三七含药血清对成纤维细胞功能及VEGF、TGF-β、CollagenⅠ表达的影响

目的:探讨三七含药血清对L929成纤维细胞增殖、迁移及血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β(TGF-β)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)表达的影响。方法:将28只SPF级SD大鼠随机分为对照组及三七低、中、高剂量组,制备血清。体外培养小鼠成纤维细胞系L929,对照组给予生理盐水血清,低、中、高剂量组给予相应的三七含药血清干预。CCK-8法检测成纤维细胞增殖,划痕实验检测成纤维细胞迁移,RT-qPCR及Western Blot分别检测VEGF、TGF-β、CollagenⅠ的mRNA及蛋白表达。结果:与对照组比较,低剂量组细胞干预24 h后OD值及干预48 h后迁移愈合百分比升高(P<0.05),VEGF、TGF-β蛋白及mRNA表达增加(P<0.05);中剂量组细胞干预24 h后OD值及干预48 h后迁移愈合百分比提高(P<0.05),VEGF、TGF-β、CollagenⅠ蛋白及mRNA表达增加(P<0.05);高剂量组细胞干预24 h后OD值及干预48 h后迁移愈合百分比降低(P<0.05),VEGF、TGF-β蛋白及mRNA表达下降(P<0.05)。与低剂量组比较,中剂量组细胞干预24 h后OD值及干预48 h后迁移愈合百分比升高(P<0.05),VEGF、TGF-β、CollagenⅠ蛋白及mRNA表达增加(P<0.05);高剂量组细胞干预24 h后OD值及干预48 h后迁移愈合百分比降低(P<0.05),VEGF、TGF-β蛋白及mRNA表达下降(P<0.05)。与中剂量组比较,高剂量组细胞干预24 h后OD值及干预48 h后迁移愈合百分比降低(P<0.05),VEGF、TGF-β、CollagenⅠ蛋白及mRNA表达下降(P<0.05)。结论:中剂量三七含药血清可促进成纤维细胞增殖和迁移,并上调VEGF、TGF-β、CollagenⅠ的表达,且疗效优于低剂量,而高剂量则抑制成纤维细胞增殖、迁移及VEGF、TGF-β的表达,不利于创伤愈合。     

降脂瘦身汤对非酒精性脂肪肝大鼠脂代谢及核转录因子-κB蛋白表达影响的实验研究

目的:研究降脂瘦身汤对非酒精性脂肪肝(NFALD)大鼠脂代谢及核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达的影响。方法:将32只SD大鼠随机分为正常组、模型组、降脂瘦身汤组,除正常组外,其余两组采用高脂饲料喂养8周建立非酒精性脂肪肝大鼠模型。造模成功后,降脂瘦身汤组给予相应的药物水溶液,正常组和模型组给予等量0.9%氯化钠溶液灌胃,疗程4周。称取大鼠体重、肝湿重,计算肝指数,检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、血糖(Glu)、游离脂肪酸(FFA)、胰岛素(INS)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏组织病理的变化; 观察NF-κB蛋白表达情况。结果:①与正常组相比,模型组大鼠体重、肝湿重、肝指数增加(均P<0.01),血清Glu、FFA、TG、TC、INS水平升高(均P<0.05); ②与模型组相比,中药降脂瘦身汤组大鼠体重、肝湿重、肝指数下降(均P<0.01),血清Glu、FFA、TG、TC、INS水平降低(均P<0.05); ③HE染色显示,模型组大鼠肝脏脂肪变性明显,降脂瘦身汤组病变轻于模型组; ④降脂瘦身汤组大鼠脂肪组织NF-κB-p65、NF-κB-p-p65蛋白水平较模型组显著降低(均P<0.05)。结论:中药降脂瘦身汤可明显降低非酒精性脂肪肝大鼠的血脂水平,改善肝脏病理损伤; 其机制可能与下调NF-κB蛋白表达相关。     

四氢巴马汀对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨四氢巴马汀(l-THP)对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法:Wistar大鼠24只,分为假手术组、模型组和l-THP治疗组,结扎大鼠冠状动脉左前降支30min再灌注120min造成心肌缺血再灌注损伤模型,分别于缺血30min、再灌注30min、60min、90min、120min观察l-THP对大鼠心功能、心肌酶学和脂质过氧化的影响。结果:l-THP能够对抗心肌缺血再灌注损伤引起的左心室内压(LVSP)、左心室内压最大上升与下降速率(±dp/dtmax)下降,左心室舒张末期压力(LVEDP)的升高,并能够稳定心肌组织Na -K -ATPase和Ca2 -Mg2 -ATPase活性,降低丙二醛(MDA)含量和增高超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结论:四氢巴马汀(l-THP)对大鼠心肌缺血再灌注引起的心功能降低具有明显的保护作用,其机制可能与改善能量代谢障碍和抑制自由基生成或清除氧自由基作用有关。     

针刺对戊四氮致痫大鼠抗癫痫机制的研究

目的:探讨针刺对戊四氮(PTZ)致痫大鼠抗癫痫的作用机制。方法:将实验大鼠分为NS组、PTZ组和针刺组,造模后观察各组大鼠癫痫发作的行为学表现,采用免疫组化法检测大脑皮质及海马caspase-3在36 h和72 h时间点免疫反应性,采用半定量RT-PCR法检测海马bcl-2、bax蛋白表达。结果:针刺组大鼠癫痫发作较PTZ组减轻;在36 h时间点,PTZ组大鼠大脑皮质及海马caspase-3免疫反应性、海马bax mRNA的表达高于NS组(P<0.05),针刺治疗可拮抗其高表达(P<0.05),Bcl-2与Bax蛋白的表达水平呈负相关,在72 h时间点各组之间差异更为明显。结论:PTZ致痫诱导大鼠海马神经元凋亡,针刺PTZ致痫大鼠百会、大椎穴可减轻癫痫发作程度,可能通过抑制凋亡途径进而对神经元发挥神经保护产生抗癫痫效应。     

脊神经刺激诱导2型糖尿病大鼠模型的建立

目的探讨一种建立2型糖尿病大鼠模型的方法。方法选择雄性大鼠46只,随机分为2组。模型组23只大鼠在左侧T6～11椎间关节处,手术置入特制的硅胶片,制作胰腺自主神经刺激大鼠模型;对照组23只大鼠仅行左侧T6～11椎间关节处切开手术。普通饲养28～45 d,期间分别测定血糖和胰岛素浓度,实验结束腹腔麻醉取大鼠胰腺作β细胞内颗粒病理检查。结果模型组大鼠体质量增长变慢,血糖浓度显著高于对照组,胰岛素水平显著低于对照组（t=4.69～16.66,P〈0.05）。模型组大鼠胰腺β细胞内颗粒减少。结论脊神经刺激可诱导建立2型糖尿病大鼠模型,为中医推拿整脊治疗糖尿病提供了科学实验模型。     

清热祛瘀汤对慢性盆腔炎性疾病模型大鼠的影响

目的:探讨清热祛瘀汤对慢性盆腔炎性疾病模型大鼠的炎性反应细胞因子及粘连相关免疫分子的影响。方法:选取100只Wistar雌性大鼠为研究对象,以随机分组方式将其分为5组,分别为模型对照组、假手术组、清热祛瘀汤组(包括低、中、高3种不同剂量),每组20只;除假手术组外,其余5组均建立盆腔炎性疾病大鼠模型;于清热祛瘀方作用下对其炎性反应细胞因子、血液流变学、粘连相关免疫分子变化情况进行分析。结果:与假手术组比较,模型对照组大鼠血液流变学各指标均明显升高变(P<0.05);而经治疗后,各指标均明显下降,且与模型对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);模型对照组与假手术组比较,大鼠血清IL-4、IL-10、TNF-α、IgA、IgG差异均有统计学意义(P<0.05);经治疗后,清热祛瘀方各剂量组各指标水平均发生明显改变(P<0.05)。结论:清热祛瘀汤对慢性盆腔炎性疾病模型大鼠的炎性反应细胞因子及粘连相关免疫分子、血液流变学均有较大影响,可推广应用。     

骨髓间质干细胞（MSCs）移植对高血压大鼠动脉传导速度的影响

目的通过对于ISH模型鼠及SHR大鼠接受MSC移植干预后脉搏波传导速度及脉压变化的研究,探讨MSCs在改善病变动脉功能中的作用。方法选取自发性高血压大鼠(SHR)及单纯收缩期高血压大鼠作为研究对象,采用左心室直接注射的方法进行干细胞移植,在体条件下对于实验动物的血压及脉搏传导速度进行检测,并对结果进行分析。结果MSCs移植对于实验动物收缩压的变化没有影响,并不改变血压变化的趋势,但能够降低ISH动物脉压水平(32.407±2.55),同时降低PWV(178.6526±18.5494),与同组对照相比具有统计学差异(P<0.01)。SHR组接受细胞干预的亚组并没有呈现相同的变化趋势。进一步的相关分析发现,PP与PWV的变化具有正向相关性,相关系数为0.665。结论MSC移植治疗能够改善损伤动脉的传导速度,降低动脉的僵硬程度,部分逆转血管重塑的过程,从而延缓高血压动脉损伤的进程,降低心血管恶性事件的发生率。     

雷公藤多苷对类风湿关节炎大鼠Ras/Raf1原癌基因表达的影响

目的：探究雷公藤多苷对类风湿关节炎大鼠关节血清及组织Ras/Raf1表达的影响。方法：将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组和干预组,每组20只。模型组与干预组建立大鼠风湿关节炎模型,干预组用雷公藤多苷干预,对照组和模型组给予等量生理盐水。以足趾肿胀度为模型标准和疗效判定指标,实验终点通过酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测大鼠血清Ras、Raf1以及炎症介质肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）水平,实验终点通过Western Blotting检测大鼠滑膜组织Ras和Raf1蛋白表达量并对大鼠踝关节进行HE染色分析。结果：ELISA结果表明,与对照组比较,模型组血清Ras、Raf1、TNF-α、IL-6显著升高（均P<0.01）,与模型组比较,干预组血清Ras、Raf1、TNF-α、IL-6显著降低（均P<0.01）;Western Blotting结果表明：与对照组大鼠比较,模型组大鼠滑膜组织Ras、Raf1显著升高（均P<0.01）,与模型组比较,干预组大鼠滑膜组织Ras、Raf1显著降低（均P<0.05）。HE染色表明：与对照组比较,模型组病理总评分升高（P<0.01）,与模型组比较,干预组病理总评分下降（P<0.05）。结论：雷公藤多苷可抑制大鼠血清炎症介质释放并降低外周血和关节组织中Ras、Raf1蛋白的表达,起到骨保护作用。     

Antihyperalgesic effects of ginseng total saponins in a rat model of incisional pain

Background

The aim of this study was to assess whether intraperitoneal administration of ginseng total saponins (GTS) has antihyperalgesic effects in a rat model of incisional pain. The proinflammatory responses and reversal of the antihyperalgesic effect of GTS by N-methyl-d-aspartate (NMDA) or naloxone were also evaluated.

Materials and methods

Rats were injected intraperitoneally with 0.9% saline vehicle or various doses of GTS before or after a plantar incision. Paw withdrawal in response to application of the von Frey filament with the lowest bending force marked the mechanical withdrawal threshold (MWT). Blood samples were collected for the assessment of serum interleukin (IL)-1β and IL-6 levels. The IL levels were measured using an enzyme-linked immunosorbent assay kit. Rats were injected intraperitoneally with NMDA or naloxone before the GTS injection to assess the reversal of the antihyperalgesic effect of GTS.

Results

The MWT measured 2 h after the plantar incision increased significantly after the postincision administration of 50, 100, or 200 mg/kg of GTS compared with the MWT at 2 h after plantar incision. The MWT also increased significantly after the preincision injection of 100 or 200 mg/kg of GTS compared with the MWT of the vehicle control. Administration of GTS suppressed the postincision rise in serum IL-1β levels and NMDA inhibited the increase in the MWT compared with GTS alone.

Conclusions

Intraperitoneal administration of GTS before or after surgery induces antihyperalgesic effects in a rat model of incisional pain. The effects on mechanical hyperalgesia may be associated with anti-inflammatory cytokines and NMDA signaling.     

纳洛酮对脑出血大鼠抓握能力的改善及血清S100B水平的影响

目的：探讨纳洛酮对脑出血大鼠抓握能力的改善及血清S100B水平的影响，为其临床应用提供理论依据。方法：40只SD大鼠随机分成假手术组，手术组，纳洛酮组，脑复康组，参照Rosenberg法制作大鼠脑出血模型，造模第二天测定大鼠抓握能力，用ELISA法检测造模后24小时及48小时血清S100B水平。结果：（1）纳洛酮组大鼠抓握能力明显好于手术组，两者比较有显著差异（P<0.05）。（2）纳洛酮组大鼠血清S100B水平明显低于手术组, 两者比较有显著差异（P<0.05）。结论：纳洛酮能明显改善脑出血大鼠抓握能力，降低血清S100B水平，具有神经保护作用。