HPLC-双波长切换法同时测定双参通冠胶囊中脱氢紫堇碱、丹酚酸B的含量

目的:建立同时测定双参通冠胶囊中脱氢紫堇碱和丹酚酸B含量的方法。方法:采用HPLC-双波长切换法。色谱柱为Waters symmetry C18,以乙腈-0.05%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为286 nm(丹酚酸B)、336 nm(脱氢紫堇碱),流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,进样量为10μL。结果:在建立的检测条件下,脱氢紫堇碱和丹酚酸B均能达到基线分离,二者进样量线性范围分别为0.157～1.259μg、0.391～3.131μg(r均为0.999 9);精密度、重复性和稳定性试验(24 h内)的RSD均小于2.00%(n=6～10);平均加样回收率分别为101.61%、102.85%(RSD分别为3.59%、2.85%,n=6)。结论:建立的HPLC-双波长切换法可同时测定双参通冠胶囊中脱氢紫堇碱和丹酚酸B含量,且方法操作简便、快速,可用于双参通冠胶囊的质量控制。     

健脾益肾丸指标成分的含量测定及其对CRF模型大鼠钙磷代谢和炎症因子的影响

目的:建立健脾益肾丸(JYP)中黄芪甲苷、大黄素、大黄酚的含量测定方法,并探讨JYP对慢性肾衰竭(CRF)模型大鼠钙磷代谢和炎症因子等相关指标的影响。方法:采用高效液相色谱法进行含量测定。黄芪甲苷以及大黄素、大黄酚的色谱柱分别为Agilent Zorbax SB-C18、Agilent TC C18,流动相分别为乙腈-水(36∶64,V/V)、甲醇-0.1%磷酸溶液(75∶25,V/V),检测器分别为蒸发光散射检测器和二极管阵列检测器(后者检测波长为254 nm),柱温分别为30、25℃,流速均为1.0 m L/min,进样量分别为20、10μL。将SD大鼠随机分为正常组、模型组、尿毒清组(1.80 g/kg)和JYP低、中、高剂量组(1.71、3.43、6.85 g/kg),每组10只。除正常组外,其余组大鼠均采用5/6肾切除方法复制CRF模型。造模4个月后,正常组和模型组大鼠均灌胃相应体积水,各给药组大鼠灌胃相应药物,每日1次,连续12周。采用酶联免疫吸附测定法检测大鼠血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、甲状旁腺激素(PTH)和炎症因子[白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]含量,采用甲基百里香酚蓝比色法和磷钼酸法检测其血钙、血磷含量,采用Pearson检验考察炎症因子与钙磷代谢相关指标(血钙、血磷、PTH)的相关性。结果:黄芪甲苷、大黄素、大黄酚检测质量浓度的线性范围分别为54.537～381.759、2.960～20.720、6.318～44.223μg/m L(r>0.999),定量限分别为0.010、0.288、0.216μg/mL,检测限分别为0.003、0.096、0.072μg/mL,精密度、重复性、稳定性试验的RSD均小于3.0%,加样回收率为97.18%～102.33%(RSD<3%,n=9)。造模后(给药前),模型组和各给药组大鼠血清Scr、BUN含量均较正常组显著升高(P<0.01);给药后,各给药组大鼠上述指标均较模型组和同组给药前显著降低(P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠血钙含量显著降低,IL-6、TNF-α含量均显著升高(P<0.01);与模型组比较,JYP中、高剂量组大鼠血钙含量均显著升高,尿毒清组PTH含量,JYP中、高剂量组PTH、IL-6含量以及各给药组TNF-α含量均显著降低(P<0.05或P<0.01);但JYP对大鼠血磷含量无显著影响,且其血清炎症因子与钙磷代谢相关指标均无显著相关性(P>0.05)。结论:本含量测定方法简便、专属性强、灵敏度高,可用于JYP中黄芪甲苷、大黄素、大黄酚的含量测定。JYP可改善CRF模型大鼠的肾功能,缓解其钙代谢紊乱,并抑制其炎症因子的表达。     

阿托伐他汀钙片含量测定方法的改进

目的建立高效液相色谱(HPLC)测定阿托伐他汀钙片中阿托伐他汀钙的含量的方法。方法采用Alltima C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液(60∶40)为流动相,流速1.0mL·min~(-1),检测波长246 nm,柱温25℃。结果阿托伐他汀钙在44.6～133.8μg·m L~(-1)与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999);辅料以及阿托伐他汀钙强制降解产物均不干扰测定;精密度、稳定性、重复性和回收试验的RSD均小于2%,平均回收率(n=3)为99.5%～99.7%。4批阿托伐他汀钙片的含量测定结果分别为19.37、19.46、19.54和19.59 mg/片。结论该方法准确、简单、快速,能够作为阿托伐他汀钙片的含量测定方法。     

HPLC-波长切换法同时测定牛黄清胃丸中7个成分的含量

目的:建立同时测定牛黄清胃丸中绿原酸、栀子苷、连翘酯苷A、柚皮苷、黄芩苷、甘草酸铵、大黄酚7个成分含量的方法。方法:采用高效液相色谱(HPLC)-波长切换法。色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C_(18),流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B),梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长分别为348 nm(绿原酸)、238 nm(栀子苷)、330 nm(连翘酯苷A)、280 nm(柚皮苷和黄芩苷)、237nm(甘草酸铵)、254 nm(大黄酚);柱温为30℃;进样量为10μL。结果:绿原酸、栀子苷、连翘酯苷A、柚皮苷、黄芩苷、甘草酸铵和大黄酚的进样量线性范围分别为0.011 67～0.233 4μg(r=0.999 4)、0.042 91～0.858 1μg(r=0.999 4)、0.125 0～2.500μg(r=0.999 9)、0.118 0～2.360μg(r=0.999 9)、0.119 6～2.392μg(r=0.999 7)、0.030 57～0.611 4μg(r=0.999 6)和0.006 201～0.124 0μg(r=0.999 4),定量限分别为1.167、0.858、1.250、1.180、1.196、0.611、0.620μg/mL;精密度试验的RSD分别为0.98%、1.04%、0.59%、1.50%、0.83%、1.24%和1.32%(n=6);稳定性试验的RSD分别为1.21%、0.97%、1.42%、0.71%、0.98%、1.87%和1.63%(n=6,12 h);平均回收率分别为98.32%、98.11%、98.81%、98.50%、98.30%、98.16%和97.83%,RSD分别为1.37%、1.41%、0.64%、1.01%、1.18%、1.16%和1.16%(n=6)。结论:建立的含量测定方法操作简单、重复性好,可用于牛黄清胃丸的质量控制。     

重型β-地中海贫血患儿脑组织T2~*与铁过载关系及其发病机制研究

目的研究重型β-地中海贫血(β-TM)患儿脑组织T2~*与铁过载关系及其发病机制。方法选取2016年2月——2018年2月于我院接受长期高量输血的β-TM患儿100例为研究对象,作为研究组。另取同期于我院接受健康体检的儿童25例作为对照组。分别采用核磁共振检测两组人员脑组织不同部位(包括大脑灰质、白质、黑质、尾状核、壳核、苍白球、红核、齿状核以及小脑)的T2*值。此外,将研究组患儿按照血清铁蛋白水平的不同分为轻度组(血清铁蛋白水平在1 000～2 500μg/ml之间) 54例与重度组(血清铁蛋白水平> 2 500μg/ml) 46例。分别采用化学发光酶免疫法以及酶联免疫吸附法检测患儿脑脊液铁蛋白、转铁蛋白水平以及亚铁转运膜蛋白1、铜蓝蛋白、血红素氧化酶1、铁调素水平。比较轻度组与重度组患儿的身高、体重、血红蛋白水平。并作相关性分析。结果研究组大脑灰质、白质、黑质、尾状核、壳核、苍白球、红核、齿状核以及小脑部位的T2~*水平相比对照组较低(均P <0. 05)。轻度组脑组织T2~*值、转铁蛋白、亚铁转运膜蛋白1、血红素氧化酶1水平相比重度组较高,而铁蛋白、铜蓝蛋白、铁调素水平相比重度组较低(均P <0. 05)。轻度组身高、体重、血红蛋白水平相比重度组较高(均P <0. 05)。经Pearson相关性分析可得:β-TM患儿脑组织T2~*与铁蛋白、铜蓝蛋白、铁调素水平呈负相关关系,与转铁蛋白、亚铁转运膜蛋白1、血红素氧化酶1、身高、体重、血红蛋白水平呈正相关关系(均P <0. 05)。结论核磁共振成像T2~*有利于评估β-TM患儿脑组织铁过载情况,且β-TM患儿铁过载与生长发育密切相关。同时,脑脊液铁代谢蛋白水平紊乱可能是β-TM的发病机制,其主要途径可能与引发铁过载有关,值得临床重点关注。     

血清铁蛋白表达与非酒精性脂肪性肝病肝脏脂肪含量的关系及临床意义

目的探讨非酒精性脂肪性肝病患者的肝脏脂肪含量与血清铁蛋白表达水平的关系。方法选取2017年3月-2018年3月于我院治疗的35例非酒精性脂肪性肝病患者为观察组研究对象,另选取35例健康体检者作为对照组。测定两组对象的血清铁蛋白水平并测定肝脏的脂肪含量。结果观察组的血清铁蛋白水平为(18.05±5.04)μmol/L,明显高于对照组的(14.53±5.01)μmol/L(P0.05)。Logistic回归分析显示血清铁蛋白为非酒精性脂肪肝的影响因素。Q1组的血清铁蛋白水平为(14.08±4.88)μmol/L,与Q2组的(14.16±4.71)μmol/L比较无明显差异(P0.05),但与Q3组的(18.96±5.37)μmol/L、Q4组(20.22±5.41)μmol/L比较差异明显(P0.05)。结论血清铁蛋白与非酒精性脂肪性肝病患者的肝脏脂肪含量具有相关性,且血清铁蛋白表达水平是非酒精性脂肪肝患者的危险因素,非酒精性脂肪性肝病患者的肝脏脂肪含量与血清铁蛋白水平呈正相关。