山莨菪碱对兔心室肌细胞离子通道电流的影响

目的研究山莨菪碱对兔正常离体心室彤睫田胞离子通道电流的影响,探讨其抗心律失常的细胞学离子机制。方法以酶解的方法分离兔心室肌外膜单个心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术,研究不同浓度山莨菪碱对兔正常心室肌细胞跨膜钠离子通道电流（INa）、L-钙通道电流（ICa-L）及瞬间外向钾通道电流（Ito）的影响。结果山莨菪碱浓度为10nmol／L时,对INa无明显影响（P〉0．05）。山莨菪碱浓度为100nmol／L时,INa电流密度减少到（-33．25±4．46）pA／pF,1000nmol／L时INa电流密度减少到（-29．32±3．55）pA／pF,抑制率分别为22．3％和31．5％,与基础值比较,差异均有统计学意义（P〈0．01）。山莨菪碱浓度为10nmol／L时,对ICa-L无明显影响（P〉0．05）。山莨菪碱浓度为100nmol／L时,ICa-L．电流密度减少到（-2．15±1．02）pA／pF,1000nmol／L时ICa-L电流密度减少到（-1．82±0．86）pA／pF,抑制率分别为31．3％和41．8％,与基础值比较,差异均有统计学意义（P〈0．01）。山莨菪碱浓度为10nmol／L时,Ito电流密度由（17．41±3．13）pA／pF减少到（16．13±2．93）pA／pF,100nmol／L时减少到（15．11±2．88）pA／pF,1000nmol／L时减少到（14．96±2．82）pA／pF,抑制率分别为7．3％、13．2％和14．1％,均无统计学差异（P〉0．05）。结论山莨若碱对离体正常单个心室肌细胞INa和ICa-L具有剂量依赖性抑制作用。     

MRI评价兔动脉粥样硬化模型

目的 探讨1.5T MR仪检测兔颈动脉粥样硬化模型中粥样硬化斑块的形成。 方法 用动脉球囊扩张法损伤兔一侧颈总动脉血管内膜后高脂饲养15周,行MRI及损伤血管的病理学检查。 结果 15周后,MRI表现为损伤血管壁高信号区增厚并管腔狭窄,对应病理学检查显示:血管腔狭窄;损伤侧颈总动脉明显粥样斑块形成,符合动脉粥样硬化特点。MR成像与病理学所测血管壁厚度之间有相关关系(r＝0.953)。 结论 临床应用型1.5T MRI可成功检测兔颈动脉粥样硬化的形成。     

应用动物模型研究氨基酮戊酸光动力治疗皮肤病的研究进展

氨基酮戊酸光动力疗法是一种无创、有效且不良反应和毒副作用少的治疗技术,已广泛地应用于皮肤科领域多种疾病的治疗.动物模型是研究氨基酮戊酸光动力疗法治疗疗效及机制的重要方法.近年来,通过应用皮肤肿瘤、光老化、痤疮、瘢痕以及银屑病的动物模型,优化了氨基酮戊酸光动力疗法治疗参数,进一步阐明了氨基酮戊酸光动力疗法的治疗机制,为氨基酮戊酸光动力疗法增敏剂的开发和应用提供了理论基础.     

经不同途径应用万古霉素治疗兔细菌性脑室炎的效果

目的 探讨经不同途径应用万古霉素治疗兔细菌性脑室炎的效果。方法 将新鲜配制的标准表皮葡萄球菌混悬液0.5 ml以0.1 ml/min的速度缓慢注入侧脑室将制作兔细菌性脑室炎模型。将50只细菌性脑室炎成年新西兰大白兔随机分为单纯静脉组（Ⅰ组,静脉注射万古霉素）、单纯动脉组（Ⅱ组,颈内动脉注射万古霉素）、联合静脉组（Ⅲ组,先静脉注射甘露醇,继而注射万古霉素）、联合动脉组（Ⅳ组,先颈内动脉注射甘露醇,继而注射万古霉素）,对照组（Ⅴ组,静脉注射生理盐水）,每组10只。所有动物均12 h给药一次,直至动物死亡,最多给药6次。结果 Ⅰ组、Ⅱ组给药后96 h内无动物死亡,Ⅲ组给药后72~96 h死亡5只,Ⅳ组给药后72~96 h死亡1只,Ⅴ组给药后24 h内全部死亡。首次给药后1 h,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组脑脊液万古霉素浓度分别为（40.02±0.07）μg/L、（89.11±0.19）μg/L、（69.02±0.17）μg/L、（118.13±0.31）μg/L;两两比较,均有统计学差异（P<0.05）。给药72 、96 h,Ⅳ组肛温、外周血白细胞数、脑脊液白细胞数均明显低于Ⅲ组（P<0.05）。结论 经颈内动脉联合应用甘露醇和万古霉素治疗细菌性脑室炎的效果优于单纯静脉或动脉注射万古霉素以及经静脉联合应用甘露醇和万古霉素的效果。     

药物诱导联合流出道缩窄构建兔腹主动脉瘤模型的实验研究

目的：探讨药物诱导联合腹主动脉流出道缩窄构建兔腹主动脉瘤（AAA）模型的可行性与有效性。 方法：将24只雌性新西兰大白兔随机均分为4组,其中两组分别采用含CaCl2（0.75 mol/L）或胰蛋白酶（0.04 g/mL）溶液的棉条包裹浸润血管30 min诱导AAA,另两组分别在CaCl2或胰蛋白酶浸润的基础上行腹主动脉流出道缩窄术（缩窄50%~60%）造模。术后使用兽用彩超诊断仪监测受累血管管径变化,术后2周,收集损伤段腹主动脉制作组织切片行HE与EVG染色。用计算机模拟评估流出道缩窄对AAA形成的影响。 结果：术后2周,超声检查显示,两个单纯药物浸润组受累血管扩张不明显,均未达到AAA形成标准,两个药物联合缩窄组受累血管明显扩张,其中CaCl2+缩窄组成瘤率66.67%（4/6）,血管平均扩张1.61倍;胰蛋白酶+缩窄组成瘤率83.33%（5/6）,血管平均扩张1.89倍。与正常腹主动脉比较,CaCl2浸润的血管内膜厚度明显增加（均P<0.05）,而胰蛋白酶浸润后的血管内膜厚度变化不明显（均P>0.05）;各组中膜厚度均明显增加,弹力纤维面积百分比均明显降低,其中CaCl2+缩窄组的变化最为明显（均P<0.05）。计算机数值模拟结果显示,流出道缩窄后血管壁应力增大,成瘤率增加。 结论：药物损伤联合腹主动脉流出道缩窄能成功构建兔AAA模型,缩短造模时间,且胰蛋白酶浸润损伤联合腹主动脉流出道缩窄造模方法优于CaCl2联合腹主动脉流出道缩窄造模方法。     

声脉冲辐射力弹性成像评估肝纤维化程度的动物实验研究

背景　肝纤维化是肝硬化、肝细胞癌的前期病变,早期治疗可以延缓肝纤维化的进展速度。目前肝纤维化程度的诊断方法主要有肝穿刺活检术、血清学标志物等,但各诊断方法又各有其缺陷。目的　通过建立兔肝纤维化模型,探讨应用声脉冲辐射力弹性成像（ARFI）技术评估兔肝纤维化程度的诊断价值。方法　2015年4-10月选用健康新西兰大白兔44只,随机选取36只为实验组,8只为对照组。实验组给予皮下注射四氯化碳（CCl4）16周建立兔肝纤维化模型,起始剂量为0.3 ml/kg,剂量递增,第4周剂量为0.4 ml/kg,第5周后剂量为0.5 ml/kg;对照组给予相同剂量0.9%氯化钠溶液。分别于造模第4、6、8、10、12、14、16周随机选取实验组3~6只,对照组1~2只,应用ARFI检查活体、离体兔肝横向剪切波速度（SWV、SWV1）。每次检查完成后采用空气栓塞法处死兔并取兔肝组织先行苏木素-伊红（HE）染色,而后行Masson 染色,确定兔肝纤维化病理分期,采用受试者工作特征曲线（ROC曲线）及ROC曲线下面积（AUC）评价ARFI评估肝纤维化分级的诊断价值。结果　至造模第16周时,成功建立各分期的兔肝纤维化模型。病理检查结果示：对照组兔肝脏病理学检查均正常,无纤维化;实验组36只兔最终死亡4只,造模成功32只（肝纤维化分期为F1期6只、F2期10只、F3期8只、F4期8只）,造模成功率为88.9%（32/36）。实验组F1~F4期的SWV、SWV1大于对照组,实验组F2~F4期的SWV、SWV1大于实验组F1期,实验组F3~F4期的SWV、SWV1大于实验组F2期,实验组F4期SWV1大于实验组F3期（P<0.05）;对照组及实验组F1~F4期SWV1均大于SWV（P<0.05）。通过ROC曲线分析,SWV诊断肝纤维化≥F2期、≥F3期、F4期的AUC分别为0.901、0.939、0.945（P均<0.001）,截断值分别为2.21、2.29、2.36 m/s,灵敏度分别为80.8%、87.5%、87.5%,特异度分别为83.3%、87.5%、79.3%;SWV1诊断肝纤维化≥F2期、≥F3期、F4期的AUC分别为0.901、0.901、0.958（P均<0.001）,截断值分别为2.58、2.92、3.26 m/s,灵敏度分别为80.8%、81.3%、87.5%,特异度分别为83.3%、87.5%、95.8%。结论　采用ARFI检查的SWV、SWV1可用于评估肝纤维化程度,SWV、SWV1诊断兔肝纤维化程度各期的AUC均大于0.9,具有较好的诊断效能。     

兔布鲁杆菌病性脊柱炎动物模型的建立

目的 探讨使用构建兔脊柱结核模型的相同方法用以构建新西兰兔布鲁杆菌病性脊柱炎动物模型,并对其可行性进行评价。方法 48只新西兰兔采用数表法随机分为实验组16只、对照组16只、空白组16只。实验组于第6腰椎(L6)上终板下方钻孔,填入明胶海绵,在其中浸注种植M5羊种布鲁杆菌弱毒苗混悬液0.1ml(3×10 ⁸CFU/ml);对照组浸注0.9% NaCl溶液0.1ml;空白组不做任何处理。 结果 术后8周兔存活率实验组为75.0% (12/16)、对照组为87.5% (14/16),空白组为100.0% (16/16)。实验组术后4周CT扫描三维重建结果显示5只出现椎间隙变窄,MRI检查结果显示7只有椎旁软组织脓肿形成;对照组未出现椎旁软组织脓肿形成,椎间隙无变化。实验组术后8周行CT扫描三维重建复查,结果显示8只出现椎间隙变窄,MRI检查结果显示10只出现椎旁软组织脓肿形成及椎间盘信号改变;对照组未见椎旁软组织脓肿形成及椎间盘信号改变。实验组术后8周进行组织病理学检查,显示兔椎旁软组织均有病变组织细胞增生及以淋巴细胞为主的炎性细胞浸润;对照组与空白组未出现病变组织细胞增生及炎性细胞浸润。结论 在新西兰兔腰椎椎体的上终板下钻孔、明胶海绵填塞、浸注种植M5羊种布鲁杆菌弱毒苗、石蜡封闭孔道的方法,可成功构建兔布鲁杆菌病性脊柱炎动物模型。     

Contrast-enhanced ultrasonography for the evaluation of liver fibrosis after biliary obstruction

AIM:To investigate perfusion change in contrastenhanced ultrasonography(CEUS) to evaluate liver fibrosis based on biliary obstruction using an animal model.METHODS:New Zealand white rabbits(3-4 kg) underwent bile duct ligation to form a biliary obstruction model.We performed liver CEUS and laboratory tests on the day before the operation(day 0) and every 7 postoperative days until the rabbits were sacrificed.After CEUS,signal intensity of liver parenchyma with a time-intensity curve was analyzed.Perfusion parameters were automatically calculated from regionof-interests,including peak signal intensity,mean transit time,area under the curve and time to peak.Histological grades of liver fibrosis were assessed according to the Metavir score system immediately after sacrifice.Generalized estimating equations were used to analyze the association between liver fibrosis grades and perfusion parameters for statistical analysis.The perfusion parameters were measured on the last day and the difference between day 0 and the last day were evaluated.RESULTS:From the nine rabbits,histological grades of liver fibrosis were grade 1 in one rabbit,grade 2 and 3 in three rabbits each,and grade 4 in two rabbits.Among the four CEUS parameters,only the peak signal intensity measured on the last day demonstrated a significant association with liver fibrosis grades(OR =1.392,95%CI:1.114-1.741,P =0.004).The difference in peak signal intensity between day 0 and the last dayalso demonstrated an association with liver fibrosis(OR =1.191,95%CI:0.999-1.419,P =0.051).The other parameters tested,including mean transit time,area under the curve,and time to peak,showed no significant correlation with liver fibrosis grades.CONCLUSION:This animal study demonstrates that CEUS can be used to evaluate liver fibrosis from biliary obstruction using peak signal intensity as a parameter.     

灰兔眼巩膜厚度测量

目的测量灰兔不同部位巩膜厚度,了解巩膜部位与厚度变化关系,为经巩膜眼内给药实验研究提供诠释依据。方法 实验研究。49只（98眼）成年青紫蓝灰兔经麻醉后,安乐液处死,立即摘去眼球,随后放入1.25%戊二醛和1%多聚甲醛固定液固定,制成石蜡切片后行常规苏木精-伊红（HE）染色。经生物显微镜观察拍照后用图像分析软件测量从角巩膜缘部到视神经部的巩膜厚度。对测量结果采用广义估计方程（GEE）及Tukey′s HSD Post Hoc Test分析。结果 下半部分兔眼巩膜比上半部分巩膜薄,分别是（342.9±91.3）μm和（400.4±67.6）μm（x2=43.57,P<0.01,GEE）。上半部分巩膜厚度在赤道前后及后极部差异无统计学意义,平均为（366.8±56.3）μm。下半部分巩膜厚度在赤道前和赤道部为（340.9±72.5）μm和（340.8±76.3）μm,往后进一步变薄,赤道部后为（293.9±57.4）μm,后极部为（209.0±51.8）μm。上半部分和下半部分巩膜均在神经处最薄,分别为（273.5±90.5）μm和（187.7±60.1）μm,与其他部位相比,差异有统计学意义（P<0.05,Tukey′s HSD Post Hoc Test）。结论 兔眼巩膜上半部分比下半部分厚,从部位和厚度关系分析,厚度在角巩膜缘与赤道部之间变化较大,在赤道部和后极部之间变化较小。     

丝蛋白涂层轻质聚丙烯网片对兔腹壁疝模型组织学反应的影响

目的:探讨宿主对有丝蛋白涂层和无丝蛋白涂层的2种不同轻质聚丙烯网片组织学反应的差别。方法:2种聚丙烯网片(Gynemesh网片和法国G819P网片)的有丝蛋白涂层和无丝蛋白涂层网片各6片,共计24片,裁剪为30 mm×30 mm大小。6只新西兰大白兔,每只均制作6个腹壁缺损,并分别植入有丝蛋白和无丝蛋白涂层Gy-nemesh誖网片和有丝蛋白和无丝蛋白涂层G819P网片各1片,另2个腹壁缺损作为空白对照。植入后30,60和90 d时各处死2只动物,取出包括网片在内的腹壁全层,做大体观察、组织学观察以及免疫组化研究,包括炎症、纤维化反应、网片周围血管化反应以及胶原形成等。结果:所有网片均未发生侵蚀。有丝蛋白涂层网片组炎症反应和纤维化反应较轻,网片与组织融合良好。无涂层组可见少量的凋亡和坏死。结论:有丝蛋白涂层聚丙烯网片引起实验动物的组织学反应较轻,可以降低早期炎症反应和纤维化程度,减少组织粘连,降低网片相关并发症的产生。