GCN5调控sublytic C5b⁃9诱导大鼠肾小球系膜细胞表达Cyclin D1及致SOX9的乙酰化修饰

目的：探讨GCN5调控sublytic C5b?9刺激大鼠肾小球系膜细胞（glomerular mesangial cell,GMC）诱导Cyclin D1基因表达以及GCN5乙酰化修饰SOX9转录因子的作用。方法：先用Western blot检测Thy?1肾炎（Thy?1 nephritis,Thy?1N）大鼠的肾组织和sublytic C5b?9 刺激的GMC中GCN5、SOX9和Cyclin D1的表达。然后分别将pIRES2?GCN5过表达和shGCN5小干扰质粒或将这些质粒与Cyclin D1启动子质粒行不同组合转染GMC,用荧光素酶报告基因实验和real?time PCR、Western blot检测过表达或沉默GCN5后对Cyclin D1表达的影响。同时用免疫共沉淀（Co?IP）和Western blot检测sublytic C5b?9刺激或分别转染GCN5过表达和酶活性突变质粒（ΔGCN5）的GMC中SOX9的乙酰化修饰。结果：Thy?1N大鼠肾组织和sublytic C5b?9刺激的GMC中GCN5、SOX9、Cyclin D1蛋白水平均明显上调,而过表达GCN5基因能上调Cyclin D1的启动子活性、mRNA和蛋白表达;敲低GCN5表达则得到了相反的结果。此外,sublytic C5b?9刺激和过表达GCN5基因促进了SOX9的乙酰化修饰,而沉默GCN5后则降低了SOX9的乙酰化水平。结论：GCN5可上调GMC中Cyclin D1的表达,并促进SOX9的乙酰化修饰。     

幽门螺杆菌感染与慢性荨麻疹相关性研究

目的 探究幽门螺杆菌感染(Helicobacter pylori,Hp)与慢性荨麻疹(chronic urticaria,CU)相关性,为CU患者提供更有效的诊疗策略.方法 选取2015年6月至2017年12月在柳州市人民医院皮肤科门诊确诊慢性荨麻疹患者290例作为实验组,另选取本院健康体检者310名作为对照组.应用14C呼气试验检测实验组和对照组Hp感染情况,将慢性荨麻疹Hp阳性患者113例分为A(n=55)、B(n=58)两组,A组行常规治疗荨麻疹方案,B组在A组基础上联合抗Hp标准四联疗法治疗,比较实验组和对照组Hp检测结果,比较A组和B组临床疗效.结果 实验组阳性率为39.0％,明显高于对照组的29.7％,差异有统计学意义(P<0.05);B组治疗总有效率为67.2％,高于A组的47.3％,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 Hp感染与慢性荨麻疹有一定相关性,针对Hp的检测和治疗可为慢性荨麻疹患者的临床诊疗提供重要参考.     

白细胞介素17通过上调肌细胞增强因子2C促进PC9细胞程序性死亡配体1表达

目的 研究白细胞介素17(IL-17)促进PC9细胞表达程序性死亡配体1(PD-L1)的分子调控机制。方法 用IL-17 50μg·L^-1刺激PC9细胞0(细胞对照),1,2,3,6和12 h,用逆转录PCR(RT-PCR)和Western印迹法分别检测PC9细胞肌细胞增强因子2C(MEF2C)和PD-L1 mRNA及蛋白表达。构建pIRES2-MEF2C及其对照质粒pIRES2-EGFP和MEF2C短发夹RNA(shMEF2C)及其对照质粒shCTR,分别转染PC9细胞48 h(shRNA质粒转染后加IL-17刺激3 h),即分pIRES2-EGFP和pIRES2-MEF2C组或shCTR,shCTR+IL-17和shMEF2C-4+IL-17组,同上检测MEF2C和PD-L1 mRNA及蛋白表达。另构建PD-L1启动子全长(pGL3-PD-L1-FL)和不同截短的pGL3-PD-L1-1～pGL3-PD-L1-4质粒。先将pGL3-PD-L1-FL与pIRES2-MEF2C共转染PC9细胞48 h或与shMEF2C-4共转染48 h加IL-17刺激3 h,用双...     

NF⁃κB p65调控IRF⁃8基因启动子活性及其启动子结合元件的初步鉴定

目的：探讨大鼠核因子?κB（nuclear factor?κB,NF?κB）p65亚基在细胞内过表达和其活性变化对干扰素调节因子?8（interferon regulatory factor?8,IRF?8）基因启动的影响,并初步筛查IRF?8启动子上可能的p65结合元件。方法：采用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）技术扩增大鼠p65基因蛋白编码区（complete sequence coding,CDS）序列,将其插入到空载pIRES2?EGFP质粒中,构建大鼠野生型（wild type,WT）p65过表达质粒（pIRES2?p65 WT）。在此基础上,将p65第535位丝氨酸（serine,S）突变为天冬氨酸（aspartic,D）或丙氨酸（alanine,A）,分别构建p65持续活化突变型质粒（pIRES2?p65 S535D）和p65显性负性突变型质粒（pIRES2?p65 S535A）。之后应用生物信息学软件预测IRF?8基因启动子区p65的结合元件,并据此构建IRF?8启动子全长（full?length,FL）和3个截短的荧光素酶报告质粒,即pGL3?IRF?8?FL（-1 892 ~ +174 nt）、pGL3?IRF?8?1（-1 360 ~ +174 nt）、pGL3?IRF?8?2（-752 ~ +174 nt）和pGL3?IRF?8?3（-68 ~ +174 nt）。将上述质粒行不同组合共转染人胚肾293T（human embryonic kidney 293T,HEK?293T）细胞,Western blot和荧光素酶实验分别检查p65的表达和IRF?8的启动子活性,并分析IRF?8启动子区可能的p65结合元件。结果：菌液PCR及测序证实上述质粒构建成功。分别将pIRES2?p65 WT、pIRES2?p65 S535D、pIRES2?p65 S535A和pGL3?IRF?8?FL共转染HEK?293T,发现过表达pIRES2?p65 WT或pIRES2?p65 S535D均可明显增加IRF?8启动子活性,且以pIRES2?p65 S535D更为显著;而过表达pIRES2?p65 S535A后,IRF?8启动子活性无明显变化。将pGL3?IRF?8?FL、pGL3?IRF?8?1~3和pIRES2?p65 S535D共转染HEK?293T后发现,pGL3?IRF?8?3的启动子活性显著低于pGL3?IRF?8?FL、pGL3?IRF?8?1和pGL3?IRF?8?2,提示大鼠IRF?8启动子-752~68 nt区域可能存在p65结合元件。结论：在HEK?293T细胞内过表达野生型或持续活化突变型p65可显著促进IRF?8基因的启动,且p65与IRF?8启动子的结合元件可能位于-752~-68 nt部位。     

被动型Heymann肾炎脂质过氧化损伤及谷胱甘肽的防治作用

作为人类膜性肾炎的动物模型之一———被动型Ｈｅｙｍａｎ肾炎（ｐａｓｉｖｅＨｅｙｍａｎｎｎｅｐｈｒｉｔｉｓ，ＰＨＮ），其病理过程中动态测定脂质过氧化物少见报告。本实验在复制大鼠ＰＨＮ模型后检测了大鼠血清及肾皮质匀浆中的超氧化物歧化酶（ｓｕｐｅｒｏｘｉｄ...     

斑点ELISA法检测SLE患者血中抗肾抗体及其意义

本实验采用斑点ＥＬＩＳＡ法对５０例活动期ＳＬＥ患者血液中的肾小球基底膜抗体及肾小管抗体进行了检测，结果显示：ＧＢＭ－Ａｂ检出阳性率达６８％Ｔｕｂ－Ａｂ阳性率达率７８％。     

被动型Heymann肾炎(PHN)研究进展

被动型Heymann肾炎(简称PHN)是给大鼠体内注射抗Heymann抗原的抗体所引起的肾小球炎性损害。由于PHN发病迅速,病情稳定,重复性较好,且临床及病理学表现亦与人类膜性肾炎(MGN)十分相似。故近年来,该模型已为众多学者所采用,借以探讨MGN的诸多问题。鉴于目前有关PHN的病因,发病机制及防治等研究均已取得了一定的进展,国外文献报道颇多。国内尚处起步阶段。故本文拟就这些方面的结果作一综述。一、PHN动物模型简介 (一)Heymann抗原概述: 主动型Heymann肾炎(简称AHN)是Heymann等(1959)首次应用同种或自体肾皮质匀浆加CFA引发的大鼠自身免疫性肾小球疾病。继此之后,许多学者对其相应的抗     

散发性黑斑息肉综合征合并肠梗阻

患者女,21岁,湖南常德津市人.患者自述约在7岁时出现皮肤色斑,呈黑褐色,直径0.5 mm～3 mm,最先出现于唇黏膜,而后逐渐在手指及脚趾上出现,未予重视.患者在14岁时出现间歇性便秘症状,约每周排便1次,且偶有间歇性腹痛,位于脐周,呈阵发性隐痛,能忍受,可自行缓解,自觉腹痛与排便无关.16岁时,行结肠镜检查示结肠多发性息肉,为求进一步诊治,遂入湘雅二医院住院诊治.入院后行全消化道胶囊内镜检查发现其胃内可见数十个大小不等的息肉,小的直径约为0.3 cm,大的直径3 cm～4 cm,多呈圆形,部分有分叶,表面充血肿胀;十二指肠内可见多发性小息肉,直径约0.3 cm～0.6 cm空肠上段可见一直径约2.5 cm的圆形亚蒂息肉,表面充血;回肠末端可见直径在0.3 cm～0.5 cm的多发性、圆形、亚蒂的息肉样病变;而结肠内因其内容物较多,黏膜显示欠清.     

重构医学生实践能力培养体系的探索与实践

传统的医学生实践教学体系面临着许多新的挑战,其教学理念、内容和方法已经不能适应需要,改革和重构势在必行。南京医科大学遵循注重医学生实践能力和创新精神培养的教育理念,经过10年改革与建设,基本形成了集“四模块”实践课程、特色配套教材、先进教学和考核方法为一体的医学生实践能力培养体系,取得了良好效果。