ANTITUMOR EFFECTS INDUCED BY B7-1 GENE MODIFIED EL-4 LYMPHOMA COOPERATED WITH IL-2 IN VIVO AND IN VITRO

ＡＮＴＩＴＵＭＯＲＥＦＦＥＣＴＳＩＮＤＵＣＥＤＢＹＢ７１ＧＥＮＥＭＯＤＩＦＩＥＤＥＬ４ＬＹＭＰＨＯＭＡＣＯＯＰＥＲＡＴＥＤＷＩＴＨＩＬ２ＩＮＶＩＶＯＡＮＤＩＮＶＩＴＲＯＷｕＡｉｍｉｎ武爱民ＺｈａｎｇＹｕｅｊｉａｎ张跃建ＱｉｎＨｕｉｌｉａｎ秦慧...     

HER-2/neu蛋白——人类肿瘤治疗的特异靶抗原

近年来,围绕着HER-2/neu原癌基因产物免疫治疗实验性动物肿瘤及人类恶性肿瘤取得了一系列令人振奋的结果,因而以HER-2/neu产物作为肿瘤免疫治疗的靶抗原正受到人们的极大关注,本文将就这方面的研究进展及结合我们的研究结果作一综述.     

HER2/neu原癌基因及其片段真核表达载体的构建与鉴定

HER2/neu原癌基因编码的P185蛋白在很多肿瘤细胞过度表达,研究发现在肿瘤患者体内存在针对P185蛋白的细胞和体液免疫应答,说明P185蛋白可作为肿瘤免疫治疗的靶抗原.制备HER2/neu蛋白进行疫苗接种.有可能诱导出针对P185蛋白阳性肿瘤的免疫应答.完整的自身蛋白常诱导机体产生免疫耐受,蛋白片段免疫常暴露了潜在的亚优势抗原表位从而打破自身耐受,诱导出有效的免疫应答.为研究P185蛋白的免疫原性,通过基因克隆的方法.我们分别构建了HER2/neu原癌基因及其片段的真核表达载体——     

胰腺癌、结肠癌患者对突变ras癌基因蛋白特异的T细胞及抗体反应

ras癌基因往往因发生特异性点突变而激活。ras癌基因突变最常是在其编码的p21蛋白第12或61位发生单个氨基酸置换，从而增强p21蛋白的GTP酶活性并激活其转化活性。在人类的多种肿瘤中均可发现突变ras基因的存在。目前已报道大约90％胰腺癌，60％甲状腺癌,50％结肠癌和40％髓样白血病患者中可检出突变ras癌基因存在,     

腺病毒E1A下调HER2/neu原癌基因表达及其抗瘤效应研究

目的　研究腺病毒E1A基因对HER2 /neu高表达肿瘤细胞生长的抑制作用及增强其化疗敏感性的作用。方法　以腺病毒Ⅴ型为载体 ,经体、内外对HER2 /neu高表达及低表达的肿瘤细胞株转染腺病毒E1A基因后 ,观察E1A基因对肿瘤细胞生长抑制作用 ;用MTT法检测E1A增强肿瘤细胞化疗敏感性作用。结果　E1A能显著抑制HER2 /neu高表达的肿瘤细胞在体内外的生长 ,延长荷瘤裸鼠的生存期。免疫印迹及免疫组织化学分析显示 ,转染E1A的HER2 /neu高表达肿瘤细胞 ,其HER2 /neu基因产物p185蛋白表达明显降低 ;经AdE1A 处理的HER2 /neu高表达的乳腺癌细胞株能明显增强对TaxotereTM的化疗敏感性。结论　E1A通过下调HER2 /neu原癌基因的表达 ,抑制HER2 /neu高表达的肿瘤细胞生长 ,增强肿瘤细胞对化疗药的敏感性。     

肿瘤免疫治疗的分子基础

近年来,肿瘤免疫冶疗的研究之特点为多学科交叉渗透及多部门共同参与.因而,分子免疫学、分子生物学、分子遗传学及相关生物学高技术的结合,为肿瘤免疫治疗奠定了重要的分子基础.1 肿瘤特异性表位的研究进展肿瘤免疫治疗是肿瘤生物治疗的重要基础,那么寻找肿瘤特异性抗原必然是肿瘤免疫治疗的关键.从50年代Gross等发现TSTA,到90年代T.Boon证实人类第一个肿瘤抗原表位,为肿瘤特异性免疫治疗打下了坚实的基础.但是迄今为止被发现的有限肿瘤特异性抗原,使得众多肿瘤学家仍然孜孜不倦地挖掘新的肿瘤持异性抗原(表位).目前采用的主要技术路线有:     

联合应用IL-2和IL-7对T细胞体外增殖及功能的增强效应

本文研究了联合应用IL-2和IL-7在体外T细胞培养系统中对小鼠T细胞生长及功能的调节作用。结果表明:单独使用IL-2或IL-7均能增强T细胞对ConA或特异性抗原刺激诱导的增殖反应,但联合使用IL-2和IL-7具有更加显著的协同刺激作用。C57BL/6小鼠抗FBL-3肿瘤特异性T细胞系在IL-2与IL-7联合培养系统中,不但T细胞数量明显增加,且能在保持特异性功能的同时,延长T细胞体外抗原刺激周期。此外,这一细胞因子的组合方案,可大大降低IL-2的应用剂量,避免大剂量IL-2临床应用时所产生的副作用。     

补体C5b-9抗血清对抗胸腺细胞血清性肾炎大鼠肾组织一氧化氮合成及其病变的影响

目的: 探讨抗鼠补体C5b-9复合物抗血清对系膜增生性肾炎大鼠肾组织合成一氧化氮 (NO)及其病变的作用。方法: 复制大鼠系膜增生性肾小球肾炎即抗胸腺细胞血清性肾炎 (ATSN)模型 ,用抗大鼠C5b-9复合物抗血清处理 ,观察其对ATSN大鼠NO相关指标及其病变的影响。结果: 抗鼠C5b-9复合物抗血清既能减少ATSN大鼠肾组织诱生性NO合酶 (iNOS)mRNA的表达和大鼠尿液中硝酸盐 /亚硝酸盐 (NO₃^- /NO₂^- )排泄量 ,还能减低大鼠肾组织病变的程度。NOS抑制剂L -NAME也可降低尿NO₃^- /NO₃^- 排泄量 ,同时减轻肾组织病变程度。结论: 抗鼠C5b-9复合物抗血清能够抑制肾细胞NO的合成及其肾小球系膜细胞的增生。     

肿瘤抗原p185蛋白的纯化及其鉴定

目的：从转染ＨＥＲ２／ｎｅｕ 基因的３Ｔ３／ｎｅｕ细胞中纯化ｐ１８５蛋白,研究其免疫原性和作为肿瘤疫苗的可能性。方法：采用溴化氰活化的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ为基质,通过交联５２０Ｃ９单克隆抗体（杂交瘤腹水中沉淀的γ－球蛋白）,用亲和层析的技术纯化ｐ１８５蛋白。经梯度盐溶液解离与抗体结合的ｐ１８５蛋白,收集到蛋白洗脱峰,用ＥＬＩＳＡ检测ｐ１８５的免疫反应性,并经ＳＤＳＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏ