原生质体融合 ,并用显微镜观察到融合子的形成     

新疆大无核白葡萄原生质体培养

从新疆大无核白葡萄基叶愈伤组织游离的原生质体,用改良MS培养基培养,得到了再生细胞的高频率分裂。经比较试验发现,先用液体浅层培养后转入琼脂糖珠包埋培养最适于新疆大无核白葡萄愈伤组织原生质体培养。     

玉米茎尖培养再生体系的建立

不同基因型的玉米茎尖分生组织在添加不同浓度6-BA(6-苄基嘌呤)的MS培养基上,经过4周愈伤组织诱导培养和4周芽发育培养,获得高频率的丛生芽和再生植株,芽尖倍增数可达3~8芽/茎尖.通过比较试验,确立了诱导丛生芽发生的适宜培养条件和程序,反映了不同基因型的茎尖形成愈伤组织和再生植株的能力不同,从而初步建立了利用玉米茎尖分生组织再生植株的培养体系.     

GRP1.8融合4CL1基因调控杨树木质素生物合成

将形成层定位启动子GRP1.8与毛白杨的4-香豆酸:辅酶A连接酶基因融合,叶盘法转化毛白杨741,southern杂交检测表明融合基因已经整合到转基因杨树的基因组中.通过实时定量PCR技术测定mRNA的表达量,GC-MS分析4CL底物香豆酸的含量和定量硫酸木质素含量,分析了4CL基因的过量表达对转基因杨树生理生长的影响.实验结果表明,整合了正义4CL1的转基因植株在茎中的酶活性比野生植株增加了30%,木质素含量增加了40%.