创伤修复

本文通过收集国内外有关文献，并结合本身的研究，对创伤修复的主要进展作一综述。认为：（1）创伤修复研究已进入分子水平和基因水平，基因工程生产的生长因子等药物已投放市场并产生巨大的经济效益。（2）已证实：生长因子参与调控创伤修复的全过程，炎症期主要有PDGF、TGF-α、βEGF等参与；增生期中有PDGF、IL－1、IGF－1、TGF－α，β和bFGF等参与；重塑期中有PDGF、IGF、bFGF等参与。（3）对生长因子的作用和调控机制作了探讨。（4）简述了干细胞在组织修复中的作用和意义，并介绍了在本项目研究中，发现用EGF治疗后，创面旁的表皮棘细胞层内出现干细胞聚集，这可能是一种细胞逆分化现象。创伤修复的研究已有很大进展，今后应深入探讨生长因子调控的网络机制，特别是难愈创面的发生机制和防治，并进一步加大生长因子的市场开发。     

内毒素的跨膜信号转导及其在全身炎症反应综合征中的作用

失控性炎症反应是目前临床上最为常见的病理现象，是创伤后并发症发生发展的重要机制。细菌脂多糖（LPS）是最常见的诱导失控性炎症反应的主要因素之一。单核／巨噬细胞表面LPS相关受体是机体识别并启动炎症反应的始动因素，是诱导炎症反应失控的关键环节之一，单核／巨噬细胞膜表面存在多种LPS相关受体，其中清道夫受体（SR）、CD14、Toll样受体4（TLR4）为高亲和力或敏感性LPS受体。SR与单核／巨噬细胞清除、灭活LPS有关；CD14和TLR4是介导LPS激活细胞的重要受体。TLR2、β2整合素、L-selectin等为低亲和力LPS受体，作为“二级受体”在促进LPS诱导的促炎症和抗炎症反应中可能发挥重要的“催化作用”。TLR4可能是LPS激活血管内皮细胞的受体途径。单核／巨噬细胞表面防御性受体（如SR）下调、兴奋性受体（如CD14、TLR4、TLR2等）上调，可能是感染过程中单核／巨噬细胞由早期的防御性（清除、灭活LPS）转化为后期的效应性（释放大量的炎症和抗炎症介质）的重要机制。深化研究LPS跨膜信号转导的分子机制，可望为有效控制失控性炎症反应提供新思路。     

犬冲击伤复合破片伤后血浆脂质过氧化的改变

目的观察狗冲击伤复合破片伤后脂质过氧化情况.方法将21只四川地区成年健康杂种狗分成3组,每组7只,分别行破片、冲击波及冲击波复合破片致伤,测定各组伤前及伤后各时相点血中性粒细胞自由基释放量与血浆过氧化脂质LPO的含量;同时观察各组动物肺损伤的情况.结果 3组伤后中性粒细胞自由基释放量与血过氧化脂质均有不同程度的升高,其中以复合伤组最为明显,这与复合伤组动物伤情最严重是一致的.结论脂质过氧化在破片伤、冲击伤及两者复合伤后的继发性损伤中可能起一定作用,并可反映伤情的严重程度.     

抗人Toll样受体4合成肽单克隆抗体的制备与鉴定

在对Toll样受体4（TLR4）B细胞优势表位预测的基础上，合成该B细胞表位多肽，并以此为抗原免疫BABL／C小鼠，经鼠－鼠杂交，ELISA筛选，有限稀释克隆化，得到一株分泌抗TLR4合成肽的杂交瘤细胞株B4，腹水效价为1：100000。其免疫球蛋白为IgG2,k型。ELISA鉴定表明该抗体能识别TLR4^ 性细胞，Western blot分析显示在分子量约90kD处呈现单一免疫色带。     

水下冲击伤后肺与血气的变化及其意义

目的 观察水下冲击伤后肺损伤程度及血气指标的动态变化与动物伤情的关系。方法 38只成年犬，用TNT炸药致不同程度的水下冲击伤，现场死亡动物和存活动物分别于死后即刻和伤后6h进行大体解剖观察，利用便携式手持血气分析仪测定伤前、伤后30min和6h的动脉血气。结果 水下冲击伤肺损伤主要表现为不同程度的肺出血、肺水肿；冲击波正向冲量与肺损伤程度和动物死亡密切相关；呼吸频率、血氧分压以及二氧化碳分压的变化可反映肺损伤程度。结论 严重的肺损伤导致的低氧血症可能是水下冲击伤动物早期死亡的主要原因，伤情的严重程度与水下冲击波的正向冲量密切相关。     

p65 DNA结合域的克隆、表达及其酵母双杂交自身激活作用检测

目的：获得NF－κB p65亚基DNA结合域cDNA及构建酵母双杂交系统中的靶基因，并检测靶基因的表达和自身激活活性。方法：利用引物二聚体搭桥技术，扩增p65亚基DNA结合域基因片段，并将基克隆入酵母双杂交载体pG-BKT7 DNA-BD。应用醋酸锂法转化酵母细胞AH109，在SD／Trp选择培养基上培养，观察转化株的生长情况。按尿素／SDS法抽提酵母蛋白，用SDS－PAGE电泳和Western-blot鉴定靶蛋白在酵母细胞中的表达。利用液相法和平板法检测阳性转化株β－半乳糖苷酶的活性。结果：获得p65 DNA结合域基因片段，并成功构建酵母双杂交系统中的靶基因。靶基因能在酵母细胞中表达，对酵母细胞无毒性作用，无自身激活活性。结论：NF－κB p65亚基DNA结合域可作为酵母双杂合系统中的靶基因，用于肽库筛选，捕捉与之相互作用的多肽。     

失血性休克大鼠肠上皮细胞线粒体DNA腺苷三磷酸酶6,8基因表达及线粒体功能的改变

目的　探讨失血性休克大鼠肠上皮细胞线粒体DNAATPase 6 ,8基因表达及线粒体功能的改变 ,为阐述休克肠道靶学说和线粒体能量代谢提供分子生物学基础。　方法　 2 4只Wistar大鼠随机分为休克前组和休克 1,2 ,3,4 ,5h组。采用RT -PCR方法观察线粒体ATPase 6 ,8mRNA量的改变。用透射电镜观察、生物体视学测量线粒体形态 ,用Clark氧电极测线粒体呼吸功能。　结果　失血性休克 1,2h ,ATPase 6 ,8基因表达增强 ,以后渐减弱 ,至休克 5h表达最低 ,ATPase 6 ,8基因表达分别降为正常的 6 9.3%和 78.4 % (P <0 .0 1和P <0 .0 5 )。失血性休克 2h和5h ,线粒体平均截面积、长径、面密度、体密度均显著增加 (P <0 .0 1) ,休克 5h时分别为休克前的2 .0 ,1.4 5 ,1.4 7,2 .2 2倍。休克 5h ,线粒体比表面和数密度分别下降 32 %和 2 4 % (P <0 .0 1和P <0 .0 5 ) ,嵴和基质破坏明显。失血性休克后肠上皮细胞线粒体呼吸控制率和氧化磷酸化效率比休克前显著降低 (P <0 .0 1)。　结论　失血性休克时大鼠肠上皮细胞线粒体DNAATPase 6 ,8基因表达下调 ,线粒体呼吸功能出现障碍 ,线粒体超微结构发生了改变     

美哉 武夷山

武夷山位于闽北的崇安县。1989年，经国务院批准，崇安县正式更名为武夷山市，境内有国家重点自然保护区、国家风景名胜区、国家旅游度假区、以及国家重点文物保护单位——城村古闵越王城遗址等，武夷山市还建有机场，现已开通北京、上海、广州等26条航线，可起降波音737等中型飞机。1999年12月，武夷山被联合国科教文组织批准列入“世界遗产名录”，成为至今我国第4处文化与自然“双遗产”地，2003年入选“中华十大名山”和“中国茶文化艺术之乡”。     

神经肽P物质对肉芽组织成纤维细胞增殖及表皮生长因子基因表达的作用

目的：探讨感觉神经肽P物质（SP）对离体培养的肉芽组织成纤维细胞的促增殖作用及其对表皮生长因子（EGF）基因表达的调控作用。方法：采用MTT法测定SP对肉芽组织成纤维细胞的促增殖作用；采用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）方法检测SP对成纤维细胞EGF基因表达的调控作用，观察时间及剂量－效应关系。结果：10^-9～10^-5mol/L的SP在体外对肉芽组织成纤维细胞均具有明显的促增殖作用（P＜0．01），且具有明显的剂量依赖性（γ=0.594,P＜0．01），EGF抗体只能部分抑制这一作用（与对照组比较，P＜0．01；与10^-7mol/L SP组比较，P＜0．05）。10^-7mol/L SP可诱导成纤维细胞EGF mRNA的表达，在作用后6h与对照组比较，差异有非常显著性意义（P＜0．01）；SP在10^-8～10^-6mol/L范围内可以显著促进成纤维细胞EGF mRNA表达，在10^-7mol/L达到峰值，当浓度＞10^-7mol/L时，其促EGF mRNA表达的效应强度随浓度升高而有所降低，至10^-5mol/L时与对照组比较，差异无显著性意义。结论：SP对肉芽组织成纤维细胞具有明显的促增殖作用，这种作用与其诱导成纤维细胞EGF表达有关。