99Tcm-HYNIC-Annexin V动脉粥样硬化显像的实验研究

目的 探讨99Tcm-联肼尼克酰胺(HYNIC)-膜联蛋白V(Annexin V)显像检测兔动脉粥样硬化(AS)病变的价值.方法 5只雄性日本大耳白兔通过免疫损伤血管和12周高脂饮食制备成AS模型(实验组),自兔耳缘静脉按体质量注射99Tcm-HYNIC-Annexin V 37 MBq/kg,分别行活体和离体血管的99Tcm-HYNIC-Annexin V显像.5只未经特殊处理的同种白兔行活体显像作为对照.对实验组兔的主动脉分段后,测定各片段质量和放射性计数,并进行病理学和免疫组织化学检查.采用SPSS 13.0软件对数据进行统计学处理.结果 显像剂注射后2h,实验组兔主动脉可见放射性摄取达峰值,而对照组未见明显的放射性摄取,前者靶/非靶(T/NT)比值(2.70±0.26)明显高于后者(1.30±0.13,t=1.99,P＜0.05).实验组兔的主动脉血管斑块片段放射性摄取(每克组织百分注射剂量率,%ID/g)为(0.075±0.016)%ID/g,明显高于非斑块血管片段[(0.035±0.013)%ID/g,前者是后者的(4.55±0.99)倍,t=4.77,P＜0.001];两者的凋亡细胞指数(AI)分别为(40.53±14.94)%和(11.90±7.09)%,差异具有统计学意义(t=2.54,P＜0.01).所有血管片段的放射性摄取(%ID/g值)与AI呈正相关(r=0.98,P＜0.001).结论 99Tcm-HYNIC-Annexin V可以无创性地检测AS斑块的凋亡.     

牵张成骨修复下颌骨缺损组织学研究

目的探讨牵张成骨修复兔下颌骨缺损时骨组织再生的组织学改变。方法选取25只成年健康家兔，并随机分为实验组（20只）和对照组（5只），分别行一侧下颔骨缺损牵张成骨术，实验组在牵张第4、8天及固定期第1、3、5周，分别处死4只兔子，对照组在相应时间分别处死1只兔子，均取骨组织标本并观察其组织学改变。结果牵张第4、8天实验组家兔牵张区均为纤维结缔组织，并存在成纤维细胞，骨基质周缘可见大量活跃增生的成骨细胞；固定期第1、3周牵张区两端可见大量新骨形成，但中间仍为纤维结缔组织，新形成的骨组织表面始终附着大量活跃增生的成骨细胞，成行或以复层排列：固定期5周，成骨细胞明显减少，并逐渐呈现出哈佛系统。在整个观察过程中对照组截骨间隙处的成骨过程与一般的骨折愈合情况类似，以软骨化骨为主。结论牵张成骨修复下颌骨缺损以膜内成骨为主，同时辅以少量的软骨化骨。     

Papillomavirus DNA complementation in vivo

Recent phylogenic studies indicate that DNA recombination could have occurred in ancient papillomavirus types. However, no experimental data are available to demonstrate this event because of the lack of human papillomavirus infection models. We have used the cottontail rabbit papillomavirus (CRPV)/rabbit model to study pathogenesis and immunogenicity of different mutant genomes in vivo. Although the domestic rabbit is not a natural host for CRPV infection, it is possible to initiate infection with naked CRPV DNA cloned into a plasmid and monitor papilloma outgrowth on these animals. Taking advantage of a large panel of mutants based on a CRPV strain (Hershey CRPV), we tested the hypothesis that two non-viable mutant genomes could induce papillomas by either recombination or complementation. We found that co-infection with a dysfunctional mutant with an E2 transactivation domain mutation and another mutant with an E7 ATG knock out generated papillomas in rabbits. DNA extracted from these papillomas contained genotypes from both parental genomes. Three additional pairs of dysfunctional mutants also showed similar results. Individual wild type genes were also shown to rescue the function of corresponding dysfunctional mutants. Therefore, we suggest that complementation occurred between these two non-viable mutant PV genomes in vivo.     

颈动脉狭窄动物模型的构建及核因子-κB和胰岛素样生长因子-1的表达

目的 探讨建立经济实用、稳定可靠的适合颈动脉粥样硬化性狭窄外科治疗研究的动物模型的条件.通过测量核因子(NF)-κB、胰岛素样生长因子(IGF)-1的表达,探讨它们在颈动脉粥样硬化性狭窄发生、发展中的作用.方法 日本大耳白兔40只,采用血管内膜气体干燥损伤法在动物的颈总动脉上造成特定条件的损伤(160 ml/min×15 min),然后以特定高脂饲料(饲料中含2%的胆固醇和6%的花牛油)喂养动物不同时间(30、60和90 d).通过血脂测定、DSA、HE染色评价各组动物血管狭窄程度,再观察其病珲改变特点.应用免疫组织化学方法观察NF-KB和IGF-1在动脉粥样硬化斑块中的表达特点.结果 病理检查证实:随着喂养时间的延长,动脉粥样硬化程度加重,高脂喂养加干燥气体损伤90 d时,血管狭窄率达71.53%±3.65%(q=568.417,P=0.000),动脉的粥样硬化病理改变已属较成熟的粥样斑块期.正常血管的内膜和中膜内均未见明显的NF-κB和IGF-1的表达,模型组血管斑块内NF-κB、IGF-1表达呈强阳性,表达面积分别为59.66%±12.04%(t=22.98,P＜0.01)、54.48%±12.92%(t=5.76,P＜0.01),明显高于对照组(分别为8.34%±2.66%和16.38%±8.22%).结论 按本实验方法,90 d时颈动脉狭窄程度和病理改变程度符合颈动脉粥样硬化性狭窄外科治疗的实验研究需要.NF-κB及其靶基因IGF-1的激活与动脉粥样硬化病变的发生和发展密切相关,在颈动脉粥样硬化斑块形成过程中发挥重要作用.     

西维来司钠对肝缺血再灌注后肺损伤保护作用的实验研究

目的观察西维来司钠对家兔肝热缺血再灌注肺组织中性粒细胞浸润及IL-8表达的影响并探讨其机制。方法24只家兔被随机分为假手术组、对照组和西维来司钠治疗组,各8只,均于常温全肝门阻断25min,分别于缺血前、再灌注即刻、灌注后1、2、3、4h取血,然后处死家兔取肺组织,ELISA检测血清IL-8水平,HE染色切片观察肺组织病理变化、中性粒细胞数、肺水肿程度,免疫组化检测肺组织IL-8蛋白表达并分析血清IL-8水平与中性粒细胞数的相关性。结果假手术组血清IL-8无明显变化,肺组织未发现IL-8蛋白表达及肺水肿;治疗组IL-8峰值、肺组织中性粒细胞数、IL-8蛋白表达、肺水肿程度均低于对照组相同指标（P〈0．05）,血清IL-8峰值与4h时肺组织中性粒细胞浸润数成正相关（r=0．788,P〈0．01）。结论西维来司钠可能通过抑制肺组织IL-8表达,从而抑制中性粒细胞浸润,达到减轻肝热缺血再灌注导致的肺损伤。     

自体软骨细胞团块植入修复兔陈旧性关节软骨缺损的实验研究

目的 观察自体软骨细胞团块植入对兔关节软骨缺损的修复作用. 方法 24只成年新西兰大白兔48侧膝关节,随机分为三组(n=16)并制备双膝关节股骨滑车软骨缺损模型.空白对照组无特殊处理,骨膜移植组将骨膜覆盖缺损并缝合于缺损两侧的股骨髁上,实验组将自体软骨细胞团块植入缺损中.术后3、6个月分别取材(n=8),进行大体和组织学观察,修复组织行Wakitani评分并进行比较. 结果实验组共成功取材11个缺损关节,9个为透明软骨修复,2个因植入细胞生长状态差未修复;骨膜移植组修复组织为纤维软骨或纤维组织,修复组织薄,基质异染弱;空白对照组仅有少量纤维组织填充缺损底部.修复组织Wakitani评分:实验组3.82分,骨膜移植组6.71分,空白对照组9.23分,差异有统计学意义(F=5.96,P=0.00). 结论自体软骨细胞团块植入能较好修复关节软骨缺损,修复的质量与植入细胞的质量有关.     

320排CT灌注成像评价兔下肢缺血再灌注损伤

目的 观察兔下肢急性缺血再灌注损伤CT灌注成像（CTPI）参数的演变规律及与血清酶学检测指标（CK、LDH、MDA、SOD）的相关性。方法 将30只新西兰大白兔随机分为缺血再灌注（I/R）组与假手术组。将I/R组分为再灌注即刻、6、12、24 h亚组,每组6只,分别在右下肢缺血3 h后再灌注即刻、6 h、12 h、24 h时间点行双下肢CTPI并采血,得到CT灌注值血流量（AF）、血容量（BV）、对比剂清除率（C）,计算右下肢与左下肢各参数的比值,即rAF、rBV、rC,并测定血清CK、LDH、MDA、SOD;最后分别对rAF、rBV、rC与生化指标进行相关性分析。 结果 与假手术组比较,I/R组再灌注即刻、6、12、24 h亚组的rAF均值分别为0.92±0.14、0.89±0.12、0.88±0.20、0.75±0.11,随再灌注时间延长逐渐降低（P<0.05）;I/R各亚组血清CK、LDH及MDA显著高于假手术组（P均<0.05）,而SOD随再灌注时间延长而逐渐降低（P<0.05）。rAF与LDH、CK、MDA、SOD的相关系数分别为-0.64、-0.47、-0.68、0.59（P均<0.05）,仅rBV与LDH存在相关性（r=-0.45,P<0.05）。结论 320排CTPI可无创、半定量、较准确地监测兔下肢骨骼肌随再灌注时间推移的微循环改变;rAF较rBV、rC能更好地反映肌肉组织再灌注后损伤情况。     

巨噬细胞MRI检测兔早期腹主动脉粥样硬化斑块

目的 观察巨噬细胞MRI在检测兔早期动脉粥样硬化斑块中的应用价值。方法 将10只健康新西兰兔随机均分为模型组及对照组,对模型组通过球囊拉伤联合高脂饲料建立腹主动脉粥样硬化模型,对照组不予任何干预。对两组动物行MR扫描,检测静脉注射葡聚糖四氧化三铁纳米颗粒（DCIONP）对比剂前及注射后45 min、24 h、48 h、72 h、96 h和120 h 血管壁信号强度（SI）及信号强度变化值（ΔSI）。之后处死动物,病理观察动脉粥样硬化斑块。结果 模型组斑块注射DCIONP后45 min SI升至最高,48 h开始低于注射前水平,96 h降至最低;对照组管壁于注射DCIONP后45 min均匀强化,24 h后SI基本恢复至注射前水平,其后SI无明显变化。两组间各时间点ΔSI差异均有统计学意义（P均<0.05）。病理结果表明血管壁信号衰减区与斑块内铁蓝染区及巨噬细胞分布相符。结论 巨噬细胞MRI可检测兔早期动脉粥样硬化斑块,可能具有潜在临床应用价值。     

冷热交替消融正常兔肝的影像学与病理学研究

目的 探讨正常兔肝冷热交替消融后消融灶的动态影像学和病理学变化。方法 对20只正常兔肝进行冷热交替消融。消融后1、3、7、14天行CT和CEUS,之后各处死5只兔,观察消融灶的病理学改变。结果 消融灶中心呈凝固性坏死。消融后7天内,坏死灶周围组织充血水肿和急性炎细胞浸润,CT平扫为低或等密度灶,常规超声为低回声为主的混合回声区;增强后均表现为无强化坏死灶和动脉期周边环状增强。消融后7~14天,坏死灶周围组织充血水肿好转,有纤维组织增生、慢性炎细胞浸润及钙化形成,表现为环形强化逐渐减轻消失,消融灶缩小。结论 冷热交替消融可在正常兔肝中产生凝固坏死灶;CT增强扫描和CEUS能有效反映不同时期肝脏消融灶的病理学变化,准确显示消融灶范围。